网售堇菜ITS鉴定与长萼堇菜多糖分离工艺和药用功能研究
发布时间：2020-12-03 01:50
长萼堇菜（Viola inconspicua Blume）是一种堇菜科（Violaceae）堇菜属植物,为多年生草本,主要生长在路边的树丛、山坡草地等环境中[1]。经文献报道,长萼堇菜也是华南地区资源量最大的一种堇菜属植物。在我国民间,堇菜属植物常以全草入药,它们具有清热解毒、消肿止痛和治疗肝炎和咽喉炎等炎症的功效[2],国内外已有多项研究工作表明堇菜属植物含有多糖等多种药用成分。正常情况下,人体内处于动态平衡的活性氧和活性氮对于生物体具有重要作用,过多的氧化应激会直接或间接地引起衰老等若干种疾病。近年来发现,关于体外抗氧化系统,来源于天然药物的多糖或糖复合物是有效的自由基清除剂、还原剂和铁螯合剂,合理利用这些天然、无毒、无副作用的抗氧化剂,对于体内和体外有效的抗氧化作用和疾病的预防具有相当大的应用价值。本论文首次详细的对网售堇菜属植物进行Internal Transcibed Spacer（ITS）系统学鉴定,对长萼堇菜多糖进行提取和含量测定,在此实验基础上利用响应面和Box-Benhnken法联合实验,探究长萼堇菜多糖的最佳提取工艺条件和分离纯化及表征,并对其体外抗氧化活性和肿瘤细...
【文章来源】：广东药科大学广东省
【文章页数】：88 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
电商销售的代表性新鲜堇菜属植株Figure.1RepresentativefreshViolaplantsfromtheelectricitysalesaroundChina
陕西药材土特产 陕西旬邑县 SX 干燥 21诚信养生保健 河北石家庄 SJZ 干燥 15阿里巴巴天山堇菜 新疆 TS 干燥 60长萼堇菜 广州大学城校院（自主采集） XY 新鲜 无浙江台州 湖北黄冈 江苏扬州 湖南祁阳图 1 电商销售的代表性新鲜堇菜属植株Figure.1 Representative fresh Viola plants fromthe electricity sales around China
摄于广州大学城；天山堇菜（Viola tianschanica Maxim.）照源于三九养生堂丁（Viola yedoensis Makino--Viola philippica Car. ssp. munda W.Becker）照片里巴巴。在上述 3 种堇菜中，天山堇菜和紫花地丁研究和应用，较为广泛，成分也有深入鉴定。根据我们多年的野外植物普查经验，长萼堇菜在华南地分丰富，但对其分子系统和药用成分研究并不深入。因此，本论文首先对电堇菜、广州大学城采集长萼堇菜进行了基于分子标记 ITS 的分子系统学比较堇菜 DNA 提取与 ITS 的扩增收集的堇菜新鲜植株和干燥样品，采用自配 CTAB 提取液提取。经琼脂糖胶的和干燥的植物材料均成功提取 DNA，主条带大小在 15 kb 以上，说明提取整性较好（图 3）。结果如图 3 所示，其中新鲜样品 DNA 的浓度相对高于干但由于实验步骤未加 RNA 酶去除 RNA，因此，胶图中有 28S 和 18S rRNA号，也包括小分子 RNA 的信号。干燥样品 DNA 浓度低，但相对较纯。
【参考文献】：
期刊论文
[1]紫花地丁化学成分及抗氧化活性[J]. 曹捷,秦艳,尹成乐,程志红. 中国实验方剂学杂志. 2013(21)
[2]Antipyretic and anticonvulsant activity of n-hexane fraction of viola betonicifolia[J]. Naveed Muhammad,Muhammad Saeed,Haroon Khan,Naila Raziq,Syed Muhammad Ashhad Halimi. Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine. 2013(04)
[3]紫花地丁化学成分与药理活性研究新进展[J]. 李永生,何希瑞,杨燕,张春玲,常育,何睿. 环球中医药. 2013(04)
[4]紫花地丁的化学成分(英文)[J]. 周海艳,秦民坚,洪俊丽,倪月娟,吴刚. 中国天然药物. 2009(04)
[5]天山堇菜提取物的抑菌活性研究[J]. 沈小燕,解成喜,刘迪. 生物技术. 2009(02)
[6]紫花地丁乙醇提取物的抗氧化性研究[J]. 黄美娥,卓儒洞,唐莉. 食品科技. 2007(02)
[7]东北堇菜抗炎作用的实验研究[J]. 徐凤文. 吉林中医药. 2005(12)
[8]蛋白质定量方法[J]. 张梅村. 山东食品科技. 2004(12)
[9]响应面分析法优化羊栖菜多糖的提取工艺[J]. 李亚娜,林永成,佘志刚. 华南理工大学学报(自然科学版). 2004(11)
[10]紫花地丁水煎剂调节小鼠免疫细胞分泌IL-2、TNF-α的体外研究[J]. 李海涛,赵红,顾定伟,王志文,葛庆峰. 山东中医杂志. 2004(10)
本文编号：2895795
【文章来源】：广东药科大学广东省
【文章页数】：88 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
电商销售的代表性新鲜堇菜属植株Figure.1RepresentativefreshViolaplantsfromtheelectricitysalesaroundChina
陕西药材土特产 陕西旬邑县 SX 干燥 21诚信养生保健 河北石家庄 SJZ 干燥 15阿里巴巴天山堇菜 新疆 TS 干燥 60长萼堇菜 广州大学城校院（自主采集） XY 新鲜 无浙江台州 湖北黄冈 江苏扬州 湖南祁阳图 1 电商销售的代表性新鲜堇菜属植株Figure.1 Representative fresh Viola plants fromthe electricity sales around China
摄于广州大学城；天山堇菜（Viola tianschanica Maxim.）照源于三九养生堂丁（Viola yedoensis Makino--Viola philippica Car. ssp. munda W.Becker）照片里巴巴。在上述 3 种堇菜中，天山堇菜和紫花地丁研究和应用，较为广泛，成分也有深入鉴定。根据我们多年的野外植物普查经验，长萼堇菜在华南地分丰富，但对其分子系统和药用成分研究并不深入。因此，本论文首先对电堇菜、广州大学城采集长萼堇菜进行了基于分子标记 ITS 的分子系统学比较堇菜 DNA 提取与 ITS 的扩增收集的堇菜新鲜植株和干燥样品，采用自配 CTAB 提取液提取。经琼脂糖胶的和干燥的植物材料均成功提取 DNA，主条带大小在 15 kb 以上，说明提取整性较好（图 3）。结果如图 3 所示，其中新鲜样品 DNA 的浓度相对高于干但由于实验步骤未加 RNA 酶去除 RNA，因此，胶图中有 28S 和 18S rRNA号，也包括小分子 RNA 的信号。干燥样品 DNA 浓度低，但相对较纯。
【参考文献】：
期刊论文
[1]紫花地丁化学成分及抗氧化活性[J]. 曹捷,秦艳,尹成乐,程志红. 中国实验方剂学杂志. 2013(21)
[2]Antipyretic and anticonvulsant activity of n-hexane fraction of viola betonicifolia[J]. Naveed Muhammad,Muhammad Saeed,Haroon Khan,Naila Raziq,Syed Muhammad Ashhad Halimi. Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine. 2013(04)
[3]紫花地丁化学成分与药理活性研究新进展[J]. 李永生,何希瑞,杨燕,张春玲,常育,何睿. 环球中医药. 2013(04)
[4]紫花地丁的化学成分(英文)[J]. 周海艳,秦民坚,洪俊丽,倪月娟,吴刚. 中国天然药物. 2009(04)
[5]天山堇菜提取物的抑菌活性研究[J]. 沈小燕,解成喜,刘迪. 生物技术. 2009(02)
[6]紫花地丁乙醇提取物的抗氧化性研究[J]. 黄美娥,卓儒洞,唐莉. 食品科技. 2007(02)
[7]东北堇菜抗炎作用的实验研究[J]. 徐凤文. 吉林中医药. 2005(12)
[8]蛋白质定量方法[J]. 张梅村. 山东食品科技. 2004(12)
[9]响应面分析法优化羊栖菜多糖的提取工艺[J]. 李亚娜,林永成,佘志刚. 华南理工大学学报(自然科学版). 2004(11)
[10]紫花地丁水煎剂调节小鼠免疫细胞分泌IL-2、TNF-α的体外研究[J]. 李海涛,赵红,顾定伟,王志文,葛庆峰. 山东中医杂志. 2004(10)
本文编号：2895795
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