温肾固疏方调节组织蛋白酶K表达影响绝经后骨质疏松症的实验研究

发布时间：2020-11-13 07:03

　　 目的:观察温肾固疏方对去卵巢大鼠破骨细胞Cath K表达及骨组织C0l I的影响,探讨温肾固疏方治疗绝经后骨质疏松症的作用机制。方法:通过切除大鼠双侧卵巢建立绝经后骨质疏松大鼠模型。造模后,将30只SD大鼠随机分为模型组、雌激素组、温肾固疏方高、中、低剂量组,每组6只。假手术组仅切除卵巢旁脂肪组织。温肾固疏方高剂量组:[21.21g生药/(kg·d)];中剂量组:[l0.605g生药/(kg·d)];低剂量组:[5.3025 g生药/(kg·d)]。雌激素组:戊酸雌二醇[10 μ g/(kg·d)]。模型组和假手术组均给予生理盐水0.5 ml/100g灌胃。各组均连续干预2个月。HE染色观察骨组织形态;ELISA法测定血清PICP、ICTP、CTX、NTX的含量;免疫组化法测定骨组织ColI、Cath K表达率的变化。结果:实验结果表明,模型组大鼠骨小梁稀疏、断裂,符合骨质形态学破坏表现。各干预组大鼠骨小梁结构有所恢复,对抗骨质破坏效果显著,且中药组疗效与剂量相关,高剂量组疗效优于中、低剂量组。与假手术组相比较,模型组血清ICTP、NTX、CTX明显升高(P0.01),而PICP含量虽降低,但无统计学意义。与模型组相比较,雌激素组血清ICTP、NTX、CTX明显降低(P0.01),PICP含量升高,但无统计学意义;温肾固疏方低剂量组血清ICTP、NTX含量降低(P0.01),CTX含量降低(P=0.05),PICP含量升高,但无统计学意义;中药温肾固疏方高、中剂量组血清ICTP、NTX、CTX显著降低(P0.01),PICP含量明显升高(P0.01)。假手术组相比,模型组大鼠骨组织中ColI表达降低(P0.01),Cath K蛋白表达明显增多(P0.01);与模型组相比,中药温肾固疏方组和雌激素组骨组织ColI蛋白表达升高(P0.01),Cath K蛋白表达显著减少(P0.01)。结论:1.温肾固疏方可以从形态学方面有效地改善PMOP模型大鼠的骨质疏松状态。2.温肾固疏方治疗PMOP可能是通过下调破骨细胞Cath K表达,抑制骨组织ColⅠ分解而实现的。
【学位单位】：南京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R285.5
【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
第一部分 理论研究
    1. 现代医学对PMOP的认识
        1.1 PMOP的病因及发病机制
        1.2 PMOP的西药治疗
    2. 中医学对PMOP的认识
        2.1 中医病名
        2.2 病因病机
        2.3 中医治疗
    3. Cath K与骨质疏松症
        3.1 Cath K是治疗PMOP的新靶点
        3.2 抑制Cath K的过度表达治疗PMOP
    4. 温肾固疏方治疗PMOP的内涵
第二部分 实验研究
    1. 实验材料及仪器
        1.1 实验动物
        1.2 药物及试剂
        1.3 实验仪器
    2. 实验方法
        2.1 动物造模
        2.2 分组及干预
        2.3 动物处理及标本采集
        2.4 指标检测
    3. 数据处理
    4. 实验结果
        4.1 骨组织形态学观察
        4.2 血清骨转化指标PICP、ICTP、NTX和CTX的测定
        4.3 温肾固疏方对Col I蛋白表达的影响
        4.4 温肾固疏方对Cath K蛋白表达的影响
第三部分 讨论与分析
    1. 动物模型选择
    2. 观察指标的选择
    3. 实验结果分析
        3.1 温肾固疏方对骨组织形态的影响
        3.2 温肾固疏方对血清骨转化指标PICP、ICTP、NTX和CTX的影响
        3.3 温肾固疏方对Col I蛋白表达的影响
        3.4 温肾固疏方对Cath K蛋白表达的影响
    4. 实验结论
第四部分 结语
参考文献
附录
攻读硕士学位期间取得的学术成果
致谢

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本文编号：2881893