阳和汤影响木瓜蛋白酶诱导的兔膝骨关节炎模型滑膜炎症的实验研究

发布时间：2020-09-27 19:08

　　 目的探讨阳和汤对木瓜蛋白酶诱导的兔膝骨关节炎模型滑膜组织炎症因子的影响,以进一步明确阳和汤治疗骨性关节炎的作用机制。方法将42只4-6月龄健康新西兰兔按照随机数字表法,随机分成空白对照组(9只)和模型组(33只)。空白对照组不造模,其余动物造模,采用关节腔内注射4%木瓜蛋白酶溶液制备膝骨关节炎模型。2周后从空白对照组和模型组各自随机选取3只进行模型鉴定。将造模成功的新西兰大白兔随机分为模型组,阳和汤低剂量组,阳和汤中剂量组,阳和汤高剂量组和阳性对照组,每组各6只。造模成功后开始干预治疗,分别给予阳和汤组低、中、高剂量组的每只兔分别给予3 g/kg·d、6 g/kg·d、12 g/kg·d阳和汤灌胃,阳性对照组的每只兔给予24mg/kg·d西乐葆灌胃。空白对照组与模型组分别给予等量生理盐水灌胃。每日一次,连续灌胃治疗2周。治疗2周后,观察兔膝关节肿胀度,测量膝关节周径及局部皮温,麻醉后取材,膝关节大体观察,取兔膝关节滑膜,常规固定包埋及切片,对切片进行苏木素-伊红染色。Lequesne评分评估动物行为学,酶联免疫吸附法检测血清、关节液中IL-1β、TNF-α、COX-2、PGE2、NO含量,光镜观察各组滑膜组织病理;免疫组化与图像定量分析IL-1β、TNF-α、COX-2、iNOS蛋白表达。结果1.膝关节皮温、关节周径结果:与空白组比较,模型组膝关节皮温升高(P0.05),关节周径明显增大(P0.05);与模型组比较,各治疗组膝关节皮温降低(P0.05),关节周径减小(P0.05);与阳性对照组比较,阳和汤中剂量组局部皮温较低(P0.05),关节周径较小(P0.05)。2.Lequesne评分结果:造模结束后,与空白对照组比较,模型组评分升高(P0.05);与模型组比较,阳和汤中剂量组和阳性对照组Lequesne评分均降低(P0.05);与阳性对照组比较,阳和汤评分较低,但二者无明显差异(P0.05)。3.ELISA检测结果:与空白对照组比较,模型组血清、关节液中IL-1β、TNF-α、COX-2、PGE2、NO含量增加(P0.05);与模型组比较,阳和汤中剂量组和阳性对照组血清、关节液中IL-1β、TNF-α、COX-2、PGE2、NO含量降低(P0.05)。4.HE染色结果:与空白组相比,模型组可见内层滑膜细胞增生显著,细胞排列紊乱,可见较多淋巴细胞浸润和少量的中性粒细胞,血管增生,充血,纤维组织增生;治疗后与模型组比较,各治疗组滑膜增生层数、淋巴细胞中性粒细胞浸润以及血管增生情况有所改善,其中,阳和汤中剂量组和阳性对照组增生明显减少,炎性细胞减少。5.免疫组化结果:与空白对照组比较,模型组滑膜IL-1β、TNF-α、COX-2、iNOS免疫组化表达增加,IOD值升高(P0.05);与模型组比较,阳和汤中剂量组和阳性对照组滑膜IL-1β、TNF-α、COX-2、iNOS免疫组化表达减少,IOD值降低(P0.05)。结论本实验研究发现阳和汤方能减轻兔膝骨关节炎模型关节肿胀,皮温升高等症状,改善兔膝关节功能,并通过抑制COX-2炎症途径和iNOS炎症途径,减少IL-1β、TNF-α、COX-2、PGE2、iNOS的表达,减轻兔膝骨关节炎滑膜炎症状,延缓膝骨关节炎的进展。
【学位单位】：福建中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R285.5
【文章目录】：
缩略词表
中文摘要
Abstract
引言
实验材料
    1 实验动物
    2 实验主要仪器及耗材
    3 实验主要试剂
    4 实验药物及配制
实验方法
    1 骨关节炎模型的建立及模型鉴定
    2 药物干预
    3 一般情况观察与局部皮温、关节周径的测量
    4 动物行为学评分
    5 取材
    6 ELISA检测关节液、血清中IL-1β、TNF-α、COX-2、PGE2、NO浓度
    7 滑膜组织形态学观察
    8 滑膜组织免疫组化检测IL-1β、TNF-α、COX-2、i NOS蛋白表达
    9 统计分析
实验结果
    1 动物基本情况
    2 各组膝关节皮温、关节周径及Lequesne评分
    3 各组关节液中IL-1β、TNF-α、COX-2、PGE2、NO含量
    4 各组血清中IL-1β、TNF-α、COX-2、PGE2、NO含量
    5 滑膜组织形态学观察
    6 免疫组织化学检测各组滑膜IL-1β、TNF-α、COX-2、i NOS表达及IOD值比较
讨论
    1 现代医学对膝骨关节炎的认识
    2 中医学对本病的认识
    3 阳和汤治疗KOA的理论依据
    4 膝骨关节炎模型的建立与评价
    5 指标的选择
    6 阳和汤对KOA动物模型作用机制探讨
结论
不足与展望
参考文献
附录
文献综述
    参考文献
致谢
作者简历

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 刘宇飞;安甜;王春晖;张晓苗;肖金禾;裴晓华;;阳和汤的临床应用现状[J];中华中医药杂志;2018年10期

2 吴志辉;陈施;;加味阳和汤治疗膝骨性关节炎的长期疗效分析[J];中国当代医药;2016年15期

3 应永生;;加味阳和汤对膝骨性关节炎患者血清基质金属蛋白酶-3、9水平的影响及疗效观察[J];中国中医基础医学杂志;2015年06期

4 王一荃;汪悦;;新加阳和汤治疗强直性脊柱炎20例临床观察[J];江苏中医药;2014年02期

5 王影;王文美;曹建雄;;加味阳和汤治疗开放性骨折术后顽固性窦道30例[J];湖南中医杂志;2013年11期

6 马虎山;;阳和汤加味治疗126例胃溃疡的临床治疗[J];大家健康(学术版);2013年16期

7 王芸;;加味阳和汤配合骨盆牵引治疗急性腰椎间盘突出症临床观察[J];中国中医急症;2013年10期

8 王继平;;阳和汤加减治疗雷诺病16例观察[J];中国医药指南;2012年04期

9 王泽军;;阳和汤对于肺心病的疗效与探讨分析[J];大家健康(学术版);2012年19期

10 段裕庭;杨凤云;王丽华;陈岗;;加味阳和汤治疗膝骨性关节炎的远期疗效观察[J];中国中医骨伤科杂志;2011年05期

相关会议论文 前10条

1 杨凤云;段裕庭;王丽华;陈岗;;加味阳和汤治疗膝骨性关节炎的远期疗效观察[A];首届江西省科协学术年会江西省中医药学术发展论坛论文集[C];2010年

2 杨凡方;许斌;江平;周飞红;;阳和汤治疗皮下脂肪肉芽肿病1例[A];2013全国中西医结合皮肤性病学术年会论文汇编[C];2013年

3 刘旭生;王桦;黄春林;杨霓芝;;加味阳和汤对阿霉素肾病综合征的实验研究[A];全国中医药科研与教学改革研讨会论文集[C];2000年

4 莫小勤;李廷冠;潘志欣;;阳和汤在乳腺肿块治疗中的应用[A];第十一届全国中医及中西医结合乳腺病学术会议论文集[C];2009年

5 龚山里;郭福生;;加味阳和汤治疗胸腔积液1例经验[A];中医药学术发展大会论文集[C];2005年

6 程军;李海涛;;阳和汤加味治疗病态窦房结综合征16例临床疗效观察[A];全国张仲景学术思想及医方应用研讨会论文集[C];2001年

7 武光华;;阳和汤治验[A];第四次全国中西医结合中青年学术研讨会论文集[C];2002年

8 张合恩;;阳和汤治疗皮肤病临床体会[A];中华中医药学会皮肤科分会第十一次学术年会论文集[C];2014年

9 毛娟娟;;楼丽华应用阳和汤治疗浆细胞性乳腺炎经验[A];第十一届全国中医及中西医结合乳腺病学术会议论文集[C];2009年

10 孟琳贺;李晓云;王晓军;;加味阳和汤治疗系统性红斑狼疮26例临床观察[A];全国第十一届中西医结合风湿病学术会议论文汇编[C];2013年

相关重要报纸文章 前10条

1 鲍正飞;阳和汤治疗痹证和鼻鼽[N];中国中医药报;2002年

2 牛国莲;阳和汤妇科新用[N];农村医药报（汉）;2008年

3 熊继柏;阳和汤解极度恶寒疲乏案[N];中国中医药报;2014年

4 陈腾飞 北京中医药大学;阳和汤治重症下肢红肿[N];中国中医药报;2015年

5 董飞侠;阳和汤方义发微与临床应用[N];中国中医药报;2004年

6 肖守贵;阳和汤治心动过缓[N];农村医药报（汉）;2007年

7 王勇 江苏省仪征市中医院;阳和汤配合手法治肩周炎[N];中国中医药报;2015年

8 四川省剑阁县中医院 王廷治 胥燕;阳和汤加减治冻疮[N];中国中医药报;2014年

9 成都中医药大学 朱晓冬;阳和汤治痰饮咳喘所悟[N];中国中医药报;2014年

10 吴沛田;古方运用三则[N];中国中医药报;2004年

相关博士学位论文 前4条

1 罗艳;阳和汤加减治疗急性乳腺炎的临床和实验研究[D];浙江中医药大学;2013年

2 冯磊;阳和汤对阳虚证乳腺癌的抑制作用及相关机制的实验研究[D];湖南中医药大学;2018年

3 郑川;基于PHD2/TGF-β/CAF路径的阳和汤干预乳腺癌肺转移研究[D];成都中医药大学;2017年

4 毛丹;乳腺癌骨转移中医证候规律调查及阳和汤干预阳虚证乳腺癌骨转移裸鼠模型的实验研究[D];湖南中医药大学;2014年

相关硕士学位论文 前10条

1 何俊君;阳和汤影响木瓜蛋白酶诱导的兔膝骨关节炎模型滑膜炎症的实验研究[D];福建中医药大学;2019年

2 张欣萌;基于c-Met/NF-κB/CXCL1信号通路研究阳和汤抑制人乳腺癌细胞迁移与侵袭的机制[D];甘肃中医药大学;2018年

3 彭湃;基于EZH2/NF-κB信号通路探讨阳和汤对人三阴性乳腺癌细胞增殖的影响[D];甘肃中医药大学;2018年

4 卢亚品;阳和汤联合化疗治疗脾肾阳虚型中晚期非小细胞肺癌患者的临床研究[D];河南中医药大学;2018年

5 金晗晨;加味阳和汤治疗糖尿病足（阳虚寒凝夹瘀毒证）的临床研究[D];长春中医药大学;2018年

6 吴子健;基于线粒体凋亡通路探讨阳和汤含药血清对SD大鼠软骨细胞凋亡影响的体外实验研究[D];福建中医药大学;2018年

7 杨亦奇;基于CAF诱导EMT探讨阳和汤干预乳腺癌肺转移研究[D];成都中医药大学;2017年

8 杜雨锡;加味阳和汤对急性心肌缺血再灌注损伤抗炎作用研究[D];长春中医药大学;2014年

9 王宝翔;加味阳和汤治疗冠心病心绞痛的临床研究[D];长春中医药大学;2014年

10 杨鸿冉;加味阳和汤对兔膝关节改变及临床疗效观察[D];山东中医药大学;2014年

本文编号：2828254