肾脑复元汤对MCAO再灌注大鼠HPA轴功能的影响

发布时间：2020-10-30 06:03

　　 目的:观察肾脑复元汤对大脑中动脉栓塞(Middle cerebral artery occlusion,MCAO)再灌注大鼠HPA轴功能表达的影响,研究肾脑复元汤补肾护脑法的生物学基础,并为中医药“肾脑同治”理论指导治疗神经系统疾病提供实验依据。方法:无特定病原体(specific pathogen Free,SPF)级SD大鼠120只,运用随机数字表法将大鼠分为空白组30只,假手术组30只,MCAO模型制备组60只。空白组与假手术组按处死时间分为3d、7d、14d,3个时相组,每组10只。模型制备组用改良LongaEZ等的线栓法建立大脑中动脉闭塞局灶性脑缺血模型,于缺血2h后进行再灌注,清醒2小时后神经功能评分为1~3分者评定为造模成功。假手术组处理为单纯手术而不插线。待模型造模完成后,将造模成功后的大鼠按随机数字表法分为2大组,即模型组、肾脑复元汤组后,再按处死时间分为缺血再灌注后3d、7d、14d,3个时相组,每个组每个时相保证造模成功6只动物。造模后第2天开始药物干预,肾脑复元汤组予肾脑复元汤灌胃,液体量为每次10ml/kg大鼠。空白组、模型组和假手术组灌胃等体积的蒸馏水,各组均在每天各灌胃2次,直到处死。干预结束后,应用酶联免疫吸附法检测血清CRH、CORT含量;HE染色观察脑、肾上腺组织病理学变化;免疫组织化学方法检测海马区GR表达;qPCR法检测下丘脑室旁核CRH mRNA的表达。结果:(1)神经功能评分:假手术组m-NSS评分与空白组比较无显著升高(p0.05),差异无统计学意义;模型组和中药组的m-NSS评分显著高于空白组(p0.05)。与模型组比较,相同时间点,中药组评分低于模型组(p0.05或p0.01),差异有统计学意义。(2)HE染色观察脑及肾上腺组织病理学变化:与模型组比较,中药组缺血侧脑皮质神经细胞形态破坏轻,神经细胞可见少许空泡样改变,排列尚整齐,残存神经元数量较多,周围间质损伤较轻,皮质神经元和神经胶质细胞的分布大致正常;与模型组比较,中药组肾上腺皮质结构基本正常,细胞排列尚整齐,细胞内可见少许空泡样改变,细胞核、胞浆肿胀及周围间质坏死均较模型组轻。(3)免疫组织化学方法检测大鼠海马区GR表达:与空白组相比,假手术组海马GR表达无明显下降(p0.05),差异无统计学意义;模型组和中药组海马GR表达低于空白组(p0.05)。与模型组相比,相同时间点,中药组海马GR表达高于模型组(p0.05或p0.01),差异有统计学意义。(4)ELISA法检测大鼠血清CORT、CRH含量:与空白组相比,假手术组大鼠血清CORT、CRH水平无明显升高(p0.05),差异无统计学意义;模型组和中药组血清CORT、CRH水平显著高于空白组(p0.05)。与模型组相比,相同时间点,中药组外周血清CORT、CRH含量低于模型组(p0.05或p0.01),差异有统计学意义。(5)qPCR法检测大鼠下丘脑PVN区CRHmRNA的表达:与空白组相比,假手术组大鼠PVN区CRHmRNA水平无明显升高(p0.05),差异无统计学意义;模型组和中药组PVN区CRHmRNA水平显著高于空白组(p0.05)。与模型组相比,相同时间点,中药组PVN区CRHmRNA低于模型组(p0.05或p0.01),差异有统计学意义。结论:1.脑缺血再灌注损伤时大鼠HPA轴持续激活,CORT水平增高且与脑及肾上腺组织病理损害程度呈正相关。2.肾脑复元汤通过下调脑缺血再灌注后大鼠CRH、CORT的表达,上调海马GR水平,可以有效调控HPA轴的紊乱,改善缺血再灌注损伤大鼠神经功能缺损症状,促进病理修复,发挥了有效地治疗作用。
【学位单位】：湖南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R285.5
【部分图文】：

各组大鼠脑组织病理学变化（200×）

各组大鼠肾上腺组织病理学变化（400×）

图 3 各组大鼠海马区 GR 表达（200×）相比，假手术组海马 GR 表达无明显下降（p＞0.05）；模型组和中 表达低于空白组（p＜0.05），说明脑缺血再灌注后海马 GR 表达下
【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 罗莉丽;;萎胃复元汤对慢性萎缩性胃炎的治疗效果分析[J];大家健康(学术版);2016年07期

2 刘显杰;;萎胃复元汤治疗慢性萎缩性胃炎临床研究[J];中医临床研究;2014年33期

3 范育炬;;萎胃复元汤治疗慢性萎缩性胃炎患者临床分析[J];中医临床研究;2015年22期

4 陈枫刚;;慢性萎缩性胃炎通过萎胃复元汤治疗的效果分析[J];现代养生;2016年20期

5 贾志山;;偏瘫复元汤治疗脑梗死50例[J];河南中医;2011年08期

6 石向荣;;萎胃复元汤治疗慢性萎缩性胃炎临床疗效分析[J];中国卫生产业;2011年22期

7 吴彬;辛淼;田振宇;;消栓复元汤治疗脑血栓临床研究[J];河南中医学院学报;2008年03期

8 赵建春;徐萍;宋亚光;;巢衰复元汤治疗卵巢早衰38例临床观察[J];北京中医药大学学报(中医临床版);2006年06期

9 牛红,李岩;“丙肝复元汤”治疗输血后丙肝[J];江苏中医;1999年03期

10 杨旭敏;腰腿复元汤治疗腰椎间盘突出症108例[J];实用中医药杂志;1996年01期

相关博士学位论文 前1条

1 延卫东;萎胃复元汤治疗慢性萎缩性胃炎临床研究[D];广州中医药大学;2006年

相关硕士学位论文 前10条

1 李昕;基于细胞焦亡机制探讨肾脑复元汤对缺糖缺氧PC12细胞的保护作用[D];湖南中医药大学;2019年

2 张田田;肾脑复元汤对MCAO再灌注大鼠HPA轴功能的影响[D];湖南中医药大学;2019年

3 商燕;肾脑复元汤对缺血再灌大鼠脑血管新生的作用及整合素α5β1表达的影响[D];湖南中医药大学;2019年

4 周黔香;自拟益气复元汤对溃疡性结肠炎大鼠Th1/Th2细胞平衡的影响[D];南方医科大学;2018年

5 刘莹莹;肾脑复元汤治疗椎—基底动脉供血不足性眩晕肾虚血瘀证的临床研究[D];湖南中医药大学;2014年

6 赵传山;骨伤复元汤在胫腓骨开放性骨折骨愈合过程中的疗效观察[D];山东中医药大学;2016年

7 秦伟夫;乌鳢复元汤促进术后大鼠切口愈合的实验研究[D];湖南中医药大学;2007年

8 岳飞翔;小腿开放性骨折游离骨块回植术后口服骨伤复元汤的临床疗效观察[D];福建中医药大学;2016年

9 王晚霞;益气复元汤对气虚血瘀证的临床干预研究[D];重庆医科大学;2008年

10 李传明;复元汤配合结肠灌肠治疗慢性肾衰竭的疗效观察及对血磷的影响[D];黑龙江中医药大学;2014年

本文编号：2862100