红花水煎液对硬皮病小鼠皮肤和肺组织纤维化及TGF-β1、IL-10表达的影响

发布时间：2020-08-25 04:55

【摘要】：目的通过建立硬皮病小鼠模型,观察红花水煎液干预对硬皮病小鼠皮肤和肺组织纤维化及TGF-β1、IL-10表达的影响,进一步探讨红花抗SSc组织纤维化的作用机制。方法将128只BALB/C小鼠随机分为4组:空白对照组、模型对照组、醋酸泼尼松组、红花水煎液组,每组32只;建立硬皮病小鼠模型,造模的同时,空白对照组和模型对照组给予生理盐水灌胃,醋酸泼尼松组和红花水煎液组分别给予醋酸泼尼松混悬液和红花水煎液灌胃进行药物干预,在第1周、第2周、第3周、第4周分批处死各组8只小鼠。取肺组织及皮肤制成石蜡切片,进行HE染色观察小鼠皮肤和肺组织病理改变;进行Masson染色、Sirius Red染色、Van Gieson染色观察胶原纤维的分布,测定皮肤和肺组织胶原纤维含量变化;IHC检测皮肤和肺组织TGF-β1、IL-10的定位及表达。取眼球血提取血清ELISA法检测TGF-β1、IL-10的表达水平。结果1、皮肤和肺组织HE染色空白对照组皮肤和肺组织在各个观察时间点无明显变化,皮肤和肺组织结构清晰完整,无或极少炎症细胞浸润。模型对照组第1周皮肤和肺组织有少量的炎症性细胞浸润,真皮增厚不明显;第2周出现真皮增厚,大量炎症细胞浸润;第3周真皮增厚进一步,炎症细胞减少,出现胶原纤维增生,成纤维细胞增多;第4周真皮进一步增厚,炎症细胞浸润减少,胶原纤维、成纤维细胞数量进一步增多。醋酸泼尼松组和红花水煎液组在各个时间点的炎症细胞和胶原纤维较模型对照组少。2、皮肤和肺组织Masson染色、Sirius Red染色、Van Gieson染色空白对照组皮肤和肺组织在各个观察时间点未见明显改变,无或极少胶原纤维增生。第1周模型对照组皮肤和肺组织出现胶原纤维紊乱,有较少胶原增生;第2、3、4周成纤维细胞数量逐渐增多、胶原纤维增生。与模型对照组比较,酸泼尼松组和红花水煎液组皮肤和肺组织胶原纤维及成纤维细胞减少。3、皮肤和肺组织炎症评分空白对照组组织炎症评分在各个时间点无明显变化(P0.05)。各建模组炎症在第1、2周逐渐升高,在第2周达到高峰;第3、4周炎症逐渐减少,但仍高于空白对照组小鼠。经醋酸泼尼松和红花干预后药物干预组炎症较模型对照组减轻(P0.05)。4、皮肤和肺组织胶原纤维含量变化空白对照组在各个时间点胶原纤维无明显改变(P0.05)。与空白对照组比较,模型对照组各个观察点小鼠胶原纤维均增多(P0.05),且随着建模时间延长而逐渐增加。经药物干预后,醋酸泼尼松组和红花水煎液组胶原纤维含量较模型对照组下降(P0.05)。5、皮肤和肺组织TGF-β1、IL-10 IHC检测空白对照组皮肤和肺组织TGF-β1和IL-10蛋白表达量无明显改变(P0.05)。与空白对照组比较,建模各组小鼠皮肤和肺组织中TGF-β1、IL-10的表达在各个时间点升高(P0.05)。与模型对照组比较,醋酸泼尼松组和红花水煎液组TGF-β1、IL-10表达量在各个时间点均出现下降,差异有统计学意义(P0.05)。6、血清中TGF-β1、IL-10 ELISA检测空白对照组血清中TGF-β1和IL-10较低,各个时间点变化不明显(P0.05)。与空白对照组比较,建模各组小鼠组织中TGF-β1、IL-10水平在各个时间点升高(P0.05)。与模型对照组比较,醋酸泼尼松组和红花水煎液组TGF-β1、IL-10表达在各个时间点均出现下降,差异有统计学意义(P0.05)。结论1、在博来霉素诱导的硬皮病小鼠皮肤和肺组织中存在TGF-β1、IL-10表达升高。2、红花水煎液可能通过降低TGF-β1、IL-10的表达水平,减轻免疫炎症,缓解硬皮病组织纤维化的进程。
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5
【图文】：

狁?TGF-β1、IL-10 表达的影响 2017 届硕士学位论文66图2-1 肺组织HE 染色（×200）Fig.2-1 MouselungHEstaining附 图

狁?TGF-β1、IL-10 表达的影响 2017 届硕士学位论文67图2-2 皮肤 HE 染色（×200）Fig.2-2 MouseskinHE staining

狁?TGF-β1、IL-10 表达的影响 2017 届硕士学位论文68图3-1 肺组织Masson 染色（×200）Fig.3-1MouselungMassonstaining

【参考文献】

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本文编号：2803292