广西醋莪术活血化瘀物质基础研究

发布时间：2020-09-22 13:21

　　目的:中药莪术是姜科植物蓬莪术(Curcuma phaeocaulisValeton)、广西莪术(Curcuma kwangsiensis S.G.Lee et C.F.Liang)和温郁金(CurcumawenyujinY.H.Chen et C.Ling)的干燥根茎,具有行气破血、消积止痛的功效,用于治疗淤血闭经,食积胀痛等症。现代研究表明其有明显的抗肿瘤、抗血管生成作用,是临床上常用的活血化瘀药物。虽然三种莪术在临床上的应用大致相同,但成分却有一定的差异。广西莪术的化学成分与其活血化瘀的药效之间的相关性研究还未见报道。因此本课题通过对广西莪术活血化瘀药效及其有效部位的化学成分进行探讨,为其进一步开发、利用提供实验依据。方法:1.醋莪术活血化瘀有效剂量的确定。SD大鼠40只,雌雄各半,随机分成正常对照组,模型组(造模不给药),醋莪术高(3.72 g·kg~(-1))、中(1.86 g·kg~(-1))、低(0.93 g·kg~(-1))剂量组,每组8只。除正常对照组外,其余各组以每日冰水游泳和束缚建立寒凝气滞血瘀模型,成模后连续给药三天,于第四天取材,通过凝血时间、血液流变学等指标考察莪术活血化瘀的有效剂量。2.醋莪术活血化瘀有效部位的研究。SD大鼠50只,随机分为5组,每组10只,即正常对照组,模型组(造模不给药),乙酸乙酯部位组(A)、醇部位组(B)、水部位组(C),造模成功后给以相应醋莪术提取物,以各组大鼠凝血时间、血液流变学、凝血酶原时间,部分活化凝血酶时间和凝血酶时间等指标评价药效。3.醋莪术活血化瘀的有效部位的成分分离及结构鉴定。将提取到的有效部位上硅胶柱,依次以环己烷:乙酸乙酯(15:1)、环己烷:乙酸乙酯(10:1)、环己烷:乙酸乙酯(10:3)、环己烷:乙酸乙酯(2:1)、二氯甲烷:甲醇(15:1)、二氯甲烷:甲醇(1:1)梯度洗脱,再将量大的馏分过凝胶柱脱色素,通过制备液相分离纯化后利用UV、ESI-MS、~1H-NMR、~(13)C-NMR、DEPT鉴定化合物结构。4.醋莪术有效部位中分得的单体成分进行活性初筛。以HUVEC和A549为模型,分别给以不同浓度梯度的姜黄素(阳性对照)和各单体成分,分别于给药24 h、48 h后用MTT法检测细胞存活率,考察各成分的抗血管生成和抗肿瘤活性。结果:1.醋莪术水煎液高(3.72 g·kg~(-1))、中(1.86 g·kg~(-1))、低(0.93 g·kg~(-1))剂量组均可缩短凝血时间,降低血浆、全血粘度以及全血高、中、低切相对指数,提示其有抗凝的作用并呈剂量依赖性,醋莪术不同部位均显示一定的抗凝血活性,其中以乙酸乙酯部位活血化瘀效果最佳。2.从醋莪术乙酸乙酯部位分离纯化得到了7个单体成分,其中Zederone(1)、吉马酮(2)、curzerene(5)、furanodienone(6)为倍半萜类化合物,1-(3,4-dihydroxy-phenyl)-7-(4-hydroxyphenyl)-(6E)-6-hepten-3-ol(3)、(3R,5R)-3,5-diacetoxy-1-(3,4-dihydroxyphenyl)-7-(4-hydroxyphenyl)heptane(4)、1,7-bis(4-hydroxyphenyl)hepta-4E-6E-dien-3-one(7)为姜黄素类化合物。3.分离得到的单体成分中,化合物3、4、6、7显著抑制HUVEC的生长,表现出较好的抗血管生成作用。化合物3、5、6、7显著抑制A549的生长,表现出较好的抗肿瘤作用。其中化合物7抗肿瘤和抗血管生成作用均优于阳性对照姜黄素。结论:醋莪术乙酸乙酯部位具有较好的活血化瘀作用,从其中分离得到的单体成分7具有较好的抗血管生成作用和抗肿瘤作用,可能是广西醋莪术活血化瘀作用的主要活性成分。
【学位单位】：广东药科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2017
【中图分类】：R284;R285.5
【部分图文】：

广西醋莪术活血化瘀物质基础研究

三种主要姜黄素类成分结构

莪术,制备流程,不同部位,乙酸乙酯

方法得到的醋莪术乙酸乙酯部位成分分析验中考虑到乙酸乙酯层极性较小，水提取效率低，为了提高乙酯直接回流提取得到的乙酸乙酯部位，发现药效很好。，为了节约能源，减少污染，拟采取萃取法提取乙酸乙酯改变对其中成分有何影响，因此我们分析了不同提取方法成分的影响。酸乙酯部位的制备：见第二章第二节 2.1 项下。酸乙酯部位的制备：取干燥的醋莪术饮片，打粉后以 8 倍in，过滤，合并滤液，减压回收后依次用石油醚，乙酸乙酯酸乙酯部位，剩余水层即为水部位。图如下：

化合物

化合物1的1H-NMR谱

【参考文献】