目的:对黄芪茎叶及其根部所含的黄酮、皂苷、多糖、氨基酸、微量元素等成分进行含量测定,并对其黄酮、皂苷类成分进行分离鉴定,围绕黄芪茎叶与根部所含主要化学成分的种类和含量进行对比分析,判断两者之间的差异,为黄芪茎叶作为独立药用部位提供基础的依据;观察黄芪茎叶及其根部水提物对糖尿病大鼠血糖、胸腺、胰腺以及空间记忆的影响,探索黄芪茎叶及其根部药理作用侧重点的异同;同时建立黄芪茎叶质量标准(草案),为黄芪茎叶生产、经营和临床应用提供质量控制依据。方法:应用UPLC-Q-Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用技术对黄芪茎叶中所含的主要化学成分,黄酮、皂苷类成分进行分离与鉴定,并与黄芪根进行比较分析;在上述定性鉴别的基础上,通过UPLC色谱法对黄芪茎叶中含量较大的黄酮和皂苷类成分进行含量测定,并与黄芪根进行比较分析,同时应用可见-紫外分光光度法对黄芪茎叶中皂苷类成分总的含量,即总皂苷进行含量测定,并与黄芪根进行比较分析;最后,对黄芪茎叶中其他的有效成分进行研究,即采用苯酚-硫酸法测定黄芪茎叶中多糖的含量,采用氨基酸分析仪测定黄芪茎叶中水解氨基酸的含量,采用ICPE-9000型等离子发射光谱仪半定量测定黄芪茎叶中微量元素,并与黄芪根进行比较分析。在药效学方面,通过研究黄芪茎叶水提物对链脲佐菌素致糖尿病大鼠的血糖、胸腺、胰腺以及空间记忆的影响,探究黄芪茎叶的药理作用。结果:黄芪茎叶及其根中黄酮、皂苷类成分定性鉴定结果,最终在黄芪茎叶中共鉴定了17种化合物,黄芪根中共鉴定了18种化合物,黄芪茎叶特有的黄酮类成分为金丝桃苷、异槲皮苷、异鼠李素-3-O-新橙皮苷、黄芪苷、异鼠李素,未检出皂苷类成分;黄芪根部特有的黄酮类成分为山奈素,皂苷类成分为黄芪皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、V;分别对四批黄芪茎叶及其根进行含量测定,黄酮类成分含量测定结果,黄芪茎叶与黄芪根相比较,两者均含有毛蕊异黄酮葡萄糖苷,含量范围分别为0.146~0.694 mg/g、0.534~0.712 mg/g,黄芪茎叶中含量较高的成分还有异鼠李素-3-O-新橙皮苷,含量范围为0.206~0.714 mg/g,黄芪根中含量较高的成分还有芒柄花苷,含量范围为0.382~0.452 mg/g,皂苷类成分含量测定结果,黄芪茎叶总皂苷含量范围为15.45~23.62mg/g,黄芪根总皂苷含量范围为16.35~16.59 mg/g;黄芪多糖含量测定结果,黄芪茎叶中多糖含量范围为4.8~11.32 mg/g,而黄芪根中多糖含量范围为95.66~139.63mg/g;水解氨基酸测定结果显示,两者所含氨基酸种类和含量差异均不大;微量元素测定结果显示,两者所含微量元素种类和半定量结果差异也不大;黄芪茎叶水提物的药理作用实验结果,黄芪茎叶高、中剂量组均能显著降低糖尿病大鼠血糖水平,显著增加糖尿病大鼠胸腺脏器指数;除此之外,黄芪茎叶不同剂量组均可显著缩短水迷宫定位航行潜伏期,而在空间探索实验中,黄芪茎叶不同剂量组均可减少逃逸平台进入次数和运动距离、有效区域进入次数和运动距离,其中黄芪茎叶高剂量组有显著差异。结论:上述相关化学实验结果显示,黄芪茎叶有其特有的黄酮类成分,如金丝桃苷、异槲皮苷等,就所选择含量测定的主要黄酮类成分而言,含量差异不大,总皂苷含量较根多,多糖含量较根部少,而氨基酸和微量元素种类和含量均与根部相差不多,因此可见黄芪茎叶与黄芪根部既有关联又有区别,但是黄芪茎叶作为单独药用部位加以利用是可行的;药理实验结果显示,黄芪茎叶水提物可明显降低糖尿大鼠血糖水平,增加糖尿病大鼠免疫力,同时对糖尿病大鼠空间记忆能力也有一定的改善作用,因此可见,黄芪茎叶治疗消渴及其并发症有一定的药理学意义,值得进一步深入研究。
【学位单位】:山西中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位年份】:2017
【中图分类】:R284.1;R285
【部分图文】:
黄芪茎叶总离子流图(正离子模式)
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图 2 黄芪根总离子流图(正离子模式) 黄芪茎叶及根黄酮、皂苷类成分确认在上述结果的基础上,进一步结合文献采用对照品比对,黄芪茎叶中有 10 个化物通过与对照品进行比对明确指认,而黄芪根中则有 12 个,被鉴定化合物的相对

图 10 AlCl3显色法全波长扫描图述实验结果可知,芦丁显色后在 420 nm 处有最大吸收,供试品溶液显与对照品相差较远,同时由 AlCl3显色法的显色原理可知,显色时络合色,受样品颜色的干扰较大,而黄芪茎叶提取溶液颜色较深,黄芪根提
【参考文献】
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本文编号:
2874018
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