多枝雾水葛化学成分研究及化合物抑菌、抗炎活性初步考察

发布时间：2020-11-12 19:11

　　 多枝雾水葛Pouzolzia zeylanica(L.)Benn.Var.microphylla(Wedd.)W.T.Wang(PZ)为荨麻科雾水葛属下的一个变种,其拔脓消肿、去腐生肌功效显著。前期课题组证实多枝雾水葛提取物具有明显消炎镇痛、加速外伤愈合的作用,并从各个溶剂萃取部位分离鉴定了36个化合物,结构类型以降碳木脂素类和黄酮苷类为主,但大部分化合物未进行药效研究。本论文通过色谱法、波谱法对多枝雾水葛乙酸乙酯部位进行系统分离鉴定,初步考察所得化合物的抑菌和抗炎活性,为阐明多枝雾水葛消炎镇痛的物质基础及机理提供科学依据。主要的研究内容如下:1、乙酸乙酯部位化学成分研究:综合运用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、制备液相、波谱解析等多种方法对乙酸乙酯部位中的化学成分进行系统研究,共获得17个化合物,分别为Pouzolignan K-a(1),Pouzolignan K(2),Pouzolignan F(3),Pouzolignan G(4),Pouzolignan H(5),Pouzolignan I(6),槲皮素-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷(7),山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷(8),木栓酮(9),去氢吐叶醇(10),肌肽(2-(2-苯甲酰氨基-3-苯丙酰氨基)-3-苯丙乙酸酯(11),异香兰酸(12),对羟基苯甲酸(13),3,4-二羟基苯甲酸乙酯(14),原儿茶醛(15),丁香酸(16),原儿茶酸(17)。化合物1~6属于降碳木脂素类,化合物7~8属于黄酮氧苷类,化合物9为五环三萜类,化合物10为α,β-不饱和酮类,化合物11为生物碱类,化合物12~17属于简单酚性化合物,其中化合物1为新化合物,化合物10~17为首次从雾水葛属分离得到。2、乙酸乙酯部位HPLC指纹图谱研究:采用高效液相色谱法和中药指纹图谱相似度系统建立多枝雾水葛乙酸乙酯部位HPLC指纹图谱,通过与分离所得化合物色谱图进行比对,指认出12个色谱峰(化合物1~6、12~17)。根据公式估算出各类化合物在乙酸乙酯部位相对含量之比,降碳木脂素类化合物1~6含量之比约为4:5:1:1:6:2,简单酚性化合物12~17含量之比约为3:2:10:6:8:9。3、化合物的抑菌活性考察:选用白色念珠菌、苏云金杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、化脓性链球菌、大肠杆菌和志贺氏痢疾杆菌7种菌株,采用滤纸片琼脂扩散法对单体化合物进行抑菌活性初步测试。化合物给药量为50μg,阳性对照药给药量为10μg。实验结果如下:对白色念珠菌的敏感度中,降碳木脂素类化合物1活性最强,为中度敏感,抑菌圈达到13.56 mm;其次是化合物6和化合物13为轻度敏感,抑菌圈为9mm左右。化合物17对除了白色念珠菌和化脓性链球菌之外的5种细菌均表现轻度敏感,具有广泛的抑菌作用。各类化合物之间联合用药无显著抑菌效果。4、化合物的抗炎活性考察:通过LPS诱导细胞体外炎症模型,对分离所得17个单体化合物在人成纤维细胞株HSP上进行抗炎活性初步测试,并初步探究各类化合物之间联合用药的抗炎效果。实验结果如下:化合物1~6、10、13、15和组合物1对IL-6的释放有不同程度的抑制作用,说明这9个化合物具有一定的体外抗炎效果,降碳木脂素类化合物抗炎效果尤其显著。降碳木脂素类化合物1~6联合使用具有显著抗炎效果。
【学位单位】：广东药科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R284;R285
【部分图文】：

1.1.2 香豆素类及简单苯丙素类雾水葛中香豆素类成分共 5 个，均为简单香豆素类化合物，并大多数以苷元形存在，少数连接糖形成苷类化合物；据报道，雾水葛属中还发现了 2 个简单苯丙素化合物。Chanyapat Sangsuwon[26]等从 Pouzolzia indica 中发现了三个香豆素苷元和个简单苯丙素类化合物，分别是东莨菪素、6,7-二甲基香豆素、7-甲氧基香豆素及啡酸甲酯。最近，Lujun Wang 等[24]发现 Pouzolzia zeylanica 中存在 3,4-二氢-5,7-二基-4-(4-羟基苯基)香豆素和芥子醛。香豆素苷类化合物目前只发现一个，即付明等从雾水葛中获得的东莨菪苷。结构见图 1-2。OOHO OHOH7-甲氧基香豆素 R1=H, R2=OCH36,7-二甲氧基香豆素 R1=OCH3, R2=OCH3东莨菪素 R1=OCH3, R2=OH3,4-二氢-5,7-二羟基-4-(4-羟基苯基)香豆素

现已经报道的雾水葛属植物中存在的包括 β-谷甾醇型、豆甾醇型及菠甾醇型三中分离得到，分别为β-谷甾醇、胡萝卜苷、菠甾醇。Lujun Wang 等[24]于 2015 年报道从酮。化合物结构见图 1-3。β-谷甾醇 R=H 胡萝卜苷 R=Glc胡萝卜苷棕榈酸酯 R=Glc-OCO(CH2)14CH3

原儿茶酸protocatechuic acid注：*表示新化合物2.4 结构鉴定化合物 1*OHOOHMeOOHOHOMe23 451'2'3'4'5'6'1''2''3''4'' 5''6''1''''2''''3''''4''''5''''6''''1'''2'''3'''4'''5'''6'''OHOHOHOOHMeOOHOHOMeOHOH图 2-2 化合物 1 结构图及 HMBC 相关图
【参考文献】

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本文编号：2881124