天然产物中GLP-1调节剂和抑制剂的筛选

发布时间：2020-09-27 18:58

　　 胰高血糖素样肽-1(Glucagon-like Peptide-1,GLP-1)主要由结肠和回肠的L细胞分泌,具有刺激胰岛素分泌,刺激胰岛?细胞增殖等作用,临床上用于二型糖尿病的治疗,其类似物作为治疗药物已上市,但其价格昂贵,用药不便。因此寻找能显著增强GLP-1的小分子调节剂,具有潜在的社会和经济效益。本研究利用前期建立的GLP1R/U2OS细胞系为模型,使用高内涵检测设备,建立了特异性高、快速、灵敏和可视化的体外活性检测方法,对云南省药物研究所提供的三七、七叶莲、八角莲和重楼等共40余种中药的粗提取物和单体化合物进行了活性筛查。首先,对165个不同的样品进行了筛查,包括124个粗提物E1~E124和41个单体化合物C1~C41。经高内涵细胞成像系统的初步筛选,共找到GLP-1调节剂共5个,分别为提取物E95和E99,单体C1、C18和C23;初筛样品除E99的R~2为66%外,其余可达94%以上,证明结果可靠,每个样品的最低起效浓度分别为5.7μg/ml,24μg/ml,11μg/ml,3.9μg/ml和39μg/ml。筛选到抑制剂26个,其中提取物18个,单体6个,平均抑制率在9%~57%,其中E6平均抑制率可达57%。其次,对调节剂进行了复筛,结果表明调节剂E95,E99,C1,C18和C23自身不具有细胞激动活性,但有明显的起效浓度。复筛证明E95、E99和C23为调节剂,最低起效浓度分别为13.03μg/ml、49.37μg/ml和39.06μg/ml;最适浓度分别为22.8μg/ml,197.5μg/ml和39.06μg/ml时,可提高激动剂活性达43.4%,42.53%和31.30%。研究过程中发现提取物相比于单体,具有更好的调节效果。总之,本研究从165个天然产物经本研究建立的细胞筛选模型筛选了5个GLP-1的调节剂,最终确认三个能够显著增加GLP-1活性,为今后进一步研究和开发新的糖尿病药物提供了实践基础。
【学位单位】：昆明理工大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R284
【部分图文】：

GLP-1R的七跨膜结构

GLP-1R信号通路Figure2.ThesignalpathwayofGLP-1R[1]

图 3. 胰高血糖素原基因Figure 3. Glucagon proglycemic gene内源性的 GLP-1 在体内有四种存在形式[23]，如图 4 所示，GLP-1（1-37）和GLP-1(7-37) 在 C 末端具有延伸的甘氨酸残基， GLP-1 （ 1-36 ） NH2和

【参考文献】

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本文编号：2828243