一种芦丁缀合物的制备及其药效学研究

发布时间：2020-08-18 13:57

【摘要】：芦丁(Rutin,RT)是一种黄酮类化合物,具有抗炎、抗氧化、抗菌、抗癌和降血压等活性。然而,由于其水溶性较差、口服生物利用度低,因此在临床应用中受到诸多限制,为了扩大芦丁的应用范围,本实验用透明质酸(Hyaluronic acid,HA)修饰改造芦丁,大大的提高了其水溶性,并且,它使芦丁在抗炎、抗菌、抗氧化等作用方面得到了一定的提高。本课题主要开展了以下研究内容:1通过碱提取和酸沉淀法提取、分离芦丁,条件:提取溶剂为碱水,料液比为1:10,提取温度为60℃,提取时间为30min,提取次数为3次,经核磁共振氢谱(~1H-NMR)、红外光谱(FT-IR)、紫外光谱(UV)进行了表征;2用HA修饰改造RT得到溶解度为850mg/mL的水溶性化合物HA-RT(RT在HA上的接枝率为50%),~1H-NMR、FT-IR、UV进行了表征,并经溶血试验、稳定性实验以及细胞毒性实验证明HA-RT有较好的生物安全性;3体外采用ELISA试剂盒测RT、HA-RT、地塞米松(DXMS)对脂多糖诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症因子(NO、TNF-α、IL-1β)的影响,体内采用耳廓肿胀法测RT、HA-RT对二甲苯致炎的小鼠的影响。结果表明HA-RT组炎症因子(NO、TNF-α、IL-1β)的含量均低于RT组,在同一摩尔浓度下,RT、HA-RT及DXMS的抗炎能力大小为DXMSHA-RTRT,HA-RT组小鼠耳廓肿胀率低于RT组,说明HA-RT的抗炎效果优于RT(HA-RT中芦丁的含量与芦丁单体的含量相同);4采用试管法测RT、HA-RT对大肠埃希氏菌、白色念珠菌和金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。结果显示HA-RT(溶剂为灭菌水,HA-RT中芦丁的含量与芦丁单体的含量相同)对大肠埃希氏菌的MIC、MBC分别为0.08mg/mL、0.11 mg/mL,对金黄色葡萄球菌的MIC、MBC分别为0.11 mg/mL、0.13 mg/mL,对白色念珠菌的MIC、MBC分别为0.07 mg/mL、0.09 mg/mL,RT(溶剂为20%乙醇)组对三种细菌的MIC(0.4 mg/mL)、MBC(0.8mg/mL)均高于HA-RT组,说明HA-RT的抗菌效果优于RT;5采用清除DPPH自由基法、清除ABTS~+自由基法、清除超氧阴离子自由基(O~(2-))法测RT、HA-RT和Vc的抗氧化活性,结果表现为:在浓度达到一定程度后,Vc和HA-RT对DPPH自由基、ABTS~+自由基、O~(2-)自由基的清除率相当,几乎达到100%,但HA-RT对超氧阴离子自由基(O~(2-))的清除率在各个浓度均大于RT,说明HA-RT的抗氧化能力较强。综上所述,HA-RT的制备达到了最初的研究目的,极大的提高了RT的水溶性,使其在抗炎、抗菌、抗氧化等应用上有较好的开发、生产和应用前景。
【学位授予单位】：河南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5;R284.2
【图文】：

芦丁,结构式,药效学研究

一种芦丁缀合物的制备及其药效学研究量的水，用 Ca(OH)2将 PH 调滤后用 1mol/L HCL 将 PH 调至 Ca(OH)2将 PH 调节至 8-9。加置过滤，烘干即得芦丁。所得芦为芦丁结构式。

芦丁,紫外吸收图谱,标准品,图谱

2.5 实验结果2.5.1 芦丁的鉴别芦丁的 UV 图谱（图2-2）、FT-IR 图谱 (图3-2)、1H-NMR 图(图3-3)及图谱解析见2.5.2、3.5.1、3.5.2。2.5.2 测定波长的选择芦丁标准品与槐米中提取的芦丁的紫外吸收光谱如图 2-2 所示。图谱显示，在 200～400 nm 波长内芦丁有三个吸收峰，为 205 nm、257 nm、358 nm，其中芦丁在 205 nm、257 nm 处有较大吸收。而芦丁在 205 nm 处的吸收峰干扰因素较多，故将芦丁的测定波长选择为 257 nm[47]。

标准曲线,芦丁,标准品,标准曲线

芦丁标准品芦丁图 2-2 芦丁标准品与芦丁的紫外吸收图谱标准品标准曲线的绘制不同浓度芦丁标准品吸光度，以溶液浓度（c）为横到芦丁标准品回归方程为 A= 0.0375c（r = 0.9998 范围内线性关系良好，故而以紫外分光光度法测定

【参考文献】