六味地黄丸干预16月龄自然生长小鼠的代谢组学研究

发布时间：2020-08-28 08:09

　　目的:本实验基于LC-MS代谢组学技术,分析16月龄自然增长小鼠脾组织、肾组织以及血浆样本的内源性代谢差异物变化及六味地黄丸对小鼠体内这些代谢标志物的调节作用,为六味地黄丸干预小鼠增龄相关证候的生物学基础提供科学依据。方法:本实验选取SPF清洁级ICR小鼠共60只为实验对象;其中雌、雄小鼠各20只,从3月龄正常单笼饲养到16月龄,随机分为模型组和六味地黄丸给药组,每组雌、雄小鼠各10只;另选取3月龄雌、雄小鼠各10只为青年对照组,青年对照组与模型组采用同体积比的生理盐水灌胃,六味地黄丸组采用灌胃给药。给药第31天小鼠眶静脉取血以制取血浆,之后断颈处死,取其脾、肾组织,将样品置于-80℃冰箱冻存。实验前将样本预处理,进行代谢组学技术检测得出数据,进行多元统计分析和筛选出标志性差异物。结果:1.16月龄模型组雌雄小鼠的脾组织、肾组织及血浆样品中代谢物标志物与3月龄青年对照组相比,出现不同程度的变化。在脾组织样品分析中,雄鼠鉴定出28个增龄相关代谢标志物,主要参与了14条代谢通路,氨基酸、脂类、糖代谢等代谢通路在雄鼠脾组织中有着不同程度的改变;雌鼠脾组织鉴定出27个增龄相关代谢标志物,主要参与了11条代谢途径,其中影响氨基酸代谢的生物标志物数量最多。在肾组织样品分析中,雄鼠鉴定出25个增龄相关代谢标志物,参与了13条代谢通路,主要集中在氨基酸与脂类代谢上;雌鼠鉴定出25个增龄相关代谢标志物,主要参与了12条代谢途径,主要为氨基酸与糖代谢。在血浆样本分析中,雄鼠鉴定出12个增龄相关代谢标志物,参与了2条代谢通路,均为糖代谢途径;雌鼠血浆样本鉴定出16个增龄相关代谢标志物,主要参与了5条代谢途径,主要表现为氨基酸代谢通路发生变化。2.结合3月龄青年对照组、16月龄模型组以及六味地黄丸给药组三组小鼠增龄相关代谢标志物数据分析,六味地黄丸对这些标志性代谢差异物具有回调作用。在雄鼠脾组织样品分析中,六味地黄丸对13个代谢标志物有调节作用,调节的主要通路有11条,主要集中在氨基酸代谢与糖类代谢上;在雌鼠脾组织样品分析中,六味地黄丸对8个代谢标志物有调节作用,调节的主要通路有5条,主要为氨基酸代谢、柠檬酸循环。在雄鼠肾组织样品分析中,六味地黄丸对10个代谢标志物有调节作用,调节的主要通路有7条,主要影响氨基酸代谢与糖代谢;雌鼠肾组织样品分析中,六味地黄丸对10个代谢标志物有调节作用,调节的主要通路有5条,以核黄素代谢、糖类代谢为主。在雌雄小鼠血浆样品分析中,六味地黄丸对11个代谢标志物有调节作用,调节的主要通路有2条和4条,六味地黄丸对雄鼠影响的代谢通路为糖代谢,对雌鼠影响的代谢通路集中在氨基酸代谢。结论:1.16月龄小鼠相比于3月龄小鼠,其脾组织、肾组织、血浆中内源性代谢差异物发生改变,表明自然增龄将导致小鼠代谢状态发生变化。2.六味地黄丸对16月龄雌、雄小鼠脾组织、肾组织、血浆样本中增龄相关代谢差异物均有不同程度的回调作用,证明六味地黄丸能调节增龄引起的各组织整体代谢的改变。六味地黄丸对雄鼠脾组织、肾组织的干预均集中在氨基酸、糖代谢,在血浆样本中主要为糖代谢。六味地黄丸对雌鼠脾组织的干预集中在氨基酸代谢,在肾组织中主要为糖代谢,在血浆样本中为氨基酸代谢。
【学位授予单位】：黑龙江中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5
【图文】：

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黑龙江中医药大学硕士学位论文部分分析增龄过程中代谢标志物的变化及六味丸的调节作用分析 16 月龄小鼠脾组织代谢标志物变化稳定性检验每隔 10 个待测样品进组 QC，检验仪器稳定性。如图示（雄鼠正 / 负离子模式），图 1 - 3 、 1 - 4 所示（雌鼠正 / 负），小鼠脾组织样本各待测样品（ Other）分布较离散，说个体差异，QC 分布较集中，说明仪器稳定性良好，数据可

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每隔 10 个待测样品进组 QC，检验仪器稳定性。如图示（雄鼠正 / 负离子模式），图 1 - 3 、 1 - 4 所示（雌鼠正 / 负），小鼠脾组织样本各待测样品（ Other）分布较离散，说个体差异，QC 分布较集中，说明仪器稳定性良好，数据可1 雄鼠脾组织样本（ QC） PCA 主成分分析后 Scores 图：正离子

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3 雌鼠脾组织样本（ QC） PCA 主成分分析后 Scores 图：正离子4 雌鼠脾组织样本（ QC） PCA 主成分分析后 Scores 图：负离子织代谢轮廓表征分析取青年对照组（ 3M）和模型组（ 16M）小鼠脾组织，通过方法处理，进行正负离子模式扫描，得到 16 月龄小鼠脾

【参考文献】