【摘要】：目的:探讨定喘汤对中性粒细胞哮喘小鼠的疗效及作用机制。方法:将42只雌性C57BL/6小鼠随机分为对照组(C组)、中性粒细胞哮喘模型组(NA组)、定喘汤低剂量(DCD-L)、中剂量(DCD-M)、高剂量(DCD-H)治疗组及地塞米松治疗组(DEX组),每组7只。模型组及各治疗组小鼠于第1天头皮下注射0.1ml由鸡卵清白蛋白(Ovalbumin,OVA)和弗氏完全佐剂(Complete Freund,s adjuvant,CFA)及磷酸盐缓冲液(Phosphate buffer saline,PBS)组成的混悬液致敏,在第22、23天,将小鼠暴露在0.1%的OVA+PBS气溶胶中激发至出现类似哮喘症状,对照组小鼠用PBS致敏及激发。各组小鼠均在激发前3小时干预,正常组和模型组均以等体积的生理盐水/PBS灌胃,定喘汤低、中、高剂量治疗组分别以定喘汤生药浓度为16.5g/kg、33g/kg、66g/kg灌胃治疗,地塞米松组以地塞米松0.001 g/kg腹腔注射。所有小鼠完成模造24小时后全部处理取样分析。观察比较各组小鼠激发时的症状变化及HE染色观察肺组织病理学改变,比较各组小鼠气道阻力及外周血及支气管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中白细胞总数和分类计数;分离血中中性粒细胞,流式细胞术检测中性粒细胞凋亡情况;transwell小室检测中性粒细胞迁移率变化;ELISA检测小鼠支气管肺泡灌洗液上清中IL-17的浓度。结果:(1)小鼠激发过程中的症状变化:除C组小鼠外,其他各组小鼠在激发期间均出现不同程度的哮喘症状。定喘汤各治疗组小鼠症状较NA组程度减轻,其中DCD-M组小鼠程度最轻。DEX组与NA组比较无差别。(2)肺组织的病理学结果:C组小鼠肺组织病理学显示支气管、肺泡及肺组织结构完整,周围炎性细胞浸润少;NA组显示支气管管腔变狭窄,管腔内黏膜皱褶增生、上皮细胞脱落、肿胀及可见粘液栓,肺泡及肺组织结构破坏,支气管及血管周围大量炎性细胞浸润等典型病理学改变,其中以中性粒细胞及淋巴细胞浸润最明显;定喘汤各治疗组肺组织结构破坏、支气管黏膜水肿及炎性细胞浸润较NA组均明显改善,其中DCD-M组气道炎症细胞浸润最少;DEX组与NA组无明显差别。(3)各组小鼠气道阻力比较:NA组小鼠对乙酰甲胆碱的气道反应性随着吸入浓度的升高而增加,各浓度水平的气道阻力与A组相比均显著增高(P0.01);定喘汤各治疗组较NA组下降(P0.01);DCD-M组、DCD-H组气道阻力低于DCD-L组(P0.05);DCD-M组、DCD-H组之间,差异无统计学意义(P0.05);DEX组与NA组比较,差异无统计学意义(P0.05)。(4)各组小鼠BALF中细胞总数及细胞分类计数比较:NA组小鼠BALF中白细胞总数及NEU%较C组明显增加(P0.01);定喘汤各治疗组较NA组下降(P0.01);DCD-M组、DCD-H组低于DCD-L组(p0.01);DCD-M组、DCD-H组之间比较,差异无统计学意义(P0.05);DEX组与NA组比较,差异无统计学意义(P0.05)。(5)各组小鼠血中细胞分类计数比较:NA组小鼠外周血NEU%较C组上升(P0.01);定喘汤各治疗组较NA组下降(P0.01);DCD-M组、DCD-H组低于DCD-L组(P0.01);DCD-M组、DCD-H组之间比较,差异无统计学意义(P0.05);DEX组与NA组比较,差异无统计学意义(P0.05)。(6)各组小鼠血中中性粒细胞凋亡率比较:NA组较C组下降(P0.01);定喘汤各治疗组较NA组增加(P0.01);DCD-M组、DCD-H组较DCD-L组增加(P0.01);DCD-M组、DCD-H组之间无统计学差异(P0.05);DEX组与NA组比较,差异无统计学意义(P0.05)。(7)各组小鼠血中中性粒细胞迁移率比较:NA组较C组增加(P0.01);定喘汤各治疗组较NA组下降(P0.01);DCD-M组、DCD-H组较DCD-L组下降(P0.01);DCD-M组、DCD-H组之间,差异无统计学意义(P0.05);DEX组与NA组比较,差异无统计学意义(P0.05)。(8)各组小鼠BALF上清中IL-17的表达比较:NA组较C组增加(P0.01),定喘汤各治疗组较NA组下降(P0.01),DCD-M组、DCD-H组较DCD-L组下降(P0.01),DCD-M组、DCD-H组之间,差异无统计学意义(P0.05),DEX组与NA组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:定喘汤可能通过诱导中性粒细胞凋亡、抑制中性粒细胞迁移、下调IL-17的表达,从而达到治疗中性粒细胞性哮喘小鼠的目的。
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5
【图文】：
图 3.1 各组小鼠肺组织病理学改变比较（HEX200）C：对照组；NA：中性粒细胞哮喘组；DCD-L：定喘汤低剂量组；DCD-M：定喘汤中组、DCD-H：定喘汤高剂量组，DEX：地塞米松组。
图 3.2 各组小鼠吸入不同浓度的乙酰甲胆碱后气道阻力的变化： 与 C 组相比 P<0.01， 与 NA 组相比 P<0.05， 与 NA 组相比 P<0.01， 与 DCD-L 组相 P<0.05， 与 DCD-L 组相比 P<0.01；C：对照组；NA：中性粒细胞哮喘组；DCD-L：定汤低剂量组；DCD-M：定喘汤中剂量组、DCD-H：定喘汤高剂量组，DEX：地塞米松组。
图 3.3 各组小鼠 BALF 中白细胞总数比较： 与 C 组相比 P<0.01， 与 NA 组相比 P<0.01， 与 DCD-L 组相比 P<0.01；C：组；NA：中性粒细胞哮喘组；DCD-L：定喘汤低剂量组；DCD-M：定喘汤中剂量CD-H：定喘汤高剂量组；DEX：地塞米松组。
【参考文献】
相关期刊论文 前10条
1 赵四林;;加减定喘汤治疗支气管哮喘急性发作热哮证40例临床观察[J];中医药导报;2013年06期
2 刘晓微;蒋敏;农光民;刘宏涌;彭方;刘静;;中性粒细胞性支气管哮喘小鼠模型的建立及其气道高反应规律的研究[J];中华哮喘杂志(电子版);2013年03期
3 赵燕;冉雪梅;黄毅;程晓明;王长征;王导新;;构建以Th17应答为主致气道中性粒细胞增高的小鼠哮喘模型[J];第三军医大学学报;2013年13期
4 李海银;朱黎明;戴爱国;黄进;曾丹;;豚鼠中性粒细胞性哮喘模型的建立[J];中华哮喘杂志(电子版);2012年04期
5 敖小冬;农光民;刘静;蒋敏;;中性粒细胞性支气管哮喘小鼠模型建立的探索[J];中华哮喘杂志(电子版);2012年02期
6 苏成程;章匀;唐艳芬;黄海凤;;哮喘病各证型发病特点与微观指标分析[J];山西中医;2012年03期
7 田金娜;李建保;刘小凡;;丹龙定喘汤对哮喘小鼠气道重塑及MMP-9,TIMP-1的影响[J];中国实验方剂学杂志;2012年05期
8 许卫华;张永涛;王微;符思;;296例哮喘患者中医证型与实验室指标的相关性[J];北京中医药;2010年04期
9 陈清华;;白化豚鼠与花色豚鼠在免疫学方面的比较研究[J];畜牧兽医科技信息;2009年01期
10 彭清臻;钟敏华;余小明;谢志斌;厉银平;黄文军;童良娥;罗惠玲;;加味定喘汤对支气管哮喘患者气道高反应及免疫功能的影响[J];中国实用内科杂志;2008年S1期
相关硕士学位论文 前3条
1 李玉竹;KLF2与S1PR1对哮喘患者外周血中性粒细胞迁移的影响[D];南华大学;2016年
2 刘巧维;HIF-1α与Th17/Treg失衡对烟雾暴露哮喘大鼠气道炎症的影响及西罗莫司治疗作用的研究[D];中国人民解放军医学院;2013年
3 李海银;KLF2/RelA比例失衡对中性粒细胞性哮喘豚鼠中性粒细胞凋亡的影响[D];南华大学;2013年
本文编号：
2801650
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zhongyaolw/2801650.html
