茵陈蒿汤配方颗粒规范化研究

发布时间：2020-09-25 21:00

　　茵陈蒿汤首载于张仲景《伤寒论》中,该方君药为茵陈,臣药和佐使药为栀子、大黄,是治疗湿热黄疸的经典方剂。~([1])现代药理研究表明,其在保肝、利胆、解除热邪、抗炎、镇痛、抑菌、抗病毒等方面均有较好疗效。目前,中国列属国际肝病大国,传统中医治疗肝疾病,常以茵陈蒿汤为基础方,在此加减后广泛应用于临床。但目前市场所售仅以单味配方颗粒,缺少传统中药合煎过程,本实验以复方煎煮制备复方配方颗粒,兼顾传统复方合煎和现代化中药技术,以经典基础方搭配单味配方颗粒,更接近中医药辩证论治、随证加减的指导思想。目的:本实验选取经典方剂茵陈蒿汤为研究对象,剂型选用新型饮片模式配方颗粒。从复方提取工艺、纯化和浓缩、成型工艺的制备工艺以及与传统汤剂和单味配方颗粒药效对比几方面进行规范化研究。配方颗粒在国际上多以经方搭配单味配方颗粒形式使用,本实验为我国后续推进中医药现代化,中药配方颗粒接轨国际提供一些参考。方法:1.入药饮片检查,参照2015年版《中国药典》,对投料饮片进行水分、灰分、浸出物、薄层鉴别、高效液相含量测定等各项检查。2.确定复方提取工艺,先对药材浸泡时间、茵陈先煎时间、共煎时间、加水量进行单因素考察,确定其范围。采用星点设计-效应面法以3因素3水平要求,建立了试验优化所得提取工艺。3.纯化浓缩和成型工艺,经方配方颗粒是以传统煎煮结合现代剂型手段的新产物,因此水提后仅采用简单抽滤除杂,减压浓缩至适宜浓度后,加入辅料进行湿法制粒。选用正交设计筛选具体成型步骤并进行相关检查。4.质量标准和初步稳定性试验,按《中国药典》2015年版进行各项检查并起草质量标准(草案),考察所制得配方颗粒的长期稳定性试验和加速稳定性试验。5.方中有效成分含量和药效学初步对比试验,对比了制备所得茵陈蒿汤复方配方颗粒、三味饮片单一配方颗粒混合所得复方、传统煎煮汤剂中起效的成分的占比波动。并进行相关保护肝脏受损药理实验研究。结果:1.三种饮片均能符合2015年版《中国药典》项下考察规范,可入药。2.确定茵陈蒿汤提取工艺为加入饮用水730 mL浸泡60 min后,煎煮茵陈46min,再投栀子和大黄饮片,共同煎煮23 min。3.筛选颗粒制备工艺为:以提取后的滤液,50℃减压浓缩至密度为1.12~1.17g/cm~3的提取液,加入提取液体积4倍数量的辅料(乳糖:甘露醇等于1.25),以浓度为40%乙醇做润湿剂,湿法制粒后,过筛子目数为10,于50℃烘箱中烘干时间达1 h,整理即得。4.按照2015年版《中国药典》相关要求,起草茵陈蒿汤配方颗粒质量标准,初步稳定性试验合格,质量稳定。5.有效成分含量比较上,三种不同制备方法所得茵陈蒿汤中绿原酸含量相近,茵陈蒿汤合煎配方颗粒中栀子苷含量较少于茵陈蒿汤分煎配方颗粒和传统汤剂中的含量。大黄所含有效成分在传统茵陈蒿汤煎剂中比两种配方颗粒含量较高些。而其在茵陈蒿汤分煎配方颗粒和合煎配方颗粒中含量基本相当。药理实验上,合煎高中低剂量、单味颗粒高中剂量、传统汤剂均能降低CCl_4致肝损伤程度。合煎高剂量这组效果较单味颗粒高中剂量这组和传统汤剂这组更好。结论:茵陈蒿汤复方配方颗粒,在拥有便携易服,质量可控优点的同时,兼顾了传统中药合煎过程,填补了中药配方颗粒市场仅有单味配方颗粒存在的空白。其优选出的制备工艺能保障配方颗粒质量的稳妥性和成分的有效性。在配方颗粒合煎、单煎和传统煎煮的药理实验对比中,组方配方颗粒的起效的成分含量上仅次于传统煎煮,其对CCl_4导致的小白鼠肝脏受损所产生的保护作用最好。在经典组方配方颗粒的基础上,随证搭配单味配方颗粒的模式,在更接近传统中医药指导思想同时,也更贴合中药现代化发展。
【学位单位】：成都中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2017
【中图分类】：R283.6
【部分图文】：

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12图 1 茵陈饮片薄层色谱图1 绿原酸对照品，2~4 三批茵陈饮片Fig. TLC chromatogram of Yinchen2.2 水分分别取三批茵陈饮片粉碎后的粉末，按 2015 年版《中国药典》第四部通则0832 第二法（烘干法）测定，实验所得结果均未超过 12%规定，具体数据见表3。表 3 茵陈三批饮片水分测定结果(n=3)Table 3 moisture determination of Yinchen(n=3)批号 20141101 20141102 20141103水分（%） 11.39 11.21 11.18水分均值（%） 11.262.3 浸出物分别取三批样品各 2g，精密称定，按 2015 年版《中国药典》第四部通则 2201水溶性浸出物测定(热浸法)，结果均超过 25%，具体数据见表 4。表 4 茵陈三批饮片浸出

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50％甲醇补至之前克数，离心旋转后取上层清透液 5 mL 加入 25 mL 棕色容中，滴加 50％甲醇到刻度，微孔滤膜滤过，即得。对照品溶液制备：取洁净棕色容量瓶，称绿原酸对照品适量，滴入 50％制成 49.2 μg/mL 的液体，即得。三批茵陈样品绿原酸含量均不低于 0.50%（以干燥品计），具体数据结表 5，图 2，图 3。表 5 茵陈三批饮片中绿原酸含量测定结果(n=3)Table 5 chlorogenic acid determination of Yinchen(n=3)批号含量（ mg /g）20141101 8.220141102 7.920141103 8.7

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图 3 样品色谱图a 绿原酸Fig 3 Reference chromatogram of sample3 栀子入药标准检查本品为茜草科植物栀子 Gardenia jasminoides Ellis 的干燥成熟果实。对三批入药饮片按 2015 年版《中国药典》第一部栀子项下进行下列检测。3.1 薄层鉴别供试品溶液制备：用三批茵陈样品，通过粉碎机碎裂后倒入三目筛筛过，各取粉末 1g，量取 50%甲醇 10mL 倒入，以 40min 时间超声后过滤，以续滤液备用。对照药材制备：称栀子对照药材 1g，精密称定后，按供试品液体方法制备。对照品溶液制备：取栀子苷对照品适量，以乙醇溶解为浓度 4mg/mL，备用。

【参考文献】