人参皂甙对ARF大鼠肾保护作用与下丘脑和肾HIF-1α表达的变化

发布时间：2020-08-28 12:28

　　目的:探讨口服人参皂甙(ginsenoside,GS)对急性肾衰(acute renal failure,ARF)大鼠的肾保护作用过程中肾和下丘脑缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)表达变化的影响,同时还检测HIF-1α的靶基因血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor A,VEGF-A)在肾和下丘脑表达的变化,探讨HIF-1α的表达与人参皂甙对ARF大鼠肾保护作用的相关性。方法:本工作选用健康、雄性、SD大鼠,随机分为4组,即ARF+physiological saline(NS)(0 h、6 h、12 h、24 h和48 h)组、ARF+GS(0 h、6 h、12 h、24 h和48 h)组、NS+NS(0 h、6 h、12 h、24 h和48 h)组和NS+GS(48 h)组。选用甘油致急性肾衰动物模型,运用整体实验检测口服人参皂甙(12.5 mg/ml)48 h后急性肾衰大鼠血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和肌酐(creatinine,Cre),肾皮质匀浆和下丘脑匀浆丙二醛(malondialdehyde,MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的变化及肾组织病理学的改变;同时用Western Blot的方法观察肾和下丘脑HIF-1α和VEGF-A免疫反应活性的变化,用免疫组化的方法观察肾近曲小管(proximal convoluted tubule,PCT)HIF-1α免疫反应活性的变化。结果:1.急性肾衰大鼠口服生理盐水48 h后,血清BUN和Cre水平明显升高(P㩳0.05)。急性肾衰大鼠口服人参皂甙处置相同时间后,血清BUN和Cre水平明显降低(P㩳0.05)。2.急性肾衰大鼠口服生理盐水48h后,肾小管坏死程度严重;急性肾衰大鼠口服人参皂甙处置48h后,肾小管坏死程度明显减轻。3.arf+ns组肾皮质匀浆和下丘脑匀浆的mda升高、sod下降(p㩳0.05);arf+gs组肾皮质匀浆和下丘脑匀浆mda降低、sod升高,具有显著性差异(p㩳0.05)。4.肾hif-1α的westernblot的实验显示,急性肾衰大鼠口服生理盐水(arf+ns组)后不同时间肾hif-1α的表达增加(p0.05);arf大鼠口服gs(arf+gs组),在观察的48h内6h、12h、24h、48h组肾hif-1α的表达进一步增强,明显高于arf+ns组相对应的各时间点(p0.05),也高于ns+ns组相对应的各时间点(p0.05)。5.下丘脑hif-1α的westernblot的实验显示,arf+ns组下丘脑hif-1α的表达先增加,然后呈下降趋势;arf大鼠口服gs处置(arf+gs组)在观察的48h内6h,12h,48h组下丘脑hif-1α的表达持续增加,arf+gs24h组和48h组的hif-1α表达明显高于相对应的arf+ns组(p0.05)。6.肾vegf-a的westernblot的实验显示,arf+ns组肾vegf-a的表达增加(p0.05);arf+gs组在观察的48h内6h、12h、48h组肾vegf-a的表达进一步增强,明显高于相对应时间点的arf+ns组(p0.05),也高于ns+ns组相对应的各时间点(p0.05)。7.下丘脑vegf-a的westernblot的实验显示,arf+ns组各时间点下丘脑vegf-a表达均增加(p0.05);arf+gs组在观察的48h内6h、12h、24h、48h组下丘脑vegf-a表达进一步增强,明显高于相对应各时间点的arf+ns组(p0.05),也高于ns+ns组相对应的各时间点(p0.05)。8.肾免疫组化实验显示arf+ns6h组和48h组肾近曲小管(pct)上皮细胞内hif-1α免疫反应活性增强;arf+gs6h组pct上皮细胞内hif-1α免疫染色强度明显高于arf+ns6h组(p0.05),arf+gs48h组在6h组的基础上pct内hif-1α免疫反应活性进一步增加,明显高于arf+ns48h组(p0.05)。结论:口服人参皂甙可明显改善甘油致肾衰大鼠的肾功能;减轻肾和下丘脑的氧化损伤,增强抗氧化损伤能力,具有显著的肾保护的作用。急性肾衰大鼠6h、12 h、24 h和48 h肾脏HIF-1α和VEGF-A的表达上调;急性肾衰大鼠口服人参皂甙后不同时间肾脏HIF-1α和VEGF-A的表达进一步上调,肾HIF-1α表达上调的变化在近曲小管最为显著。同时急性肾衰大鼠经人参皂甙处置后下丘脑HIF-1α和VEGF-A的表达上调变化的规律与肾脏的相似。据此,我们推测肾和下丘脑HIF-1α表达的上调可能参与人参皂甙对急性肾衰大鼠的肾保护作用,同时通过调控其下游的靶基因VEGF-A发挥作用。
【学位单位】：大连医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2017
【中图分类】：R285.5

【参考文献】