药用植物挥发油的提取及抗抑郁活性研究

发布时间：2020-08-21 22:53

【摘要】：抑郁症是一种常见的精神障碍,目前世界已有超过3.5亿人患有抑郁症,遍布各个年龄层,每年约有80万人因为抑郁症而自杀。抑郁症会严重影响人们的身心健康,也会给社会带来极大的负担。当前临床上常用的抗抑郁药物主要是西药,但是西药治疗具有副作用大的缺点,且受到中华传统文化影响,患者常拒绝服用传统抗抑郁药。因此开发出更多副作用较小、患者较易接受的抗抑郁药物具有重要的意义。目前,天然产物由于副作用小等优点已经越来越受到关注,而且其天然属性使得人们较易接受。挥发油是一种具有多方面药理活性的天然产物,包括抗抑郁活性。挥发油的提取方法多种多样,影响着挥发油的得油率、成分组成以及各成分相对百分含量,而挥发油的化学成分组成与挥发油的药理活性密切相关。选择合适的提取方法得到所需挥发油后,对挥发油的化学成分进行分析,可以为挥发油的药理活性研究提供一定的理论依据;再对挥发油的抗抑郁活性进行探究,可以开发出更多具有抗抑郁作用的新产物,具有重要的意义。罗勒、甜橙和薰衣草均是富含挥发油的药用植物,且罗勒挥发油、甜橙挥发油和薰衣草挥发油均已被证明具有一定的神经生物活性,如抗焦虑活性。焦虑患者会在一定情况下转为抑郁,而抑郁患者也极有可能最终患上焦虑,焦虑与抑郁之间的关系密不可分。罗勒挥发油、甜橙挥发油和薰衣草挥发油均具有抗焦虑作用,也极有可能具有抗抑郁作用,因此本文选择罗勒挥发油、甜橙挥发油和薰衣草挥发油为研究对象。首先,以罗勒挥发油为例,研究水蒸气蒸馏法(Steam Distillation,SD)、索氏提取法(Soxhlet Extraction,SE)、超临界CO2萃取法(Supercritical CO2 Extraction,SFE)与超声辅助萃取法(Ultrasonic Assisted Extraction,UAE)对挥发油的得油率、化学成分以及各成分相对百分含量的影响,为现代药用植物制剂生产过程的提取方法提供一定的参考依据。然后,采用SD法对罗勒挥发油、甜橙挥发油和薰衣草挥发油进行提取后,采用气相色谱-质谱联用方法(Gas chromatography-Mass spectrometry,GC-MS)对三种挥发油的化学成分进行分析,以期为三种挥发油的抗抑郁活性研究提供更多的物质基础依据。最后采用动物行为学实验初步探究了罗勒挥发油、甜橙挥发油与薰衣草挥发油的抗抑郁活性,采用志愿者实验初步探究了罗勒挥发油对志愿者的抗抑郁活性,为开发更多具有抗抑郁作用的药物或保健品提供参考依据,为预防和治疗抑郁症提供更多的选择。本论文主要研究内容如下:1.对罗勒挥发油的提取工艺进行研究。采用SD法、SE法、SFE法以及UAE法对罗勒挥发油进行提取,通过GC-MS对挥发油化学成分进行分析。结果表明,不同的提取方法对罗勒挥发油的得油率、成分组成以及各成分相对百分含量有影响。四种方法提取所得挥发油的得油率高低分别为SFE法(1.10%)SE法(0.86%)UAE法(0.72%)SD法(0.40%),SD法、SE法、SFE法以及UAE法提取得到的挥发油分别鉴定了48、45、42、49种成分,独有成分分别为14、9、17、8种,共有成分为21种。SD法提取得到的挥发油的主要成分是草蒿脑(46.83%)和芳樟醇(20.06%),SE法是9,12,15-十八烷三烯-1-醇(28.79%)、α-杜松醇(8.40%)和草蒿脑(8.23%),SFE法是草蒿脑(42.25%)和芳樟醇(10.73%),UAE法是草蒿脑(28.50%)、芳樟醇(9.45%)和亚麻酸(7.84%)。不同的化学成分具有不同的生理活性与药用价值,因此在综合考虑所需要的组分后,选择合适的提取方法或多种方法联合提取挥发油可以得到最大的效益。2.对罗勒挥发油、甜橙挥发油和薰衣草挥发油进行提取及成分分析。采用SD法提取罗勒挥发油、甜橙挥发油和薰衣草挥发油,再通过GC-MS技术对三种挥发油的化学成分进行分析鉴定。罗勒挥发油鉴定了48种化合物,主要成分是草蒿脑(46.83%)和芳樟醇(20.06%),甜橙挥发油鉴定了25种,主要成分是柠檬烯(41.77%)、草蒿脑(24.10%)和芳樟醇(17.00%),薰衣草挥发油为42种,主要成分是芳樟醇(20.12%)和乙酸熏衣草酯(10.69%)。三种挥发油成分有一定差异,但其主要成分均有芳樟醇。罗勒挥发油和甜橙挥发油中共同主要成分有草蒿脑,甜橙挥发油中柠檬烯的相对百分含量高达41.77%。芳樟醇和草蒿脑均已被证明具有抗抑郁活性,柠檬烯也具有一定的神经生物活性,因此罗勒挥发油、甜橙挥发油和薰衣草挥发油可能均具有一定的抗抑郁活性。3.利用动物行为学实验对罗勒挥发油、甜橙挥发油及薰衣草挥发油的抗抑郁活性进行初步探讨。利用开场实验(Open Field Test,OFT)探究实验动物的跨格次数和站立次数等自主活动的变化,再通过悬尾实验(Tail Suspension Test,TST)以及强迫游泳实验(Forced Swimming Test,FST)探究实验动物的不动时间变化。结果表明,罗勒挥发油、甜橙挥发油以及薰衣草挥发油均不改变动物在OFT中的跨格次数和站立次数,从而排除了由于动物的自主活动增加而造成的假阳性结果。罗勒挥发油、甜橙挥发油及薰衣草挥发油均能减少动物在TST和FST中的不动时间,说明罗勒挥发油、甜橙挥发油及薰衣草挥发油具有抗抑郁活性。且罗勒挥发油的抗抑郁效果最好,甜橙挥发油次之,最后是薰衣草挥发油。因此,罗勒挥发油、甜橙挥发油和薰衣草挥发油均有望开发成预防或治疗抑郁的保健品或药品。4、通过志愿者实验对罗勒挥发油在人体身上的抗抑郁作用进行初步探讨。通过比较志愿者香薰罗勒挥发油和超纯水前后的症状自评量表SCL90(Self-Reporting Inventory,SCL90)抑郁均分的差异和两组志愿者香薰前后抑郁均分差值的差异来初步探讨罗勒挥发油的抗抑郁活性。结果表明,香薰罗勒挥发油的志愿者香薰后的抑郁均分下降,香薰前后的抑郁均分的差异具有统计学意义,而香薰超纯水的志愿者香薰后的抑郁均分下降不明显,香薰前后抑郁均分的差异不具有统计学意义。而且罗勒挥发油组志愿者抑郁均分差值与超纯水组志愿者抑郁均分差值具有显著性差异,罗勒挥发油组志愿者抑郁均分下降更为明显。结果说明罗勒挥发油能降低志愿者的抑郁程度,改善志愿者的抑郁情绪。
【学位授予单位】：广东药科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5;R284
【图文】：

装置图,索氏提取法,装置图,冷凝管

图 2-1 水蒸气蒸馏法与索氏提取法装置图蒸馏法：1、球形冷凝管 2、挥发油测定器 3、：1、球形冷凝管 2、提取管 3、连接管 4、虹底烧瓶化碳萃取法 10.00 g 置于超临界萃取器中，设定萃取温度为 4度为 25℃，解析压力为 8 MPa，CO2流量为 3 L/h，从解析釜中收集挥发油并称重（d），计算得。挥发油严格密封、避光、隔绝氧气、低温保存。取法比进行投料。称取罗勒粗粉 50.00 g 置于圆底烧瓶中2

罗勒,四种方法,总离子流,挥发油

四种方法提取罗勒挥发油GC-MS总离子流图

【参考文献】