枳壳均一多糖CALB-2结构表征及生物活性

发布时间：2020-11-12 11:52

　　 目的:从枳壳中分离纯化枳壳均一多糖CALB-2,并对其进行结构分析、形态表征及生物活性的研究。方法:采用热水提取法从中药枳壳中提取枳壳粗多糖(CALB),经阴阳离子交换树脂、离子交换琼脂糖凝胶以及丙烯葡聚糖凝胶等分离纯化技术得到枳壳均一多糖CALB-2;利用高效液相色谱法(HPLC)测定CALB-2的相对分子质量,采用甲基化分析和Smith降解对CALB-2进行单糖组成分析,通过红外光谱扫描(IR)分析和电镜扫描技术(SEM)对CALB-2进行结构分析及形态表征,并通过H2O2诱导心肌细胞氧化损伤模型对CALB-2抗氧化活性进行研究。结果:经HPLC测定CALB-2为均一多糖,其相对分子质量为3. 57×107Da。综合运用IR光谱分析、甲基化分析和Smith降解得到CALB-2为多支结构的酸性多糖,且主要以1→3,4键型存在。分子形态考察结果显示CALB-2为非晶态固体。体外活性结果表明CALB-2可明显减缓H2O2所致心肌细胞的氧化损伤作用。结论:枳壳多糖CALB-2为多支结构的均一酸性多糖,且具有一定抗心肌细胞氧化损伤的作用,以上发现为枳壳多糖进一步地深入研究奠定了理论基础。
【部分图文】：

CALB-2的红外光谱中3400 cm-1左右可见1个较强的宽吸收峰，为O-H的伸缩振动，提示CALB-2存在分子内或分子间氢键；3 000～2 810 cm-1有1个弱吸收峰，为不对称C-H伸缩振动，是糖类成分的特征性吸收峰；1 620,1 420,1 330 cm-1以及1 240 cm-1处的吸收峰均为-COOH，表明CALB-2中有-COOH存在。另外，有3个强吸收峰出现在1 110～1 010 cm-1，表明为吡喃型的糖环构型；960～950 cm-1出现的吸收峰可能是呋喃糖的骨架振动；880～900 cm-1处和860 cm-1左右的吸收峰分别为β-端基和α-端基差向异构的C-H变角振动峰；765 cm-1处的吸收峰为D-吡喃环。以上分析表明CALB-2可能是一种多支链结构的酸性多糖。见图1。3.3 高碘酸氧化和Smith降解结果

经H2O2诱导后，H9c2细胞活力减弱至63.85%，与空白组相比出现显著性差异；与模型组比较，CALB-2高、中剂量组（40,20 mg·L-1）处理后心肌细胞活力分别达到84.61%和77.41%，说明CALB-2能显著抑制H2O2对心肌细胞的损伤作用（P<0.01),CALB-2低剂量组则无显著性差异，说明CALB-2可有效减缓H2O2对心肌细胞造成的氧化损伤，并呈剂量依赖性。见表5。4 讨论
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本文编号：2880714