虎杖苷对脑缺血再灌注损伤大鼠海马区Caspase-8、FLIP蛋白表达的影响

发布时间：2020-10-14 04:48

　　目的:观察虎杖苷对大鼠脑缺血/再灌注损伤(Cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI)后神经功能缺损评分和神经细胞凋亡的影响;脑缺血/再灌注损伤后Caspase-8(半胱天冬酶-8)、FLIP(Flice抑制蛋白)蛋白表达的变化,以及虎杖苷对其表达的影响,探究虎杖苷对脑缺血/再灌注损伤的保护机制。方法:选用SPF级健康雄性SD大鼠96只,按随机数字表分成3组即:假手术组、模型组、虎杖苷组。大鼠于造模前7天开始给药,假手术组和模型组每天给予生理盐水10mL/(kg.d),虎杖苷模型组每天给予虎杖苷15mg/(kg.d),均每日灌胃1次。采用线栓法建立大脑中动脉闭塞局灶性脑缺血模型,于缺血后2h恢复再灌注,造模完成后每日给药,分别于6h、72h处死动物,采用Longa法进行神经功能缺损评分;采用TUNEL法观测大鼠海马区神经细胞凋亡;免疫组化染色法分析大鼠海马区Caspase-8、FLIP蛋白的平均灰度值;RT-PCR法观测大鼠海马区Caspase-8、FLIP蛋白mRNA的表达。采用SPSS17.0软件进行统计学处理。结果:1.假手术组无神经功能缺损,模型组和虎杖苷组均有不同程度神经功能缺损症状,两组6h、72h两个时间点比较无统计学意义(P0.05);与假手术组比较,模型组各时间点神经缺损症状明显,差异有统计学意义(P0.05);与模型组比较,虎杖苷组各时间点神经缺损症状减轻,差异有统计学意义(P0.05)。2.假手术组未见明显凋亡细胞,模型组和虎杖苷组6h、72h海马区及可以观察到凋亡细胞;与假手术组比较,模型组各时间凋亡细胞增加(P0.01);与模型组比较,虎杖苷表达明显低于模型组,两组间比较有统计学意义(P0.05);其中两组72h凋亡细胞较6h表达量增高,两个时间点两组间比较,差异有统计学意义(P0.05)。3.假手术组未见明显Caspase-8蛋白及mRNA表达,模型组、虎杖苷组6h、72hCaspase-8蛋白及mRNA表达均增高;与假手术组比较,模型组各时间点表达明显增加,差异有统计学意义(P0.01);与模型组比较,虎杖苷组Caspase-8表达低于模型组,两组组间比较有统计学差异(P0.05);模型组72h较6h表达明显增加,两个时间点两组间比较,差异有统计学意义(P0.01),虎杖苷组72h较6h比较变化不明显,差异无统计学意义(P0.05)。4.假手术组未见明显FLIP蛋白及mRNA表达,模型组、虎杖苷组6h、72hFLIP蛋白及mRNA表达均增高,与假手术组比较,模型组各时间点FLIP表达增加,差异有统计学意义(P0.05);虎杖苷组FLIP表达高于模型组,两组组间比较有统计学差异(P0.05);其中两组72h较6h表达增加,两个时间点两组间比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论:1.大鼠脑缺血/再灌注损伤后,Caspase-8、FLIP蛋白的表达均高于对照组;2.虎杖苷对脑缺血/再灌损伤的保护机制可能通过下调Caspase-8的同时,促进FLIP的表达,从而减少脑缺血/再灌注损伤后神经细胞凋亡,减轻脑组织损伤。
【学位单位】：湖南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2017
【中图分类】：R285.5
【部分图文】：