当前位置:主页 > 医学论文 > 中药论文 >

红芪复方对肝损伤防治作用的筛方、拆方研究和HPLC图谱定性分析

发布时间:2020-10-10 03:25
   红芪(Radix Hedysari)也称为独根,为豆科植物多序岩黄芪Hedysarum polybotrys Hand.-Mazz.的干燥根,是甘肃道地药材。经多年研究发现,红芪具有提高免疫、抗肿瘤、抗氧化和抗肝纤维化等多种多样的生物学活性。此外,实验室前期研究表明红芪防治CCl_4诱导小鼠肝损伤疗效显著。目前,国内外大多是对中药单体化合物、单味药或单个复方进行防治肝损伤的研究,但是将多个复方同时进行筛选比较研究较少,并且对多个以红芪为主药的复方筛方研究及拆方研究尚属空白。本论文开展的具体内容如下:第一部分:筛选防治肝损伤的红芪复方。皮下注射四氯化碳(CCl_4)-花生油致小鼠肝损伤,分别给予4个红芪复方(20 g原药材·kg~(-1),每日1次)灌胃,7周后测定血清中谷丙转氨酶(ALT)活性、谷草转氨酶(AST)活性;测定肝组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量;采用苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化。结果显示,CCl_4所致小鼠肝损伤效果明显;4个红芪复方对CCl_4所致小鼠肝损伤药效显著,但药效活性存在差异,其中红芪复方三的效果最佳。第二部分:对筛选出的红芪复方三通过撤药拆方的方法进行精简方剂的拆方研究。从红芪中药复方君、臣、佐、使配伍关系出发,以君药红芪为核心,通过撤药拆方的方法,将其它四味中药各去掉一味作为四个拆方组。通过CCl_4-花生油皮下注射致小鼠肝损伤,同时给予红芪复方三全方及四个红芪复方拆方(20 g原药材·kg~(-1),每日1次)灌胃,7周后测定血清中谷丙转氨酶(ALT)活性、谷草转氨酶(AST)活性、及白球蛋白比值(A/G);测定肝组织匀浆中总超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量;采用苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化。结果表明,CCl_4所致小鼠肝损伤效果明显;红芪复方三全方和四个红芪复方拆方对CCl_4所致小鼠肝损伤药效显著,但药效活性存在差异,其中红芪复方拆方一效果最佳。第三部分:建立了HPLC-DAD法分析红芪复方三全方和各拆方化学成分的分析方法。对红芪复方三全方和各拆方的主要色谱峰进行峰归属和HPLC图谱成分差异比较。色谱柱为Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%乙酸水溶液,梯度洗脱,检测波长330 nm,柱温30℃。结果显示,用HPLC-DAD技术能够对红芪复方三全方和各拆方通过峰归属进行定性鉴别和成分差异的比较。
【学位单位】:兰州大学
【学位级别】:硕士
【学位年份】:2019
【中图分类】:R285.5;R284.1
【部分图文】:

病理切片,HE染色,红芪,肝损伤


阳性对照组 0.1 220.39±41.892.43±0.73红芪复方一组 20.0 269.11±43.41㥮,△1.80±0.95㥮红芪复方二组 20.0 242.18±48.11㥮2.08±1.08㥮红芪复方三组 20.0 203.06±41.15㥮2.21±0.73㥮红芪复方四组 20.0 206.00±35.30㥮2.39±0.55㥮注:与空白组比较*P<0.05;与模型组比较㥮P<0.05;与阳性对照组比较△P<0.052.4.5 对 CCl4诱导的肝损伤小鼠肝组织病理变化的影响各组小鼠肝组织经切片、HE 染色后显微镜下观察,空白组小鼠肝组织清晰,肝小叶结构完整,肝细胞排列规则呈放射状,汇管区清楚。CCl4模型组小鼠肝细胞空泡样变,水肿严重,脂肪变性,排列不规整,可见少量灶状坏死,是典型的肝损伤病理特征,说明 CCl4造模成功。与模型组比较,阳性对照组和各红芪复方组病理性损伤如细胞肿胀范围、脂肪变性程度、肝组织坏死区域等均得到不同程度改善。见图 2-1。

病理切片,HE染色,红芪,拆方


红芪复方三全方组 20 265.54±22.97㥮1.77±0.22㥮红芪复方拆方一组 20 250.26±24.01㥮1.04±0.28㥮,△,▲红芪复方拆方二组 20 263.21±23.55㥮1.47±0.38㥮红芪复方拆方三组 20 250.96±12.07㥮1.30±0.51㥮,△,▲红芪复方拆方四组 20 248.29±31.81㥮1.49±0.42㥮注:与空白组比较*P<0.05;与模型组比较㥮P<0.05;与阳性对照组比较△P<0.05;与红芪复方三全方组比较▲P<0.053.4.5 对 CCl4诱导肝损伤小鼠肝组织病理变化的影响各组小鼠肝组织经切片、HE 染色后显微镜下观察发现,空白组小鼠肝组织清晰,肝小叶结构完整,肝细胞排列规则呈放射状,汇管区清楚。CCl4模型组小鼠肝细胞空泡样变,排列不规整,水肿严重,脂肪变性,可见小灶状炎性细胞浸润,是典型的肝损伤病理特征,说明 CCl4造模成功。与模型组比较,阳性对照组、红芪复方三全方组和各拆方组病理性损伤如肝组织坏死区域,细胞肿胀、脂肪变性等均有不同程度减轻,以红芪复方拆方一组损伤程度最低。见图 3-1。

HPLC图谱,红芪,茵陈


图 4-1 红芪复方三全方与红芪的 HPLC 图谱图 4-2 红芪复方三全方与茵陈的 HPLC 图谱1245678111221ⅡⅡ绿原酸红芪复方三全方茵陈t /

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 李越峰;辛二旦;边甜甜;张爱霞;司昕蕾;严兴科;;红芪研究新进展[J];中兽医医药杂志;2018年06期

2 马令法;;留茎高度对红芪产量和土壤水分的影响[J];安徽农业科学;2012年13期

3 马令法;;留茎高度对红芪产量和品质的影响[J];安徽农业科学;2012年14期

4 王锐;陈耀祖;;红芪中氨基酸定量分析[J];西北药学杂志;1987年02期

5 董文芳 ,刘家骏;红芪对家兔心脏及血压影响的初步研究[J];甘肃中医学院学报;1988年04期

6 王锐 ,陈耀祖;红芪化学成分分析研究(Ⅰ)[J];兰州大学学报;1988年03期

7 张润高,黄志戎;红芪C物质在抗C反应蛋白制备中的应用研究[J];临床检验杂志;1988年04期

8 毛小娟;王军志;王凤连;;黄芪和红芪的免疫药理研究进展[J];兰州医学院学报;1988年01期

9 杨青;;提高红芪质量的措施[J];甘肃农业科技;1988年01期

10 陶文若 ,郭解宁 ,李军;红芪多糖复合物对动物心脏的影响[J];甘肃中医学院学报;1989年04期

相关会议论文 前5条

1 程芳;;甘肃不同产地红芪中多糖的含量测定[A];甘肃省中医药学会2017年学术年会论文集[C];2017年

2 赵象禄;廖天录;陈洁;尚琼;赵国虎;邹世强;;甘肃省定西岷县红芪挥发油成分的分析[A];甘肃省化学会第二十七届年会暨第九届甘肃省中学化学教学经验交流会论文摘要集[C];2011年

3 冯旭;陈志珍;;陇南红芪饮片三A分级标准及应用[A];2014年甘肃省中医药学会学术年会论文集[C];2014年

4 李应东;邸美仙;舒畅;万生芳;刘凯;俞华;;当归、红芪及其合剂超滤膜提取物对急性心肌缺血大鼠心肌毛细血管密度的影响[A];第八届全国中西医结合实验医学研讨会论文汇编[C];2006年

5 胡建成;王裕;;红芪总皂甙对小鼠胸腺细胞凋亡的抑制作用[A];加入WTO和中国科技与可持续发展——挑战与机遇、责任和对策(下册)[C];2002年

相关重要报纸文章 前8条

1 三木;秋冬进补话红芪[N];北京科技报;2003年

2 李廷贤;武都区红芪牛产业将成为新支柱产业[N];中国畜牧兽医报;2008年

3 苟保平 卢吉平;当归红芪开财路旅游观光增收入[N];甘肃日报;2004年

4 北京中医药学会中药资源及鉴定专业委员会秘书长 李京生;红芪和黄芪不是一个药[N];中国医药报;2013年

5 陆芸波;黄芪红芪是一种药吗[N];医药养生保健报;2008年

6 李长青;观念更新奔小康[N];陇南日报;2008年

7 本报记者 魏晓林 通讯员 丁晓刚;塞上大棚春意盎然[N];农民日报;2002年

8 王兴荣;“得林”牌系列中药飘洋过海[N];甘肃经济日报;2000年

相关博士学位论文 前6条

1 李应东;当归、红芪及其合剂超滤膜提取物促缺血心肌血管新生的实验研究[D];南京中医药大学;2005年

2 王靖思;从桃红芪术软肝煎抗肝纤维化探讨孙桂芝教授防治肝癌经验内涵[D];中国中医科学院;2015年

3 马燕花;当归红芪超滤膜提取物对过氧化氢诱导心肌细胞氧化损伤的保护作用[D];兰州大学;2010年

4 寇炜;当归红芪超滤物对~(12)C~(6+)束辐射肝癌细胞的增敏作用及其机制的研究[D];兰州大学;2015年

5 刘学周;坡缕石和氮磷钾对红芪养分吸收的影响[D];甘肃农业大学;2009年

6 张李峰;红芪和黄芪的免疫调节作用及抗免疫老化机制比较研究[D];兰州大学;2012年

相关硕士学位论文 前10条

1 张文君;红芪替换复芪止汗方中黄芪对SAMP8鼠脾淋巴细胞免疫功能影响的比较研究[D];兰州大学;2016年

2 杨亚飞;红芪复方对肝损伤防治作用的筛方、拆方研究和HPLC图谱定性分析[D];兰州大学;2019年

3 陈心悦;红芪谱—效相关性及红芪多糖防治肝纤维化性骨丢失的探讨[D];兰州大学;2016年

4 薛志远;红芪和黄芪抗骨质疏松、抗氧化及抗肝损伤作用比较研究[D];兰州大学;2018年

5 陈宇;红芪活性组分抗骨质疏松作用谱效关系研究[D];兰州大学;2018年

6 王燕;甘肃地产药材红芪的质量评价研究[D];甘肃中医药大学(原名:甘肃中医学院);2015年

7 李俊岳;甘肃道地药材红芪活性成分积累规律研究[D];甘肃中医药大学;2017年

8 梁晓海;红芪水提物肺灌洗对兔肺炎链球菌肺炎的动脉血气的影响[D];广州中医药大学;2008年

9 叶迎;甘肃红芪和黄芪体内外主要活性成分对比研究[D];中国中医科学院;2017年

10 徐建军;新疆红芪化学成分研究[D];新疆医科大学;2005年



本文编号:2834651

资料下载
论文发表

本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zhongyaolw/2834651.html


Copyright(c)文论论文网All Rights Reserved | 网站地图 |

版权申明:资料由用户86375***提供,本站仅收录摘要或目录,作者需要删除请E-mail邮箱bigeng88@qq.com