多维色谱指纹图谱用于海狗人参丸质量控制和非法添加物筛查研究
发布时间：2020-09-23 07:49
保健品作为健康生活不可替代的消费品,逐渐引起人们重视。目前市场上的品牌种类繁多,产品品质差异巨大,复杂的样品基质和非法添加有害物给食品安全监测增加了难度。海狗人参丸是一种处方固定的保健补肾产品,于2004年获得国家药监局批准(国食健字号G20040972),具有补肾壮阳的功效,受到人们的青睐。本文以海狗人参丸作为研究对象,首先基于海狗人参丸中有效成分性质的研究,利用高效能的色谱分离和多维紫外光谱检测技术,通过样品前处理方法优化,研究海狗人参丸的指纹图谱基本特征,结合化学计量学方法和非法添加物的光谱特征,建立了海狗人参丸的多维液相色谱指纹图谱,用于其质量控制和非法添加物的筛查方法。主要研究内容如下:1、采用反相液相色谱法,梯度洗脱,结合多波长检测,建立海狗人参丸中有效组分的HPLC分析方法。通过对11批次样品的分析获取指纹图谱信息,结合相似度评价,建立海狗人参丸多波长指纹图谱,并应用于多批次实际样品的质量评价,结果表明三例产品不合格。2、采用主成分分析和系统聚类分析,对11批次海狗人参丸的色谱数据,利用Simca-P和SPSS软件进行统计分析,确定了样品分类结果:第一类为S1、S2、S3、S4、S8和S9,第二类为S5、S6、S7、S10,第三类为S11,并确定了保留时间为74.7 min、76.6 min、111.3 min组分为海狗人参丸的质控成分。3、基于海狗人参丸的基本指纹特征,采用多维HPLC指纹图谱技术,研究了PDE-5型抑制剂、雄性激素、α受体拮抗剂和育亨宾等16种潜在非法添加物的色谱行为,结合多波长检测以减少或去除样品基质的干扰,建立了一种用于鉴定海狗人参丸产品中非法添加物的多维指纹图谱分级筛查方法。该方法成功应用于海狗人参丸样品中非法添加物的筛查,在5批样品中发现对1例疑似样品含有睾酮,其含量为18.8μg/g,测定回收率和相对标准偏差分别为83.6%和6.82%。通过一级和二级指纹图谱结合光谱纯度和质谱验证,大大提高了检测的准确性和可靠性。4、采用碳酸二甲酯/水/硫酸铵盐析分相萃取体系为萃取剂,结合微波辅助技术对海狗人参丸进行样品前处理,研究了萃取体系成相和萃取条件,通过单因素实验优化了实验条件。结果表明碳酸二甲酯与水为1:7.5(V/V),以硫酸铵作为盐析剂,加入量为8 g,提取温度70℃、提取时间为10 min、料液比为25时萃取效率最高。盐析分相萃取降低了样品基质的干扰,缩短了分析时间,结合多维指纹图谱分级筛查和光谱、质谱验证,进一步提高了非法添加物筛查的灵敏度、准确性和可靠性。
【学位单位】：广东药科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R286.0
【部分图文】：
图 2-3 海狗人参丸提取液 HPLC-DAD 分析 3D 图Fig. 2-3 3D diagram of extracts of FSGP analyzed by HPLC-DAD.0 30 60 90 120 15001020304050mAUTime (min)203 nm224 nm270 nm277 nm290 nm图 2-4 不同波长下海狗人参丸供试液色谱图
图 2-5 海狗人参丸标准指纹图谱 （a）：203 nm，（b）：224 nm，（c）：270 nm，（d）：277 nm，（e）：290 nmFig. 2-5 The standard fingerprint of FSGP R: Standard diagram.由图 2-5 可知，11 批不同来源的海狗人参丸 5 个波长下所得的 HPLC-UV 色谱图分别存在 30、16、11、20、12 个共有特征峰。此外，计算结果表明 5 个检测波长下 11 批次样品色谱图非共有峰的峰面积占总峰面积的比例分别为 6.0 %、7.3 %、9.0%、9.5 %、8.8 %，均低于 10%，表明所选择的共有特征峰基本能够全面概括海狗人参丸样品的特征信息。表 2-7 的相似度计算结果表明，11 批次海狗人参丸样品的 HPLC 指纹图谱与标准指纹图谱的相似度均大于 0.9，满足现行标准的要求[120]，说明拟合得到的 HPLC-UV 标准指纹图谱“R”能够较全面的表述海狗人参丸保健品中有效成分的信息，且这 11 批样品在化学成分组成上差异性较小，但由相对峰面积计算结果可知，11 批次海狗人参丸中各组分的含量存在差异。表 2-7 海狗人参丸样品相似度评价结果Tab. 2-7 The similarity evaluation of FSGP.
图 2-6 海狗人参丸市售样品图谱与标准指纹图谱对比Fig. 2-6 The comparison of suspected samples with standard fingerprint of FSGP.另外从药丸包衣和粉末的颜色、颗粒大小均匀度来看，包衣颜色均为红色，异不大，药丸粉末颜色相较 11 批次海狗人参丸的浅褐色而言偏深，且药丸大个别存在差异，从图 2-6 也可以看出 SS3、SS4 和 SS5 中存在一些未知色谱峰明样品中可能加入了外源性的物质其它组分，且主要成分含量要低于产品均值判定为不合格产品。上述结果表明本章所建立的海狗人参丸质量控制方法能够效的对市售样品的质量进行准确的分析评价，为其质量评估提供了依据。6 本章小结（1）采用 YMC-Triart C18 柱，以乙腈-水为流动相，梯度洗脱，采用 DAD 检器对海狗人参丸供试液进行全波长扫描，建立了海狗人参丸中有效组分LC-UV 分析方法。根据海狗人参丸的处方组成，结合中国药典以及样品 3D 扫
【学位单位】：广东药科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R286.0
【部分图文】：
图 2-3 海狗人参丸提取液 HPLC-DAD 分析 3D 图Fig. 2-3 3D diagram of extracts of FSGP analyzed by HPLC-DAD.0 30 60 90 120 15001020304050mAUTime (min)203 nm224 nm270 nm277 nm290 nm图 2-4 不同波长下海狗人参丸供试液色谱图
图 2-5 海狗人参丸标准指纹图谱 （a）：203 nm，（b）：224 nm，（c）：270 nm，（d）：277 nm，（e）：290 nmFig. 2-5 The standard fingerprint of FSGP R: Standard diagram.由图 2-5 可知，11 批不同来源的海狗人参丸 5 个波长下所得的 HPLC-UV 色谱图分别存在 30、16、11、20、12 个共有特征峰。此外，计算结果表明 5 个检测波长下 11 批次样品色谱图非共有峰的峰面积占总峰面积的比例分别为 6.0 %、7.3 %、9.0%、9.5 %、8.8 %，均低于 10%，表明所选择的共有特征峰基本能够全面概括海狗人参丸样品的特征信息。表 2-7 的相似度计算结果表明，11 批次海狗人参丸样品的 HPLC 指纹图谱与标准指纹图谱的相似度均大于 0.9，满足现行标准的要求[120]，说明拟合得到的 HPLC-UV 标准指纹图谱“R”能够较全面的表述海狗人参丸保健品中有效成分的信息，且这 11 批样品在化学成分组成上差异性较小，但由相对峰面积计算结果可知，11 批次海狗人参丸中各组分的含量存在差异。表 2-7 海狗人参丸样品相似度评价结果Tab. 2-7 The similarity evaluation of FSGP.
图 2-6 海狗人参丸市售样品图谱与标准指纹图谱对比Fig. 2-6 The comparison of suspected samples with standard fingerprint of FSGP.另外从药丸包衣和粉末的颜色、颗粒大小均匀度来看，包衣颜色均为红色，异不大，药丸粉末颜色相较 11 批次海狗人参丸的浅褐色而言偏深，且药丸大个别存在差异，从图 2-6 也可以看出 SS3、SS4 和 SS5 中存在一些未知色谱峰明样品中可能加入了外源性的物质其它组分，且主要成分含量要低于产品均值判定为不合格产品。上述结果表明本章所建立的海狗人参丸质量控制方法能够效的对市售样品的质量进行准确的分析评价，为其质量评估提供了依据。6 本章小结（1）采用 YMC-Triart C18 柱，以乙腈-水为流动相，梯度洗脱，采用 DAD 检器对海狗人参丸供试液进行全波长扫描，建立了海狗人参丸中有效组分LC-UV 分析方法。根据海狗人参丸的处方组成，结合中国药典以及样品 3D 扫
【相似文献】
相关期刊论文 前8条
1 杜洪彬,张秀芝,劳红闽;鹤蟾人参丸联合长春瑞滨与顺铂治疗非小细胞肺癌疗效观察[J];现代中西医结合杂志;2005年18期
2 王岳;;从“韩国人参丸事件”反思我国药物临床试验中的法律问题[J];中国药房;2005年10期
3 陈扬前;苏劲松;;外台人参丸治疗早泄的临床观察[J];云南中医中药杂志;2017年12期
4 钟华;;一个中国“试药人”的悲惨命运[J];廉政w
本文编号：2825048
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zhongyaolw/2825048.html
