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黄连素通过增强脂肪酸氧化减轻棕榈酸诱导的肾小管上皮细胞凋亡

发布时间:2020-09-22 07:11
   研究背景肾小管上皮细胞内异常的脂质积聚可导致细胞损伤和功能障碍,这是CKD持续进展的重要因素。研究发现,黄连素作为一种从传统医学草药中萃取出的天然植物碱,能有效地降低血脂,并能防治糖尿病肾病的发生发展。有研究显示黄连素能够减轻棕榈酸诱导的肝细胞脂质积聚和胰岛β细胞凋亡,但黄连素在防治高脂诱导的肾脏损害机制尚有待于进一步研究。目的探讨黄连素是否能减轻肾小管上皮细胞内的脂质积聚从而减轻凋亡,及其作用机制。方法1.用不同浓度的棕榈酸处理肾小管上皮细胞,观察其细胞内脂质集聚及其凋亡的变化。2.用不同浓度的黄连素、CPT1抑制剂尼莫克舍处理细胞,然后用棕榈酸诱导细胞,采用Western印迹检测CPTIA、PPARα、PGClα及Cleaved-caspase3蛋白的表达,细胞免疫荧光检测CPT1A的细胞内分布及表达,油红O及尼罗红染色检测细胞内脂质含量,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果1.棕榈酸刺激可明显增加肾小管上皮细胞凋亡,而黄连素处理后细胞凋亡减少。2.棕榈酸刺激可明显增加肾小管上皮细胞内脂质积聚。而黄连素处理后,细胞内脂质积聚减轻。3.棕榈酸处理肾小管上皮细胞后,调节脂肪酸氧化的关键因子CPT1A、PPARα和PGClα蛋白表达没有相应的升高。而黄连素刺激下,肾小管上皮细胞CPT1A、PPARα和PGC1α蛋白表达显著升高。4.我们进一步用CPT1抑制剂尼莫克舍阻断脂肪酸氧化,发现尼莫克舍抵消了黄连素对棕榈酸诱导的脂质积聚及凋亡的保护性作用。结论脂肪酸氧化障碍可能在棕榈酸诱导肾小管上皮细胞内脂质积聚及凋亡中发挥了重要作用;黄连素能够通过增强脂肪酸氧化,从而减轻棕榈酸诱导的肾小管上皮细胞内脂质积聚,进而减轻了细胞凋亡。
【学位单位】:重庆医科大学
【学位级别】:硕士
【学位年份】:2018
【中图分类】:R285
【部分图文】:

细胞凋亡,处理组,对照组,统计学意义


450umol/L处理组凋亡率增加,其差异均具有统计学意义(尸<0.05);而PA逡逑150umol/L处理组与对照组比较,Cleaved-caspase3蛋白表达水平无统计学差异逡逑(办0.05)(见图1A、B、E、F)。与PA450umol/L处理组比较,BBR联合PA处逡逑理组Cleaved-caspasd蛋白表达显著减少,细胞凋亡率显著减少,其差异均具有统逡逑计学意义(尸<0.05);而较对照组,单纯使用BBR处理组Cleaved-caspase3蛋白表逡逑达水平和凋亡率均无统计学差异(&0.05),见图1邋C-F。逡逑12逡逑

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本文编号:2824064

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