橄榄苦苷抗卵巢癌作用的体内外实验研究

发布时间：2020-08-22 20:45

【摘要】：目的:观察不同浓度橄榄苦苷及不同作用时间对体外卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响,以及橄榄苦苷对裸鼠皮下卵巢癌SKOV3细胞移植瘤生长的影响,探讨橄榄苦苷抗卵巢癌的可能作用机制。方法:将卵巢癌SKOV3细胞培养后分别接种在5个96孔板上,4个实验组各自加入药物浓度为100、200、400、800ug/ml的橄榄苦苷刺激,另设1个对照组(未加药干预)。采用CCK-8检测法分别测定24H、48H、72H三个时间点不同药物浓度的SKOV3细胞增殖抑制情况。建立卵巢癌SKOV3细胞裸鼠背部皮下荷瘤的模型,将20只荷瘤成功的裸鼠随机分成2组,橄榄苦苷组:50mg·10ml·kg-1腹腔内注射,生理盐水组:按0.9%氯化钠注射液10ml·kg-1腹腔内注射。两组均隔天给药1次,连续给药8周,自由摄水和进食,标准SPF饲料。每周测量并记录裸鼠的肿瘤体积及体重各1次。处死裸鼠后,完整分离出肿瘤组织,计算肿瘤的相对增殖率,采用Western blot法分别检测两组肿瘤组织促凋亡因子Bax、抗凋亡因子Bcl-2的表达水平。结果:体外实验中,同对照组相比,100、200、400、800ug/ml的橄榄苦苷浓度对SKOV3细胞的增殖均有抑制作用,差异有统计学意义(P0.05);不同时间点中,800ug/ml的橄榄苦苷对细胞的抑制作用最强(P0.05);在800ug/ml的药物浓度下,细胞生长缓慢,在24h、48h两个时间点比较,细胞增殖差异无统计学意义(p0.05),而24h和72h两个时间点比较,细胞增殖有统计学意义(p0.05);同一浓度下,随着药物作用时间的延长,抑制率变化无明显差异(P0.05)。体内实验中,橄榄苦苷组裸鼠移植瘤体积明显小于生理盐水组(P0.05);橄榄苦苷组的相对肿瘤增殖率为70.3%;与生理盐水组相比,橄榄苦苷组Bax蛋白表达上调,而Bcl-2蛋白表达下调。结论:橄榄苦苷能抑制体外卵巢癌SKOV3细胞的增殖,对体内卵巢癌SKOV3细胞裸鼠皮下移植瘤的生长有抑制作用,可通过诱导细胞凋亡和抑制细胞增殖,发挥抗卵巢癌的作用,其机制可能与增强凋亡促进因子Bax的表达、抑制抗凋亡因子Bcl-2的表达有关,也可能与调控癌细胞的原癌基因或抑癌基因有关,具体机制有待进一步研究,橄榄苦苷可能成为具有潜在应用前景的辅助抗卵巢癌新药。
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5
【图文】：

细胞生长曲线,统计学意义,时间点,浓度

橄榄苦苷浓度分别为 100、200、400、800ug/mL 时中，对 SKOV3 细胞增殖均具有抑制作用，差异有统计学意义(P＜度随浓度的增大而增强，其中 800ug/ml 浓度的橄榄苦苷对细胞强；在同一浓度中，100、200、400ug/ml 的浓度下，SKOV3 细胞时间延长，细胞数量 OD 值变化有统计学意义（P＜0.05）。在 80浓度下，细胞生长缓慢，在 24h、48h 两个时间点比较，细胞数差异无统计学差异（p＞0.05），在 24h、72h 两个时间点比较，细 OD 值有统计学意义（p＜0.05）,在 48h、72h 两个时间点比较， OD 值差异无统计学差异（p＞0.05）。同一浓度下，随着药物作用变化无明显差异（P＞0.05）。细胞生长曲线与抑制率见图 1 和细胞OD

生长曲线,裸鼠移植瘤,生长曲线

2组裸鼠移植瘤体积的生长曲线

切面图,切面,裸鼠移植瘤,生长曲线

裸鼠皮下移植瘤体切面

【参考文献】