桑黄的化学成分及其抗炎活性研究

发布时间：2020-09-05 07:17

　　 目的:研究桑黄的化学成分,并考察其体外抗炎活性。方法:取干燥的桑黄子实体5.0公斤,用70%的乙醇浸泡,提取,所得乙醇浸膏分别用二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇依极性由小到大顺次萃取。利用正反相硅胶色谱、葡聚糖凝胶色谱和高效液相色谱等柱色谱分离技术分别对桑黄的乙酸乙酯层和正丁醇层萃取物进行分离和纯化。并运用旋光仪、核磁共振波谱等波谱学方法对得到的单体化合物进行结构的鉴定。进而利用Griess法、ELISA法,测定并分析化合物对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠巨噬细胞(RAW264.7)中一氧化氮(nitric oxide,NO)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子(tumournecrosis factor-α,TNF-α)表达的抑制作用,进行化合物的抗炎活性研究。结果:从桑黄的乙酸乙酯层和正丁醇层中共分离得到20个化合物,通过波谱学解析,结构鉴定为啤酒甾醇(1)、-谷甾醇(2)、白桦脂酸(3)、3β,6β,16β-三羟基-羽扇豆烷(4)、3β,20-二羟基-羽扇豆烷(5)、3-乙酰熊果酸(6)、齿孔醇(7)、乙基-β-D-吡喃葡萄苷(8)、乙基-α-D-半乳糖苷(9)、果糖(10)、α-黑曲霉糖(11)、海藻糖(12)、2-脱氧-D-核苷酸-1,4-内酯(13)、二氢槲皮素(14)、cedrusin(15)、女贞甙(16)、橄榄苦苷(17)、邻苯二甲酸二戊酯(18)、6,6'-二乙基邻苯二甲酸二己酯(19)、1--O-(β-D-glucopyranosyl)-(2S,3R,4E,8E)-2-[(2 R)-2-hydroxynonadecanoy-lamino]-9-methyl-4,8-octadecadiene-1,3-diol(20)。其中,化合物4、9、16和17是首次从桑黄中分离得到。抗炎活性实验结果表明,化合物1、4、9-12、16、17、19和20在浓度为3μM、10μM和30 μM时可显著抑制LPS诱导的RAW264.7产生NO、IL-6和TNF-α的含量,减少炎症反应。
【学位单位】：延边大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R284;R285
【部分图文】：

图２桑黄乙酸乙酯层萃取物的分离流程图逡逑桑黄正丁醇层萃取物（１５７．０邋ｇ邋）逡逑ＣＨＸ＾－ＣＨｐＨｔｒｍｌＯ：！邋（0２Ｊ邋！）逡逑Ｆｒ．Ｄ－２邋（ｌＵｊ）逦Ｆｒ．邋１Ｘ３（１５．１６）逦Ｆｒ．Ｄ－４（ｌ？＾５）逡逑ＣＨｔＯＨ－ＡｃｆｌＭ＾＾Ｏ逦ＣＨ＾Ｈ－Ｉ＾Ｏ逦ＣＨ，Ｃ；－ＣＨ＾＞Ｈ逡逑０：３：４ｉｏ邋１０仍逦（ＩＳｔｏｌＯ）逦00．｝邋Ｍ＞５：１）逡逑Ｃｏｍｐ．邋１１逦Ｄ－２－２逦Ｄ－３－４逦Ｄ－３－Ｓ逦Ｄ＾－８逦Ｄ－４－２逦Ｄ－４Ｊ逦ＩＭ－５逡逑（５＾邋ｍｓ）逡逑ＰＥ－ＥＯＡｃ－逡逑ＣＨ＾Ｌ．－ＣＨｊａＨ逦ＰＥ－ＥｘＯＡｃ－ＣＨ，ＯＨ逦ＰＥ－ＥｉＯＡｃ－ＣＨ，ＯＨ逦ＣＨ－．ＯＨ逦ＣＨ．０Ｈ４１Ｐ逦ＣＨ．ＯＨ－Ｈ；？逦ＣＨ．ＯＨ（２Ｓ：ｌ）逦｛２５．１：０．４）逦（２１０－３Ｓ）逦（ｌ＾．ｌ．＆４ｔｏ逦０逦｛１？Ｊ邋ｔｏ邋１０）逦（３：１７邋ｔｏ１．２：１：０．＜）逡逑Ｄ－２－２－１逦Ｃｏｍｐ＊邋１６逦Ｃｏｍｐ．邋１４逦Ｃｏｍｐ．邋１０逡逑（２３２邋ｍｇ）逦（１４．４邋ｍｇ）逦Ｕ－Ａ－２－１逦（７．０邋ｍ＾）逡逑ＰＥ－ＥｉＱＡｃ－逡逑ＰＥ－Ｅｔ0Ａｃ－ＣＨ，ＣＷ逦ＣＨ－Ｏ－ＣＨｊＯＨ逦ＣＨｊＯＨ逡逑ａ：邋１：０．１）逦（１５１）逦（１：１Ａ１）邋Ｄ－ｌ－Ｊ－１逦Ｄ－４－３－２逦Ｄ－４－＾－３逡逑Ｃｏｍｐ．邋１２逡逑°ａ！ＯＨＨ0Ｈ逡逑

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Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ邋（３０邋＾ｉＭ）逡逑图４化合物１－２０对ＲＡＷ２６４．７细胞存活率的影响逡逑结果表明，化合物浓度在３０逦时，化合物１－２０的细胞存活率如图４所示，结逡逑果显示细胞存活率超过８０％的化合物包括１、２、４－６、８－１２、１４－２０，这些化合物在逡逑３０邋ｐＭ浓度时对ＲＡＷ２６４．７细胞均无毒性。逡逑４．２．２化合物抑制ＬＰＳ邋ｉ秀导ＲＡＷ２６４．７产生ＮＯ量的测定结果逡逑在后续实验中，只选取存活率超过８０％的化合物１、２、４－６、８－１２、１４－２０进行化逡逑合物抑制ＬＰＳ诱导ＲＡＷ２６４．７细胞产生ＮＯ含量的实验，见图５。逡逑５２逡逑

【参考文献】

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本文编号：2812723