通便汤治疗STC从肺论治的相关机制研究

发布时间：2020-09-25 19:40

　　目的:本研究课题通过观察便秘大鼠肺肠组织神经递质及水通道蛋白的变化,分析津亏肠燥,损伤肺阴的病理过程,旨在初步阐明肠病及肺的相关生物学基础,并运用名医验方"通便汤"对该模型动物进行干预,从现代医学角度诠释中医学肠病从肺论治的科学性。方法:将60只SD大鼠随机分为正常组20只,造模组40只,用复方苯已哌啶造模120天,记录大鼠体重,观察各组大鼠大便形态、数量、含水量变化,随机抽取正常组、造模组各10只,观察大鼠肠道传输功能,并运用Elisa、免疫组化技术观察便秘模型动物肺肠组织神经递质SP、VIP及水通道蛋白AQP1、AQP3的变化;将造模组30只大鼠随机分为模型组、通便汤组、聚乙二醇散剂组,每组10只,药物干预治疗1月后,记录、检测上述指标。结果:1.模型组大鼠排便数量、大便含水量、大鼠小肠炭墨推进率和结肠存留粪便较正常组均明显降低(P0.01)。造模结束后,模型组肺中SP含量较正常组显著降低(P0.01),模型组肠组织中SP较正常组降低(P0.05);模型组肺所含的VIP含量较正常组明显增加(P0.01),结肠组织中所含的VIP含量较正常组增加(P0.05)。造模结束后,模型组肺组织中AQP1及结肠组织中AQP3在着色量及着色程度上均高于正常组(P0.01)。2.药物干预4周后,模型组大鼠排便数量、大便含水量及大鼠小肠炭墨推进率和结肠存留粪便较正常组均明显降低(P0.01);通便汤及福松组大鼠排便粒数、大便含水量及结肠存留粪便较模型组均明显改善(P0.01),在大鼠小肠炭墨推进率方面通便汤组与造模组比较统计结果有显著差异(P0.01),福松组与模型组比较差异有统计学意义(P0.05);其中通便汤在改善大鼠排便数量方面优于福松组(P0.01),且通便汤在改善大鼠粪便含水量、大鼠小肠炭墨推进率方面均优于福松组(P0.05),而两组在改善大鼠结肠存留大便方面无明显差异(P0.05)。3.药物干预4周后,模型组大鼠肺肠组织SP含量较正常组显著降低(P0.01),VIP含量较正常组显著升高(P0.01);通便汤及福松干预后与模型组相比肺组织SP含量均增加,其中通便汤组肺组织SP含量改变较为明显(P0.01),两组干预后大鼠结肠SP含量较模型组同样出现明显上升趋势(P0.05);治疗后福松组及通便汤组大鼠肺肠VIP含量与模型组相比均明显降低(P0.01),通便汤和福松干预后两组肺肠SP、VIP含量变化无统计学意义(P0.05)。4.免疫组化结果显示,模型组肺肠中AQP1及AQP3的IOD值均高于正常组(P0.01),且染色范围和深度均较正常组增大,通便汤和福松干预后肺及结肠组织中水通道含量较模型组均降低(P0.01),通便汤组较福松组降低明显(P0.01)。Western blot检测药物干预后各组肺AQP1和肠AQP3相关蛋白表达,结果显示模型组肺组织中AQP1和结肠组织AQP3蛋白表达均较正常组明显升高(P0.01),通便汤及福松干预后,肺肠组织中AQP1及AQP3表达较模型组均有所下降,统计结果有统计学意义(P0.05)。结论:1.应用复方苯乙哌啶成功复制慢性传输型便秘模型,且此药造模安全稳定。2.肺肠神经递质SP、VIP及肺AQP1、肠AQP3可能是便秘"肠病及肺"的生物学基础。3.通便汤能明显改善大鼠便秘症状,促进小肠蠕动,并能减少结肠留存大便量,能够有效的治疗慢性传输型便秘。4.通便汤治疗便秘可能是通过上调肺肠组织SP含量,下调肺肠VIP含量及肺AQP1及肠AQP3蛋白含量来达到治疗便秘的作用。
【学位单位】：南京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2017
【中图分类】：R285.5
【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
第一部分理论研究
    1. 祖国医学对便秘的认识
        1.1 古代医家对便秘病因病机的认识
        1.2 中医治疗便秘的认识
    2. 现代医学对便秘的认识
        2.1 STC发病的病因及机理
        2.2 STC现代治疗进展
    3. 中医藏象理论与便秘的发病关系
        3.1 "肺与大肠相表里"的生理病理相关性
        3.2 "肺与大肠相表里"的相关机制研究
第二部分实验研究
    实验一、慢性传输型便秘模型复制
        1. 实验材料和方法
            1.1 实验动物
            1.2 实验动物饲养环境
            1.3 主要实验仪器及试剂
            1.4 STC大鼠模型的复制方法
            1.5 观察指标
            1.6 造模成功的标准
            1.7 数据处理
        2. 实验结果
            2.1 一般情况
            2.2 造模前及造模第120天的各组大鼠24小时粪便数量及含水量比较
            2.3 造模前后两组小肠炭墨推进率及结肠留存大便粒数比较
        3. 结论
    实验二、STC模型大鼠肺肠水通道蛋白及VIP、SP含量测定
        1. 实验材料和方法
            1.1 主要实验试剂及仪器
            1.2 实验标本的采取
            1.3 Elisa技术
            1.4 免疫组化技术
            1.5 数据处理
        2. 实验结果
            2.1 Elisa结果
            2.2 免疫组化结果
        3. 结论
    实验三、通便汤对STC模型大鼠排便时间和粪便的影响
        1. 实验材料和方法
            1.1 实验动物
            1.2 实验动物饲养环境
            1.3 主要实验仪器及试剂
            1.4 STC大鼠模型的复制方法
            1.5 实验分组及给药
            1.6 观察指标
            1.7 数据处理
        2. 实验结果
            2.1 一般情况
            2.2 造模前、造模第120天及药物干预4周后各组大鼠24小时粪便数量及含水量比较
            2.3 药物干预后各组小肠炭墨推进率及结肠留存大便粒数比较
        3. 结论
    实验四、通便汤对STC模型大鼠肺肠组织VIP、SP含量的影响
        1. 实验材料和方法
            1.1 主要实验试剂及仪器
            1.2 实验标本的采取
            1.3 Elisa技术
            1.4 数据处理
        2. 实验结果
        3. 结论
    实验五、通便汤对STC模型大鼠肺肠组织水通道蛋白分布和表达的影响
        1. 实验材料和方法
            1.1 主要实验试剂及仪器
            1.2 实验标本的采取
            1.3 免疫组化
            1.4 Western blot
            1.5 数据处理
        2. 实验结果
            2.1 免疫组化
            2.2 Western blot结果
        3. 结论
第三部分讨论部分
    1. 实验研究的意义
    2. 通便汤组方配伍的规律
        2.1 主张从肺论治
        2.2 重用白术
        2.3 避而未用蒽醌类泻药
    3. STC模型建立及评价标准
    4. 实验结果讨论
        4.1 便秘大鼠肺肠SP、VIP、AQP含量变化讨论
        4.2 药物干预后大便数量、含水量及肠动力变化讨论
        4.3 药物干预后大鼠肺肠SP、VIP、AQP含量变化讨论
    5. 实验研究的创新点
    6. 实验研究的结论
参考文献
攻读硕士学位期间取得的学术成果
致谢

【参考文献】