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温阳通脉方经内质网应激途径对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的作用

发布时间:2020-12-06 00:45
  目的观察温阳通脉方含药血清是否通过内质网应激途径保护心肌细胞,减轻缺氧/复氧损伤,抑制心肌细胞凋亡。方法取33只SD大鼠,随机分四组:空白对照组(15只);低、中、高剂量温阳通脉方组(各6只)。用生理盐水和3.24g/kg、6.48g/kg、12.96g/kg剂量的温阳通脉方药物给大鼠灌胃3天后,颈总动脉取血制备空白血清和温阳通脉方含药血清。将H9C2心肌细胞分为5组:空白血清对照组,模型组,低、中、高剂量温阳通脉方含药血清组。通过化学性缺氧剂(CoCl2)作用于H9C2心肌细胞22h建立缺氧模型,然后更换新鲜培养基处理2h建立复氧模型的方法建立缺氧/复氧模型,四甲基偶氮唑盐法(MTT)测得最佳血清添加量(20%)和缺氧/复氧时最佳CoCl2浓度(600μM)。空白血清对照组和模型组加入20%空白血清,低、中、高剂量温阳通脉方含药血清组分别加入20%低、中、高剂量温阳通脉方含药血清。用MTT法检测各组细胞存活率;比色法检测各组半胱氨酸蛋白酶3(Caspase3)酶活性和上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性;Hoechst33342荧光染色观察各组... 

【文章来源】:锦州医科大学辽宁省

【文章页数】:60 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

温阳通脉方经内质网应激途径对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的作用


缺氧/复氧时不同CoCl2浓度对H9C2细胞存活率的影响(x±s,n=5)

细胞存活率,复氧,含药血清


图 1 缺氧/复氧时不同 CoCl2浓度对 H9C2 细胞存活率的影响( x±s,n=5)注:与空白对照组(0μM)相比,*P<0.05,**P<0.01三、MTT 测各组细胞存活率与空白血清对照组相比,模型组细胞存活率显著降低(P<0.01);与模型组相比,低、中、高剂量温阳通脉方含药血清组细胞存活率均有明显改善(均为P<0.01);与低剂量温阳通脉方含药血清组相比,中、高剂量温阳通脉方含药血清组细胞存活率均有不同程度的改善(分别为 P<0.05、P<0.01);与中剂量温阳通脉方含药血清组比,高剂量温阳通脉方含药血清组细胞存活率更佳(P<0.05)。(图 2)

复氧,含药血清


四、各组细胞上清液中 LDH 活性与空白血清对照组相比,模型组细胞上清液中 LDH 活性显著升高(P<0.01);与模型组相比,低、中、高剂量温阳通脉方含药血清组 LDH 活性均明显降低(均为 P<0.01);与低剂量温阳通脉方含药血清组相比,中、高剂量温阳通脉方含药血清组 LDH 活性均有不同程度的降低(分别为 P<0.05、P<0.01);与中剂量温阳通脉方含药血清组相比,高剂量温阳通脉方含药血清组 LDH 活性更低(P<0.05)。(图 3)


本文编号:2900394

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