红花黄素A调控核受体TR3胞内移位抑制氧化应激对心肌细胞的损伤

发布时间：2020-11-16 03:25

　　 目的探究红花黄素A调控核受体TR3胞内移位抑制氧化应激对心肌细胞的损伤。方法利用H_2O_2诱导H9c2心肌细胞建立心肌氧化应激模型,不同浓度红花黄素A处理H_2O_2诱导H9c2心肌细胞24 h,CCK-8法检测心肌细胞存活率,流式细胞法检测心肌细胞凋亡率,比色法检测SOD、MDA水平,免疫荧光法观察TR3在细胞内的定位,Western blot法检测TR3在细胞核和线粒体表达以及凋亡通路蛋白Bcl-2、Bax、cl caspase-9表达。结果与模型组相比,红花黄素A增加H9c2心肌细胞存活率,降低细胞凋亡率,升高SOD水平,降低MDA水平,促进Bcl-2蛋白表达,抑制Bax、cl caspase-9蛋白表达(P0.05,P0.01),呈浓度依赖性。随着红花黄色素A的浓度增加,TR3核受体的移位逐渐减小并聚集在细胞核附近。结论红花黄素A能够调控核受体TR3从细胞核向线粒体的转移,并通过抑制线粒体凋亡通路,从而减轻氧化应激对心肌细胞的损伤。
【部分图文】：

如图1所示,与模型组比较,细胞存活率随红花黄色素A浓度(40～80 μmol/L)增加而逐渐升高(P<0.05,P<0.01),但当红花黄色素A浓度达到100 μmol/L时,细胞存活率开始下降,表明此时药物浓度过高,对细胞的培养环境产生影响,不利于细胞生长,因此后续实验仅以40、60、80 μmol/L 3个浓度作进一步研究。3.2 红花黄色素A对H9c2细胞凋亡率的影响

表1 红花黄色素A对H9c2细胞凋亡率的影响 Tab.1 Effects of safflor yellow A on the apoptosis rate of H9c2 cells 组别 凋亡率/% 空白组 4.9±1.2 模型组 33.5±6.1# 40 μmol/L红花黄色素A组 24.7±4.3* 60 μmol/L红花黄色素A组 16.4±3.2* 80 μmol/L红花黄色素A组 10.6±1.5** 注:与空白组比较,#P<0.05;与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01。3.3 红花黄色素A对H9c2细胞氧化应激水平的影响

以下每一组细胞的染色图像均分别以3种不同波长的发生光通过共聚焦显微镜进行拍摄,其中左上方小图为DAPI着色的细胞核,右上方小图为荧光单抗结合的TR3核受体,左下方小图为附着荧光探针的线粒体,右下方小图为前3个图片的叠加成像。从图3可观察到,相对于空白组,模型组TR3核受体开始从细胞核扩散移位,并与线粒体的位置重叠,而随着红花黄色素A的浓度增加,TR3核受体的移位逐渐减小并聚集在细胞核附近,较少与线粒体位置重叠。3.5 红花黄色素A对H9c2细胞Bax、Bcl-2、cl caspase-9、TR3蛋白表达影响
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本文编号：2885566