益气养阴活血方对2型糖尿病大鼠胰腺组织PI3K及PDK1的影响

发布时间：2020-09-24 12:23

　　目的观察益气养阴活血方(YYHP)对2型糖尿病(T2DM)大鼠模型体质量、糖代谢、脂代谢、胰腺组织病理改变及胰腺内磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)和磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)蛋白表达水平的影响,探讨益气养阴活血方改善胰岛β细胞功能损伤的可能作用机制。方法随机选取雄性Sprague Dawley大鼠10只作为正常对照组(NC组),其余50只为高脂饮食组(HFD组)。NC组普通饲料喂养加生理盐水灌胃直至实验结束。HFD组通过高脂饮食加多次小剂量腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导建立的T2DM大鼠模型随机分为模型组(DM组)、津力达组(JLD组)、YYHP高(YYHP-H组)、中(YYHP-M组)、低(YYHP-L组)剂量组共5组,分别给予生理盐水、JLD颗粒(1.5g/kg)、YYHP高剂量(55.00g/kg)、中剂量(27.50g/kg)、低剂量(13.75 g/kg)灌胃,1次/d,周期28d。实验期间观察大鼠行为学改变,定期监测大鼠体质量和血糖情况。实验结束后,采集血清和胰腺组织,采用生化法检测空腹血糖(FBG)、血脂(TC、TG、LDL-C、HDL-C)水平,ELISA法用于检测血清胰岛素(FINS)、糖化血清蛋白(GSP)、胰高血糖素(GC)含量,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛素分泌指数(HOMA-β),取大鼠胰腺组织HE染色后光镜下观察胰岛细胞形态改变,分别采用免疫组织化学法和免疫蛋白印迹法(western blot)检测胰腺中PI3K和PDK1的蛋白表达水平。结果1一般情况:NC组大鼠饮食、摄水、尿量均正常,形体匀称,反应敏捷,行为活跃,一般状况较好;成模实验鼠逐渐出现饮食、水的摄入量、小便量增加并伴形体消瘦,反应迟钝,不喜活动,一般状况较差;药物干预28d后,JLD组和YYHP各剂量组与DM组比较以上症状均有所改善。2体质量:给药后与给药前比较,NC组体质量增加,HFD组体质量均有不同程度下降(P0.01,P0.05);给药后与DM组比较,JLD组和YYHP各剂量组体质量增加(P0.05),但各组间比较无差异(P0.05)。3糖代谢:与DM组比较,JLD组和YYHP各剂量组大鼠FBG、2hBG、GSP及GC水平均有不同程度的降低,FINS、HOMA-β水平升高(P0.01),YYHP-M组HOMA-IR水平降低(P0.01)。4脂代谢:与DM组比较,JLD组和YYHP各剂量组大鼠TC、TG、LDL-C水平明显降低,HDL-C水平明显升高(P0.05,P0.01),而YYHP-M组降低TC、TG、LDL-C效果最优(P0.01),但对HDL-C的升高作用各组间无明显差异(P0.05)。5胰腺组织病理形态:NC组大鼠的胰岛结构完整,岛内细胞大小正常,分布均匀,排列紧密规整,胞核清晰居中呈卵圆形;DM组大鼠的胰岛萎缩,细胞结构不规整,细胞核偏心分布,胰岛间质大量纤维化,伴有大量空泡和增生浸润;与DM组比较,JLD组和YYHP各剂量组大鼠胰岛组织均有不同程度的改善。6胰腺组织中PI3K、PDK1蛋白表达:免疫组化结果:NC组大鼠胰腺组织中PI3K、PDK1蛋白表达呈棕黄色,阳性表达最高(P0.01);DM组表达呈浅黄色,阳性表达明显降低(P0.01);与DM组比较,JLD组和YYHP各剂量组表达有所增强,而以YYHP-M组PI3K蛋白表达最明显(P0.01),对PDK1蛋白表达影响YYHP各组间无差异(P0.05)。Western blot结果:与DM组比较,JLD组和YYHP各剂量组胰腺组织中PI3K和PDK1蛋白的表达明显升高(P0.01),而以YYHP-M组效果最佳(P0.01)。结论1益气养阴活血方能够增加2型糖尿病大鼠体质量,改善大鼠一般状况。2益气养阴活血方能够纠正2型糖尿病大鼠血糖和血脂水平异常,促进胰岛β细胞损伤恢复,增加胰岛素分泌,改善胰岛素抵抗。3益气养阴活血方可能通过上调PI3K/Akt信号通路上PI3K和下游PDK1蛋白表达改善胰岛β细胞功能。图7幅;表6个;参163篇。
【学位单位】：华北理工大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R285.5

【参考文献】