子芩与枯芩化学成分及药效差异研究

发布时间：2020-08-21 12:51

【摘要】：1目的从古代至近代,在临床上黄芩被分为子芩和枯芩两种规格,而现今已不再分别使用。为明确子芩和枯芩分别使用的合理性,本论文分析了两种规格饮片的主要活性成分含量以及整体化学成分的差异;并从抑菌作用、动物体内药效分析子芩与枯芩药效学差异。为子芩与枯芩两种规格的临床应用提供实验依据。2方法与结果2.1超高效液相色谱法检测有效成分含量采用超高效液相色谱法对10批子芩与枯芩有效成分进行含量测定,分析子芩与枯芩有效成分含量的差异。结果显示,与枯芩相比,子芩的黄芩苷和汉黄芩苷含量较高,分别高出28.96%、54.01%;而黄芩素、汉黄芩素、千层纸素A含量则明显较低,分别低70.46%、44.35%、59.89%。其中10批子芩中黄芩苷与黄芩素比值范围在15.10-21.07之间;10批枯芩中黄芩苷与黄芩素比值范围在3.30-4.99之间。2.2子芩与枯芩指纹图谱差异研究采用超高效液相色谱法建立子芩和枯芩的指纹图谱,得到12个共有峰,共有峰面积占总峰面积的比值均大于94.10%,对10批子芩和10批枯芩的指纹图谱进行主成分分析,选取了两个主成分1、2,其总累计方差贡献率为99.59%,在主成分分析得分散点图中显示子芩与枯芩分布在不同的区域。10批子芩中黄芩苷与黄芩素峰面积比值≥10;10批枯芩中黄芩苷与黄芩素峰面积比值3。2.3子芩与枯芩抗菌作用差异研究对子芩和枯芩分别水提和醇提,采用二倍稀释法,将各提取物稀释成0.03125、0.0625、0.125、0.25、0.5、1g/mL六个浓度,分别对肺炎链球菌和大肠杆菌的抑菌作用进行分析,结果表明浓度为1g/mL时,醇提物抑菌作用均优于水提物(P0.05),其中浓度在0.5g/mL时,醇提物对肺炎链球菌的抑菌率达到93%以上,对大肠杆菌的抑菌率达到90%以上。且枯芩对肺炎链球菌的抑菌作用优于子芩,其中浓度分别在0.5g/mL和1g/mL时,枯芩醇提物的抑菌率分别为93%、99%;子芩对大肠杆菌的抑菌作用优于枯芩(P0.05),其中浓度在0.5g/mL和1g/mL时,子芩醇提物对大肠杆菌的抑菌率分别为90%、97%。结合化学成分的差异进行黄芩苷和黄芩素配伍组抑菌作用的分析,当黄芩苷与黄芩素配伍比例在1:1,浓度在1mg/mL时,对肺炎链球菌的抑菌率达90%左右,且浓度在2mg/mL时,对肺炎链球菌的抑菌率达94%以上,其他配比在不同浓度下均没达到有效抑菌作用;当黄芩苷与黄芩素配伍比例在21:1,浓度在2mg/mL时,对大肠杆菌的抑菌率达95%左右,其他配比在不同浓度下均没达到有效抑菌作用。2.4子芩与枯芩体内药效学差异研究以细菌性肺热模型大鼠,研究子芩和枯芩的药效学差异。结果表明造模后模型组与空白组相比,体温升高、肺重系数增加、血常规各项指标和致炎因子均显著上升(P0.01),说明造模成功。当给予子芩和枯芩进行治疗后,大鼠的体温、肺重系数、血常规和致炎因子均有不同程度的下降(P0.01),且模型组肺部病理切片与空白组相比,出现炎性细胞浸润和部分粉红色均质物质,经给药治疗后症状得到一定的改善,并且枯芩的整体治疗效果显著优于子芩(P0.01)。以大肠湿热证模型大鼠,研究子芩和枯芩的药效学差异。结果表明造模后模型组与空白组相比,体温升高,胸腺和脾指数增加、致炎因子均显著上升(P0.01),说明造模成功。当给予子芩和枯芩进行治疗后,大鼠的体温、胸腺指数、脾指数和致炎因子均得到一定程度的改善(P0.01),且模型组回肠病理切片与空白组相比,出现肠组织结构异常和部分粉红色均质物质;模型组结肠病理切片与空白组相比,出现隐窝消失,杯状细胞数量减少,经给药治疗后上述症状均得到一定的改善,并且子芩的整体治疗作用显著优于枯芩(P0.01)。3结论3.1超高效液相色谱法检测有效成分含量子芩和枯芩中有效成分含量具有显著性差异。其中子芩中黄芩苷和汉黄芩苷含量较高,而黄芩素、汉黄芩素、千层纸素A含量则低于枯芩。3.2子芩与枯芩指纹图谱差异研究子芩与枯芩超高效液相指纹图谱在主成分分析得分图中被明显划分为两个部分,说明子芩与枯芩的整体化学成分具有显著性差异。3.3子芩与枯芩抗菌作用差异研究子芩与枯芩的抗菌作用具有显著性差异。子芩对大肠杆菌的抑菌效果优于枯芩,而枯芩对肺炎链球菌的抑菌效果优于子芩;且醇提物的抑菌效果均优于水提物。黄芩苷与黄芩素配伍比例接近子芩中比例时,对大肠杆菌的抑菌效果较好,而配伍比例接近枯芩中比例时,对肺炎链球菌的抑菌效果较好。子芩与枯芩抑菌作用的差异可能与其黄芩苷和黄芩素的配伍比例不同有关。3.4子芩与枯芩体内药效学差异研究子芩与枯芩体内药效学具有显著性差异。枯芩对细菌性肺热模型大鼠的治疗作用优于子芩;子芩对大肠湿热证模型大鼠的治疗作用优于枯芩。与传统中医药理论中枯芩善清肺胃之热,子芩长于泻大肠下焦之火相印证。
【学位授予单位】：湖北中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R284;R285
【图文】：

样品液相图谱分别见图 1-2、图 1-3，含量测定结果见表 1-5, 子芩与枯芩中黄芩苷/黄芩素比值结果见表 1-6。图1-1 对照品 UPLC 含量测定图谱1.黄芩苷 2.汉黄芩苷 3.黄芩素 4.汉黄芩素 5.千层纸素 AFig. 1-1 UPLC content determination of mixed reference solution1.baicalin 2.wogonoside 3.baicalein 4.wogonin 5.oroxylinA图1-2 子芩(S5)UPLC 含量测定图谱Fig.1-2 UPLC content determination in Scutellaria baicalensis Pith-decayed(S5)

Fig. 1-1 UPLC content determination of mixed reference solution1.baicalin 2.wogonoside 3.baicalein 4.wogonin 5.oroxylinA图1-2 子芩(S5)UPLC 含量测定图谱Fig.1-2 UPLC content determination in Scutellaria baicalensis Pith-decayed(S5)

子芩与枯芩化学成分及药效差异研究7图1-3 枯芩(S5)UPLC 含量测定图谱Fig.1-3 UPLC content determination in Scutellaria baicalensis Pith-nodecayed(S5)表1-5 含量测定结果(n=3)Tab.1-5 Results of content determination(n=3)样 品成分S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10平均含量（%）差异(%)黄芩苷（%）子芩12.56 12.78 13.03 11.82 11.93 11.60 12.82 12.47 12.85 12.27 12.41+28.96枯芩10.44 10.35 10.43 8.02 8.24 8.01 9.99 10.12 10.11 10.53 9.63汉黄芩苷（%）子芩2.64 2.69 2.74 2.57 2.55 2.52 2.73 2.56 2.67 2.51 2.62枯+54.01芩1.90 1.91 1.89 1.58 1.57 1.56 1.61 1.59 1.62 1.78 1.70黄芩素（%）子芩0.75 0.76 0.77 0.78 0.79 0.76 0.63 0.64 0.61 0.70 0.72-70.46枯芩3.14 3.14 3.10 2.13 2.11 2.14 2.14 2.15 2.16 2.11 2.43汉黄芩素（%）子芩0.43 0.43 0.44 0.45 0.44 0.45 0.33 0.34 0.33 0.37 0.40-44.35枯芩0.71 0.71 0.72 0.72 0.71 0.73 0.74 0.74 0.75 0.69 0.72千层纸素 A（%）子芩0.26 0.26 0.27 0.27 0.27 0.28 0.25 0.26 0.25 0.28 0.27-59.89枯芩0.69 0.71 0.69 0.68 0.64 0.66 0.64 0.63 0.65 0.64 0.66注：子芩较枯芩含量高为“+”，低为“-”

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本文编号：2799402