~1壮通饮对冠心病心肌梗死大鼠相关炎症及神经体液因子影响的研究

发布时间：2020-09-14 17:11

　　 目的:通过观察壮通饮对冠心病心肌梗死大鼠TNF-α、IL-6、IL-10、NE、REN、AngⅡ、ALD、ET-1、TGF-β_1水平的影响,探讨该方对冠心病心肌梗死大鼠的干预机制及防治作用,为壮通饮治疗冠心病心肌梗死的临床应用提供理论依据。同时,为开发治疗冠心病心肌梗死的广西特色壮药提供研究思路或策略。方法:将SPF级SD大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、壮通饮(低、中、高)剂量组和阳性药物对照组,共7个组,其中模型组、壮通饮(低、中、高)剂量组和阳性药物对照组采用手术方法结扎心脏左冠状动脉前降支末梢建立大鼠冠心病心肌梗死模型,假手术组只开胸不结扎,造模后,壮通饮组按照低(6.8g/kg)、中(13.6g/kg)、高(27.2g/kg)不同剂量灌胃给药,阳性药物对照用复方丹参滴丸(80 mg/kg)灌胃给药。给药4周后,取血清和心肌。(1)给药过程中,观察并记录大鼠死亡情况和一般情况。(2)通过心电图分析心率变化情况。(3)通过HE染色观察心肌病理变化。(4)通过酶联反应吸附测定法(ELISA)检测血清TNF-α、IL-6、IL-10、REN、AngII、ALD、NE、ET-1水平。(5)通过蛋白印迹法(Western blot)检测心肌组织ET-1蛋白表达。(6)通过免疫组化(IHC)和荧光实时定量(RT-PCR)方法检测心肌组织TGF-β_1的表达。数据按照“均数±标准差(x±s)”表示,组间比较采用SPSS21.0统计学软件进行单因素方差分析,P0.05为差异有统计学意义。结果:(1)一般情况比较:模型组大鼠出现饮食明显减少,精神差,活动度少,毛色干枯、无光泽,消瘦明显,呼吸深快等表现,药物干预后,ZTY(低、中、高)剂量组、阳性药物对照组上述现象均有不同程度改善,且ZTY低、中剂量组、阳性药物对照组改善相对明显。(2)心率变化情况:模型组大鼠心率明显增高,药物干预后心率明显好转,组间差异无统计学意义(P0.05)。(3)HE染色:模型组炎症细胞浸润、心肌纤维化、胶原沉积明显,药物干预后,ZTY(低、中、高)剂量组、阳性药物对照组上述现象均明显好转,且中剂量组效果显著。(4)酶联反应吸附法(ELISA):与空白组、假手术组相比,模型组血清TNF-α、IL-6、IL-10、REN、AngII、ALD、NE、ET-1水平明显升高(P0.05);与模型组相比,ZTY(低、中、高剂量)组、阳性药物对照组TNF-α、IL-6、REN、AngII、ALD、NE、ET-1水平明显降低(P0.05),IL-10明显升高(P0.05),差异均有统计学意义;与低剂量组比较,中、高、阳性药物对照组TNF-α、IL-6、REN、AngII、ALD、NE、ET-1水平明显降低(P0.05),差异有统计学意义,IL-10的表达无明显变化(P0.05),差异无统计学意义;中、高、阳性药物对照组间比较,TNF-α、IL-6、IL-10、REN、AngII、ALD、NE、ET-1的变化无意义(P0.05),差异无统计学意义。(5)蛋白印迹法(Western blot):模型组ET-1蛋白相对表达量明显高于空白组和假手术组,药物干预后,ZTY(低、中、高剂量)组、阳性药物对照组均降低,且中剂量组降低相对明显。(6)TGF-β_1免疫组化(IHC):模型组呈强阳性表现,药物干预后,ZTY(低、中、高)剂量组、阳性对照组呈阳性表现。荧光实时定量法(RT-PCR)测TGF-β_1:与空白组、假手术组相比,模型组心肌组织TGF-β_1水平明显升高(P0.05),差异有统计学意义;与模型组相比,ZTY(低、中、高剂量)组、阳性药物对照组TGF-β_1水平明显降低(P0.05),差异有统计学意义;与低剂量组比较,中、高、阳性药物对照组TGF-β_1水平明显降低(P0.05),差异有统计学意义;中、高、阳性药物对照组间比较(P0.05),TGF-β_1差异无统计学意义。结论:(1)壮通饮具有改善大鼠一般状况,降低心肌炎症细胞聚集、减少炎症因子(TNF-α、IL-6、ET-1、TGF-β_1)及神经体液相关因子(NE、REN、AngII、ALD)释放,对冠心病心肌梗死有一定治疗作用。(2)壮通饮干预冠心病心肌梗死大鼠的作用机制可能与其减少炎症细胞聚集、炎症因子(TNF-α、IL-6、ET-1、TGF-β_1)及神经体液因子(NE、REN、AngII、ALD)释放或干扰其合成有关,且以中剂量组效果最佳。
【学位单位】：右江民族医学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R285.5
【部分图文】：

结扎心肌周围颜色变暗，留线在心脏。5）闭胸，缝合气管：用 4-0 线迅速缝合肋骨，并挤压排除胸腔内空气，缝皮肤，消毒切口。拔出气管插管，逐层缝合气管前肌、皮肤浅筋膜和皮口（造模总过程约 20min 左右）。6）术后处理：术后完成Ⅱ导联心电图记录，肌内注射 10 万 U 青霉素预将大鼠放笼中室温饲养，待其苏醒。手术组：只开胸不结扎左冠状动脉末梢，其他步骤均同模型组。鼠心肌梗死成功的标准：（1）手术过程中准确结扎左冠状动脉前降支末证实 ST 段抬高和病理性 Q 波（见图 1-1、1-2、1-3）。

表 2-3 各组大鼠心率（HR； x s）Table 2- 3 Heart rate of rats in each group（HR； x s）别 n 剂量 10 组 10 10 ) 10 6.8 ) 10 13.6 ) 10 27.2 10 0.08 组、假手术组比较，aP<0.05；与模型组比较，bP<0.05；低、中、较，cP>0.05。pared with the blank group and the sham operation group,aP<0.05; Comp, Compared with the low dose group,cP<0.05; The compared between thecontrol groups,dP>0.05.

The effect of ZTY on the level of TNF- alpha, IL-6 and IL-10 in the serum of rats（pg/ms） n 剂量 TNF-α IL-6 IL-1组 10 101.18±6.53 73.37±3.02 22.75±组 10 103.80±5.84 74.01±3.46 22.64±组 10 171.52±6.43a104.25±4.06a29.12±低) 10 6.8 134.25±5.93b91.87±3.09b36.87±中) 10 13.6 119.57±5.64bcd81.75±3.19bcd38.12±2高) 10 27.2 116.80±6.61bcd82.75±3.45bcd36.62±3组 10 0.08 121.07±5.85bcd83.52±2.45bcd40.53±3：与空白组、假手术组比较，aP<0.05；与模型组比较，bP<0.05；与低剂量组比较P<0.05；中、高、对照组间比较，dP>0.05。: compared with the blank group and the sham operation group,aP<0.05; Compared with <0.05;Compared with the low dose group,cP<0.05; The compared between the middle, hcontrol groups,dP>0.05.

【参考文献】

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本文编号：2818432