丹参通络解毒汤对心肌缺血再灌注损伤大鼠自噬的实验研究

发布时间：2020-09-25 19:09

　　 目的探讨丹参通络解毒汤对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)模型大鼠自噬的作用及其机制。方法通过结扎左冠状动脉左前降支的方法建立MIRI模型,采用随机数字表法分为空白组(K组)、假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、丹参通络解毒汤组(DTJD组)、自噬抑制剂组(3-MA组),每组10只。除空白组和假手术组外,其余各组大鼠均通过结扎左冠状动脉左前降支的方法,制备心肌缺血再灌注模型。采用电镜观察心肌细胞超微结构;使用全自动生化分析仪测定心肌损伤标志物:血浆中肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)和血清中乳酸脱氢酶(LDH);运用ELISA法检测细胞氧化应激水平:丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性;用免疫组化法测定各组大鼠心肌组织LC3蛋白的表达;采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测心肌Beclin-1mRNA表达;采用Western blot检测各组大鼠细胞自噬基因水平:Atg5、Beclin-1和LC3??/LC3?蛋白的表达。结果电镜显示,DTJD组可以调节缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞的自噬,保护心肌细胞结构,降低心肌缺血再灌注的损伤。C组与S组的差异无统计学意义(P0.05);与S组比较,IR组大鼠血清中LDH和CK-MB含量均显著升高(P0.01);心肌组织SOD水平显著降低、MDA水平显著升高(P0.01);心肌组织Beclin-1mRNA表达增强(P0.01);心肌组织自噬蛋白Atg5、Beclin-1和LC3??/LC3?表达显著增强(P0.01);与IR组比较,DTJD组和3-MA组血清中CK-MB及LDH含量明显降低(P0.01),心肌组织SOD水平增加、MDA水平下降(P0.01);心肌组织Beclin-1mRNA表达减少(P0.01);自噬蛋白Atg5、Beclin-1和LC3??/LC3?表达均减少(P0.01)。结论1.丹参通络解毒汤可明显减少心肌细胞线粒体的损伤,改善心肌组织的病理状态,且可影响自噬小体的形态结构。2.丹参通络解毒汤可明显使SOD上调、MDA下降,减轻线粒体损伤,使氧化应激反应减弱,进而下调Atg5蛋白和Beclin-1蛋白以及LC3??/LC3?的比值,抑制MIRI的自噬反应,从而发挥保护受损心肌细胞的作用。3.丹参通络解毒汤可通过下调Atg5蛋白和Beclin-1蛋白以及LC3??/LC3?的比值,抑制MIRI的自噬反应,使CK-MB和LDH的水平下降,起到减轻大鼠心肌细胞的损伤。
【学位单位】：湖南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R285.5
【部分图文】：

Beclin-1扩增曲线

GAPDH扩增曲线

图 2.1 Beclin-1 熔点曲线 图 2.2 GAPDH 熔点曲线图 2 RT-PCR 扩熔点曲线3.7 Western blot 法检测大鼠心肌组织中自噬蛋白表达（1）提取蛋白样品：把心脏组织从-80℃冰箱中取出并在冰上切碎组织

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 牟婕;冯文静;王珊;冯美苹;毛拥军;;自噬调控衰老的研究进展[J];中华老年多器官疾病杂志;2019年01期

2 李黎;季漪;李文婷;马艳霞;李沐涵;吴勉华;;基于细胞自噬的中医药抗肿瘤作用研究进展[J];中华中医药杂志;2019年01期

3 汪艳;;调控自噬在临床肝病治疗性应用的转化研究[J];肝脏;2019年07期

4 韩苏夏;蔡梦娇;;自噬在肿瘤治疗策略中的角色[J];西部医学;2018年09期

5 周岐鸣;刘洋;季光;宋海燕;;调节自噬改善非酒精性脂肪性肝病的药物研究进展[J];中华中医药学刊;2018年10期

6 李晓琼;何玲玲;李新毅;;自噬与中枢神经系统退行性疾病研究进展[J];中风与神经疾病杂志;2018年10期

7 马文科;戴舒惠;罗鹏;杨悦凡;费舟;;线粒体自噬的研究进展[J];现代生物医学进展;2017年06期

8 付婉;董笛;赵颖;;自噬的相关分子机制[J];中国生物化学与分子生物学报;2017年05期

9 方聪聪;毛善平;董慧敏;刘宝辉;王舜;;线粒体自噬与中枢神经系统疾病关系的研究进展[J];卒中与神经疾病;2017年02期

10 李旭卉;吴习习;张凯;罗海霞;李敏;;线粒体自噬与癌症关系的研究进展[J];动物医学进展;2017年09期

相关会议论文 前10条

1 张兴;郑红刚;花宝金;;自噬与肺癌[A];第十七届全国中西医结合肿瘤学术大会摘要集[C];2019年

2 肖伊宁;吕佩源;;选择性自噬的研究进展[A];7th中华医学会神经病学分会全国中青年神经病学学术大会暨第十届全国神经系统感染性疾病与脑脊液细胞学学术大会论文汇编[C];2014年

3 郭云良;;“营养与自噬”浅析[A];第十届全国中西医结合营养学术会议论文资料汇编[C];2019年

4 胡成枫;胡春兰;陈良标;;自噬在斑马鱼细胞冷应激过程中的作用机制探究[A];2017年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2017年

5 肖伊宁;吕佩源;;选择性自噬的研究进展[A];中华医学会第十七次全国神经病学学术会议论文汇编（下）[C];2014年

6 秦正红;粱中琴;陶陆阳;黄强;刘春风;蒋星红;倪宏;邢春根;;自噬在细胞生存与死亡中的作用[A];中国药理学会第九次全国会员代表大会暨全国药理学术会议论文集[C];2007年

7 秦正红;;自噬与肿瘤和神经细胞生存——药物作用的新靶位[A];全国生化与分子药理学药物靶点研讨会论文摘要集[C];2008年

8 余慧芬;唐李;李妍;;自噬现象对肿瘤发生影响的研究进展[A];2017第七届泛环渤海生物化学与分子生物学会学术交流会论文集[C];2017年

9 王菲菲;邱学敏;王凌;;自噬对骨代谢的调节作用[A];第9届中国中西医结合学会妇产科专业委员会第二次学术会议论文集[C];2017年

10 申森森;李林楠;徐林楠;白玉;刘虎威;;基于气相色谱-高分辨质谱的饥饿诱导小鼠胚胎成纤维细胞自噬过程的代谢组学研究[A];第21届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集[C];2017年

相关重要报纸文章 前10条

1 记者 李洁尉　通讯员 周飞;花榈木通过“自噬”杀死癌细胞[N];科学时报;2011年

2 王建新 主持;“自噬”的快车刚刚启动[N];医药经济报;2016年

3 记者 周洁;解密“自噬”，抗癌治病更近一步[N];河北日报;2016年

4 记者 陆琦 见习记者 谷双双;细菌通过诱导线粒体自噬求存活[N];中国科学报;2019年

5 本报记者 房琳琳;“自噬机制”带来对抗衰老新希望[N];科技日报;2016年

6 生命学院;俞立课题组在《科学》发文揭示自噬调控的重要机制[N];新清华;2012年

7 本报实习生 刘如楠 记者 李晨阳;最新研究揭秘植物是怎样衰老的[N];中国科学报;2019年

8 本报首席记者 唐闻佳;上海与新科诺奖得主颇有学术缘[N];文汇报;2016年

9 记者 陶婷婷;成功揭示代谢降解调控新机制[N];上海科技报;2013年

10 记者 白毅;浙大二院发现大气颗粒污染诱导呼吸道自噬性损伤新机制[N];中国医药报;2015年

相关博士学位论文 前10条

1 张海;镉通过抑制自噬流和激活Akt-Beclin1通路诱导神经细胞自噬关联凋亡的机理研究[D];南京师范大学;2019年

2 隋天琪;高尔基体膜蛋白1通过影响自噬调控抗肿瘤免疫应答的机制研究[D];北京协和医学院;2019年

3 赵阳;水痘-带状疱疹病毒（VZV）感染与细胞自噬的相关研究[D];南方医科大学;2019年

4 张华璐;锌转运体Zip7对线粒体自噬的调控作用及分子机制研究[D];天津医科大学;2019年

5 张斌;自噬在高碘诱导SH-SY5Y细胞及大鼠海马组织凋亡中的作用研究[D];天津医科大学;2019年

6 李琦;MST1激活JNK/p53通路抑制线粒体自噬调控直肠癌细胞生长的研究[D];天津医科大学;2019年

7 许悦;沙门氏菌新型效应蛋白揭示细菌自噬通路机制的研究[D];中国农业大学;2019年

8 李芮冰;Sirtuin 3通过调节Bnip3介导的线粒体自噬改善非酒精性脂肪性肝病的机制研究[D];中国人民解放军医学院;2019年

9 闫冬莹;锰诱导的α-synuclein蛋白寡聚体与自噬的相互作用对神经细胞损伤的分子机制研究[D];中国医科大学;2019年

10 高祥;镧对大鼠中枢神经系统神经细胞自噬水平的影响及其相关机制研究[D];中国医科大学;2019年

相关硕士学位论文 前10条

1 张婧婷;JNK促进甲型流感病毒复制的分子机制[D];扬州大学;2019年

2 周钰奇;硒对金黄色葡萄球菌感染的奶牛乳腺上皮细胞自噬影响的研究[D];扬州大学;2019年

3 余鑫;自噬在机械通气致大鼠脑组织神经元凋亡中的作用[D];扬州大学;2019年

4 王婷;自噬或铁死亡协同的光敏抗肿瘤活性研究[D];南京师范大学;2019年

5 陈兴兴;草鱼细胞中活化的STAT3能通过对Bcl-2进行调控进而缓解自噬[D];南昌大学;2019年

6 凌仕诚;内质网应激介导自噬与凋亡缓解高脂诱导黄颡鱼肠道脂肪沉积的研究[D];华中农业大学;2019年

7 冯娅琳;褐飞虱线粒体自噬相关基因的克隆与功能研究[D];中国计量大学;2018年

8 刘诗语;氯化镧诱导的神经元氧化应激对JNK相关信号通路活化状态和自噬相关基因表达水平的影响[D];中国医科大学;2019年

9 周冰倩;自噬在蛋白尿诱导的肾间质纤维化中作用的研究[D];中国医科大学;2019年

10 牛佳媛;七氟醚后处理通过IRE1/JNK/beclin1信号通路调节内质网应激-自噬减轻新生大鼠缺血缺氧性脑损伤[D];中国医科大学;2019年

本文编号：2826949