瓜蒌提取物的制备及其抗心肌缺血—再灌注损伤作用的研究

发布时间：2020-09-21 08:05

　　目的:本课题拟在筛选瓜蒌最佳提取溶剂、明确瓜蒌皮-子的合理配比、优化瓜蒌提取液醇沉工艺的基础上,制备瓜蒌提取物,研究瓜蒌提取物的性状、测定其中物质含量,并探讨瓜蒌提取物能否保护大鼠防止心肌缺血和再灌注损伤。方法:1)建立瓜蒌内总有效成分定量分析方法。参照药典瓜蒌片的制备方法(瓜蒌皮35%,瓜蒌子65%)分别选用水、60%乙醇和二氯甲烷提取,考察不同提取溶剂提取的药液中有效成分含量及抗大鼠心肌缺血损伤的能力,确定最佳提取溶剂。2)考察不同配比提取物中有效成分含量及抗大鼠心肌缺血的能力,比较6种皮-子配比提取的药液与瓜蒌的指纹图谱共有模式的相似性,筛选出最佳皮-子比例。3)依据响应面法原理,筛选出最佳醇沉工艺。4)制备瓜蒌提取物。采用高效液相色谱HPLC-PDAD等方法对瓜蒌提取物的性状、检查、指纹图谱和含量测定加以研究。5)阳性药组大鼠灌胃复方丹参滴丸,假手术组灌胃生理盐水,瓜蒌提取物作为试验组。心肌缺血大鼠模型制作方法为,将大鼠麻醉后将其心脏冠状动脉左前降支结扎,观察心电图变化;测定其血浆肌红蛋白(Myoglobin,MYO-MB)、心肌肌钙蛋白(Troponin-T,cTnT)、肌酸激酶同工酶质量(Creatine Kinase-MB,CK-MB);采用光镜检查心肌组织变化并测定心肌梗死面积。结果:1)瓜蒌水提组和60%乙醇提组,总氨基酸含量高(P0.01),二氯甲烷提组总黄酮含量高(P0.01)。瓜蒌水提组与模型组比较,心电图st段明显降低(P0.01或P0.05);且可降低大鼠血浆CK-MB、cTnT、MYO含量(P0.05)。2)6种配比的瓜蒌提取物对心肌缺血大鼠血浆MYO、CK-MB、cTnT水平的影响与正常对照组比较,P0.01;皮-子比例为50:50时图谱相似度为0.9363±0.0082,高于其他各组(P0.05或0.01)。3)药液相对密度对综合评分影响较大(P0.01)。随着醇沉时间的延长,综合评分有所增大,但影响较小。醇沉浓度和醇沉时间增加,综合评分增大。当相对密度为1.20,乙醇浓度为80%,醇沉时间为36h可得到的瓜蒌提取物的最佳综合评价指标。4)瓜蒌提取物为棕黄色粉末状物质,气微甜,味微苦,极易溶于水。瓜蒌提取物含有多种核苷类成分,其中腺苷含量最高,为0.82‰。5)与模型组比较,瓜蒌提取物高剂量组可明显抑制大鼠心电图st段抬高(P0.01或P0.05);瓜蒌提取物高剂量组可显著降低大鼠血浆MYO和CK-MB指标含量(P0.05);瓜蒌高剂量组能保护大鼠心肌组织防止受损并可减少梗死区面积和危险区面积,P0.05,差异有统计学意义.结论:瓜蒌提取物制备溶剂为水,皮-子比例为50:50,醇沉法可用于瓜蒌提取物的精制。瓜蒌提取物具有一定的抗心肌缺血-再灌注损伤作用。
【学位单位】：皖南医学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R285.5
【部分图文】：

心电图,实验流程,血浆生化指标,心肌缺血-再灌注损伤

准药效学研究心肌缺血-再灌注损伤模型含药血浆、心电图1.血浆生化指标检测2.组间心电图 st 段变化3.心肌组织形态学4.心肌梗死面积测定性状：颜色、气、味检查：干燥失重?

心肌梗死面积,实验流程

t段变化

瓜蒌,不同溶剂,提取液

t段的影响注：与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01

【参考文献】