基于代谢组学方法研究清络饮治疗胶原诱导大鼠关节炎的机制及其与甲氨蝶呤的相互作用
发布时间：2020-09-29 16:50
目的:清络饮(QLY)是治疗类风湿性关节炎热证型的传统中药方剂。本研究旨在进一步验证其对胶原诱导的大鼠关节炎(CIA)的影响和与甲氨蝶呤(MTX)联合使用对类风湿性关节炎的治疗作用,并采用基于超高压液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)分析技术的代谢组学方法尝试阐明相关的作用机制。方法:SD大鼠随机分组后采用牛Ⅱ型胶原造模,不同治疗组CIA大鼠分别接受QLY、甲氨蝶呤(MTX)和QLY+MTX的治疗。分别从形态学、影像观察、组织病理学和血清生物标志物水平分析对给药组CIA大鼠进行综合性评价,大鼠尿液的代谢特征采用超高压液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)的方法采集,并通过一系列多元数据统计分析筛选、获取。结果:实验数据显示QLY明显减轻大鼠CIA严重病情,对关节产生了显著的保护作用,对MTX诱发的毒性产生缓解。代谢组学分析发现,CIA大鼠存在氨基酸、脂肪酸和能量代谢紊乱。各治疗方案均对上述变化产生不同程度的调节作用。核心差异代谢物的分析发现,QLY对CIA大鼠体内的戊糖磷酸途径(PPP)和嘧啶代谢的调控,可能与其体内的免疫调节功能和抗风湿活性有密切关联。结论:根据获得的证据,我们得出了QLY改变磷酸戊糖通路(PPP)和嘧啶代谢,对它们的抑制有助于治疗RA,且QLY对MTX诱发的毒性有缓解作用,因此在临床的联合用药治疗方案设计中需更为缜密。
【学位单位】：皖南医学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R285.5
【部分图文】：
图 1 CIA 大鼠各组体重2 QLY 缓解 MTX 对大鼠的毒性实验期间，所有大鼠药物灌胃后均密切观察。经过多次 MTX 给药后，一大鼠表现出胃肠反应，如呕吐、腹泻和消化不良。治疗后期，大多数大鼠出现血征兆，如活动减少，耳廓色苍白，疲劳；MTX+QLY 组无异常反应。虽然各大鼠的组织学检查均未发现肝脏存在明显损伤,但在 MTX 治疗下血清中 ALT 水显著增高，而 AST 没有变化（图 2A）。血液指标检测表明，MTX 引起大鼠血红蛋白（HGB）和红细胞（RBC）少，联合应用 QLY 部分恢复了异常变化（图 2B）。观察同时发现，MTX QLY 对血小板水平（PLT）有类似的作用。这些数据证实了 MTX 的肝毒性和液学毒性[13]，并提示 QLY 对 MTX 引起的肝损伤和骨髓抑制具有保护作用。
17注：P*㩳0.05 和 P**㩳0.01，与 CIA 组比较存在有显著和极为显著的统计学差异。图 2 QLY 缓解 MTX 引起的大鼠肝损伤和骨髓抑制：A，血清中丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬酸转氨酶（AST）浓度；B，全血中血红蛋白（HGB）和红细胞（RBC）水平3 CIA 大鼠足踝关节形态学观察第一次诱导造模后 12 天，大鼠的后足出现明显肿胀（图 3b），与此同时关节炎评分显著增加（图 3a）。第 24 天开始，局部炎症逐渐缓解，但关节严变形(图 4），大鼠运动受限。在整个实验周期中，MTX 对 CIA 大鼠产生持续效的治疗效果，主要表现为炎症反应减轻和关节炎指数的评分降低。综合来看QLY 的疗效与 MTX 相似。在减轻 CIA 大鼠足爪肿胀程度上联合用药组表现好。
大鼠CIA总体发展趋势
本文编号：2829995
【学位单位】：皖南医学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R285.5
【部分图文】：
图 1 CIA 大鼠各组体重2 QLY 缓解 MTX 对大鼠的毒性实验期间，所有大鼠药物灌胃后均密切观察。经过多次 MTX 给药后，一大鼠表现出胃肠反应，如呕吐、腹泻和消化不良。治疗后期，大多数大鼠出现血征兆，如活动减少，耳廓色苍白，疲劳；MTX+QLY 组无异常反应。虽然各大鼠的组织学检查均未发现肝脏存在明显损伤,但在 MTX 治疗下血清中 ALT 水显著增高，而 AST 没有变化（图 2A）。血液指标检测表明，MTX 引起大鼠血红蛋白（HGB）和红细胞（RBC）少，联合应用 QLY 部分恢复了异常变化（图 2B）。观察同时发现，MTX QLY 对血小板水平（PLT）有类似的作用。这些数据证实了 MTX 的肝毒性和液学毒性[13]，并提示 QLY 对 MTX 引起的肝损伤和骨髓抑制具有保护作用。
17注：P*㩳0.05 和 P**㩳0.01，与 CIA 组比较存在有显著和极为显著的统计学差异。图 2 QLY 缓解 MTX 引起的大鼠肝损伤和骨髓抑制：A，血清中丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬酸转氨酶（AST）浓度；B，全血中血红蛋白（HGB）和红细胞（RBC）水平3 CIA 大鼠足踝关节形态学观察第一次诱导造模后 12 天，大鼠的后足出现明显肿胀（图 3b），与此同时关节炎评分显著增加（图 3a）。第 24 天开始，局部炎症逐渐缓解，但关节严变形(图 4），大鼠运动受限。在整个实验周期中，MTX 对 CIA 大鼠产生持续效的治疗效果，主要表现为炎症反应减轻和关节炎指数的评分降低。综合来看QLY 的疗效与 MTX 相似。在减轻 CIA 大鼠足爪肿胀程度上联合用药组表现好。
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【参考文献】
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本文编号：2829995
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