补中益气丸对IEC-6细胞损伤模型NLRP3炎性体及相关细胞因子的影响

发布时间：2020-10-18 08:07

　　 目的:探讨补中益气丸含药血清对炎症刺激引起的大鼠小肠隐窝上皮细胞(ICE-6)损伤模型中NOD样受体-3(NLRP3)炎性体复合物及相关细胞因子的影响。方法:根据中药复方血清药理学实验方法,以IEC-6细胞为研究对象,设立胎牛血清组、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)组、空白组、模型组,补中益气丸组、柳氮磺吡啶组。先用10%2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)大鼠模型血清或者TNF-α(质量浓度100μg·L~(-1))刺激IEC-6细胞24 h,然后加入10%药物血清继续培养24 h后,采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)方法检测IEC-6细胞活率;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)测定NLRP3炎性体的相关蛋白表达量,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)的含量。结果:与空白组比较,TNF-α组及模型组均可引起IEC-6细胞增殖率显著下降(P0.01),细胞内NLRP3炎性体的相关蛋白表达显著增高(P0.01),细胞因子IL-1β,IL-18含量显著增高(P0.01);与模型组比较,各给药组细胞增殖率显著增加(P0.01),NLRP3炎性体复合物蛋白表达明显降低(P0.05,P0.01),IL-1β,IL-18分泌显著降低(P0.01)。结论:补中益气丸含药血清可通过调节肠上皮细胞NLRP3炎性体复合物蛋白及细胞因子分泌,减轻炎症刺激引起的肠上皮细胞损伤。
【文章目录】：
1 材料
    1.1 动物及细胞株
    1.2 药物及试剂
    1.3 仪器
2 方法
    2.1 制备血清[5]
    2.2 CCK-8比色法测定细胞增殖
    2.3 细胞分组培养
    2.4 ELISA测定相关细胞因子
    2.5 蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测NLRP3炎性体相关蛋白的表达
    2.6 统计学分析
3 结果
    3.1 对IEC6损伤模型细胞增殖率的影响
    3.2 对IEC6损伤模型细胞中NLRP3炎性体蛋白表达的影响
    3.3 对IEC损伤细胞模型分泌细胞因子的影响
4 讨论

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本文编号：2846042