水芫花多糖和黄酮的提取工艺及活性研究

发布时间：2020-08-27 08:06

【摘要】：目的对水芫花中的多糖及黄酮成分提取进行工艺优化,并对其抗炎和体外抗氧化活性做了研究。方法(1)水芫花多糖采用热水煎煮法进行提取,乙醇沉淀法得到水芫花粗多糖,三氯乙酸法脱蛋白,分离纯化得水芫花多糖;通过维生素C作阳性对照,测定其对DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基的清除率及还原能力,评价其抗氧化活性。(2)采用超声波辅助80%乙醇溶液对水芫花总黄酮进行提取分离,按上述方法评价其抗氧化活性。(3)选用水、95%乙醇、丙酮和乙酸乙酯作为溶剂,分别对水芫花进行超声辅助提取。按上述方法,分别对其抗氧化活性进行研究。(4)通过建立小鼠的肠炎模型,在对其给药后,测定小鼠血液以及结肠中的功能指标,研究水芫花水提取物和水芫花乙醇提取物的体内抗炎作用。结果(1)水芫花通过热水煎煮法和乙醇沉淀法得到水芫花粗多糖,水芫花粗多糖通过三氯乙酸法除蛋白得水芫花多糖,提取率为2.31%。蛋白脱除率为79.3%。对水芫花多糖提取率影响因素的大小依次是提取时间超声功率料液比提取温度。水芫花多糖最佳提取工艺为提取时间120 min,料液比为1∶25,超声功率为150 W,提取温度为80℃。(2)采用超声波辅助80%乙醇溶液对水芫花总黄酮进行提取,得到对其提取率影响因素的大小依次是乙醇浓度提取温度料液比提取时间。水芫花总黄酮的最佳提取工艺为乙醇浓度为80%,提取温度为40℃,提取时间为90 min,料液比为1∶20。(3)水芫花不同溶剂的提取物的抗氧化活性顺序为乙醇提取物乙酸乙酯提取物水提取物丙酮提取物。(4)水芫花水提取物和水芫花乙醇提取物具有一定的体内抗炎活性,水芫花乙醇提取物的抗炎活性比水芫花水提取物的活性好,高剂量的水芫花乙醇提取物具有一定的毒副作用。结论分别通过热水煎煮法和超声波辅助法,得到水芫花多糖和总黄酮,并对其提取工艺进行优化。水芫花多糖及总黄酮具有较好的体外抗氧化活性,水芫花水提取物和水芫花乙醇提取物具有一定的体内抗炎活性,对水芫花的新药研发和功能产品的开发具有一定的参考价值。
【学位授予单位】：佳木斯大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R284
【图文】：

标准曲线,标准曲线,葡萄糖,清除率

0.078 mol·L-1硝基四氮唑蓝（Nitrotetrazolium Blue chloridol·L-1NaOH，最后加入 0.4 mL 0.06 mol·L-1磷酸盐缓冲溶静置 5 min，于 560 nm 波长处测定吸光度（Ai），用不同、0.4 mL 蒸馏水代替 PBS 溶液调零，用蒸馏水作阴性对化羟基甲苯（Dibutyl Hydroxy Toluene，BHT）作阳性对离子清除率计算公式：清除率 X（%）＝（1－Ai/Aj）×100%讨论多糖提取工艺优化试验结果准曲线知，线性回归方程 y=7.1x+0.1058，R2=0.9939，其线性有～0.1 mg·mL-1。

提取率,提取时间,芫花,二次蒸馏

图 2-2 提取时间对 PAP 提取率的影响igure 2-2 Effect of extraction time on the extraction rate of P比对水芫花多糖提取率的影响可知，当二次蒸馏水与 PAP 的比例逐渐增大时，PAP者的料液比为 1∶20 时，PAP 提取率达到峰值；当料率反而下降。可能是，在操作过程中有部分耗损，导选定料液比的最佳条件 1∶20。

提取率,芫花,二次蒸馏,液比

图 2-2 提取时间对 PAP 提取率的影响Figure 2-2 Effect of extraction time on the extraction rate of PAP液比对水芫花多糖提取率的影响3 可知，当二次蒸馏水与 PAP 的比例逐渐增大时，PAP 提取二者的料液比为 1∶20 时，PAP 提取率达到峰值；当料液比取率反而下降。可能是，在操作过程中有部分耗损，导致故选定料液比的最佳条件 1∶20。

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