黑参、黑蒜及其混合物对肝癌HepG-2细胞凋亡作用的影响

发布时间：2020-10-30 17:50

　　 目的 探讨黑参、黑蒜及其混合物提取物对人肝癌HepG-2细胞的凋亡作用及其机制。方法 培养肝癌HepG-2细胞48h,实验分为对照组、黑参组、黑蒜组和黑参黑蒜混合组,各因素作用48h后用MTT方法筛选黑参、黑蒜及混合物作用于肝癌细胞的最佳浓度;用倒置显微镜观察细胞的形态学变化;用流式细胞仪检测细胞的凋亡率以及细胞周期的变化;用Western Blot方法检测细胞内凋亡相关蛋白 Caspase-3、Bcl-2、Bax 的表达情况。结果 1.MTT检测结果发现黑参浓度7.5～15g/L时,细胞抑制率80%左右,黑蒜浓度为10～15g/L时,细胞抑制率80%以上,黑参黑蒜混合浓度为30g/L(黑参:黑蒜=1:2)时,细胞抑制率达到85.26%,与对照组比较,各组细胞生长抑制率有显著差异(P0.05);2.细胞形态学观察发现黑参、黑蒜及其混合物干预细胞肿胀变圆、边界不清,细胞漂浮较多;3.流式细胞仪凋亡率检测结果发现黑参、黑蒜及其混合物作用于肝癌细胞可以增加细胞的早期和中晚期凋亡率(P0.05);4.细胞周期检测结果发现黑参干预后阻滞细胞在G1期,黑蒜及混合物作用发现细胞G1期和G2期阻滞。5.Western Blot检测结果发现,黑参、黑蒜及其混合物干预HepG-2细胞可以使细胞的Caspase-3蛋白过表达,与对照组比较各组蛋白表达有显著差异(P0.05),此外,与对照组比较,黑参、黑蒜高剂量组及混合作用组可以提高Bax/Bcl-2,差异有统计学意义(P0.05),其他组无显著性差异(P0.05)。结论 黑参、黑蒜单独作用组及混合组肝癌HepG-2细胞增殖受到显著抑制;单独作用的细胞早期凋亡率增加,混合作用细胞早期及晚期凋亡率均有增加;单独及混合作用细胞主要阻滞在G1期,细胞Caspase-3蛋白、Bax/Bcl-2表达上调,凋亡作用增加。
【学位单位】：延边大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R285.5
【部分图文】：

注：与对照组比较，＊Ｐ＜０．０５。??４．２黑参、黑蒜其及混合物干预肝癌ＨｅｐＧ－２细胞的形态学观察??２００倍倒置显微镜进行形态学观察，由图３可知，正常人肝癌细胞ＨｅｐＧ－２??为梭形或不规则三角形，若镜下出现细胞变圆、镜下观察颜色变深，边缘皱缩者??为状态不好细胞或死细胞。结果可以看出，对照组人肝癌细胞ＨｅｐＧ－２经过４８ｈ??培养，发现有较少的细胞漂浮或死亡，细胞生长状态良好；黑参、黑蒜提取物对??ＨｅｐＧ－２细胞进行千预４８ｈ后，发现黑参组细胞变圆皱缩，细胞有的漂浮或死亡，??生长状态不好，黑蒜组细胞也有漂浮，较黑参组少，黑参、黑蒜混合组有的细胞??壁出现破裂，细胞颜色较深，皱缩呈圆形，细胞生长状态不好。当黑参浓度为??７．５ｇ／Ｌ、１０ｇ／Ｌ时，黑蒜浓度为１０ｇ／Ｌ、１２＿５ｇ／Ｌ时，黑参、黑蒜混合作用浓度Ｍ：??３０ｇ／Ｌ?（黑参：黑蒜＝１：?２）

注:人:

由表７结果可知，黑蒜千预肝癌细胞ＨｅｐＧ－２，主要增加细胞的早期凋亡率??及中晚期凋亡率，主要增加的是早期凋亡率（Ｐ＜〇．〇５），细胞总凋亡率９０％以??上。由图５结果可知黑蒜干预ＨｅｐＧ－２肝癌细胞，与对照组比较，蒜液１０?ｇ／Ｌ干??预肝癌细胞早期凋亡率由６．３％变为７９．８°／。，中晚期凋亡率由０．５％变为１５．９％，??主要增加了细胞的早期凋亡率，参液１２．５?ｇ／Ｌ时，早期凋亡率变为８７．８％，中晚??期凋亡率为２．３％，与黑蒜低剂量组比较，黑蒜高剂量组肝癌细胞的早期凋亡率??明显增加，中晚期凋亡率略有下降。与黑参组比较，黑蒜组干预细胞的早期凋亡??率不如黑参组。??表７黑蒜对人肝癌细胞ＨｅｐＧ－２的凋亡率影响（；±ｓ，ｎ＝３）??组别（ｇ／Ｌ）?早期凋亡率（％）?晚期凋亡率（％）?总凋亡率（％）??对照组?０?３．３３±０．８０?０．３３±０．１５?３．６３±０．７６??黑蒜组?１０?７９．２０±０．６０＊?１５．５±０．４０＊?９４．７０±１．００＊??黑蒜组丨?２．５?８８．１５±０．３５，?２．２０±０．１０，?９０．３５±０．４１＇??注：与对照组比较
【参考文献】

相关期刊论文 前1条

1 金头峰;全贞玉;;2000年与2010年延吉市居民恶性肿瘤死因比较分析[J];现代预防医学;2015年19期

本文编号：2862809