无果枸杞芽茶提取物对阿尔茨海默症模型小鼠神经保护作用的研究
发布时间：2020-12-06 08:28
阿尔茨海默症（俗称老年性痴呆症,Alzheimer’s disease,AD）,是一种以进行性认知障碍和记忆力损伤的中枢神经系统退行性疾病,至今仍没有确切有效的治疗方法。流行病学资料和实验数据显示富含天然抗氧化功能成分的物质在预防AD等神经系统退行性疾病方面有着重要的作用。我们实验室初步分析发现无果枸杞芽茶含有黄酮类和多酚类化合物,由此提示如果能证实无果枸杞芽茶对AD具有防治作用,那么中老年人长期饮用就可以预防老年痴呆症。基于上述设想,我们开展以下研究来考察无果枸杞芽茶是否具有防治阿尔茨海默症的作用。采用硫磺素（THT）荧光染色法和Dot-blotting检测,结果显示无果枸杞芽茶水提物（FWE）在体外明显抑制Aβ聚集,促进Aβ纤维解聚,并抑制Aβ毒性寡聚体形成;体外建立AD细胞模型,结果显示FWE可抑制Aβ诱导的小鼠海马神经元（HT22）细胞毒性及细胞凋亡,明显降低7PA2细胞分泌的Aβ40和Aβ42水平,减弱Aβ诱导的SH-SY5Y细胞氧化应激水平,表明FWE对Aβ毒性诱导的神经细胞损伤有明显的保护作用;以APPswe/PS1dE9转基因小鼠为AD动物模型,对AD转基因小鼠经灌胃持...
【文章来源】：宁夏大学宁夏回族自治区 211工程院校
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－２?Ａ（５的产生??１．２．３氧化应激假假说??
氧化作用【２＇脂肪过氧化是由ＲＯＳ氧化生物膜引起，通过重排脂链和形成新的自由基，因此，??如果反应发生在膜脂质中，通过扩散损伤可能会变得严重，这可能损害质膜的结构和功能［１８］（如??图１－３）。研宄证明，与健康人相比ＡＤ患者的脑内和血清中的脂质过氧化都出现了明显的增加［２７，??。因此，有一系列实验数据来支持氧化应激在ＡＤ患者脑内发生的重要作用，并在一定程度上??来补充ＡＤ机制涉及的其他相关假说。??ｏｘｉｄａｔｉｖｅ?Ｓｔｒｅｓｓ??晰?ｖ—、?Ｐ??Ｒ０Ｓ?＾??ｉｆ?ｙ?＇．?■■讀圓??Ｈ＊Ｏｉ?ｆｏｒｍａｔｉｏｎ?ａｓ?ｂｙｐｒｏｄｕｃｔ??１?１?ＢＥｍＪｋｄＵｌＣＴＩ??ＡＴＰａｓｅｓｒ?ｇｔｕｃｏｓｅＰ?ｇｌｕｔａｍａｔｅ??ｔｒ？ｎｓ｜＞〇ｎ？ｎ?ａｎｄ?ＧＴＰ?ｂｉｎｄｉｎｇ?ｐｒｏｔｒｉｎｉｓ??ｖｘｃｔｔｏＵＭｉｃＩｔｙ?ａｎｄ?？ｐｏｐｔｏ？ｂ?ｏｌ?ｔｈｅ?ｎ？ｕｒ〇ｎ｜｜Ｃ＾ｒ??图１－３氧化应激假说??１．２．４神经炎症假说??患者脑内ＡＰ和神经炎症反应的相互作用加重了祌经毒性的过程被认为是ＡＤ发病的一个重??要病理机制。在许多神经变性疾病如帕金森病和阿尔茨海默病，甚至自闭症和强迫症患者脑内都??观察到星形胶质细胞和小胶质细胞的促炎活化。对ＡＤ转基因小鼠的研宂显示，脑内炎症修复系??统对机体起保护作用【２９］，当Ａ（３高表达时能够对系统持续激活，将原本对机体起保护作用的系统??破环转为慢性炎症损伤，表明ＡＤ中的炎症反丨、Ｖ：是把双刃剑。起初，这是一个旨在消除有害刺激??５??
（Ａ）?ＴｈＴ荧光检测ＦＷＥ对Ａ３聚集的影响；（Ｂ）ＴＥＭ检测ＦＷＥ对Ａ３聚集的影响??ＴｈＴ结果表明，２〇ｎＭ?ＡＰ在大约３０ｈ后完全聚集成纤维状，而ＦＷＥ明显抑制Ａｐ纤维形成，??并呈现剂量依赖性（图２－１Ａ）。运用ＴＥＭ观察Ａ｜３聚集物形态的结果发现，单独的２〇ｈＭＡＰ在８ｈ??形成了大量的长纤；加入０．０１％?ＦＷＥ共孵育后，纤维形成显著减少；加入０．０８％的共孵育后，只??能观察到很少量的纤维（图２－１Ｂ），这一结果与ＴｈＴ结果一致。表明ＦＷＥ能够抑制ＡＰ的聚集，??间接的抑制ＡＰ寡聚体和纤维的形成。??２．３．２?ＦＷＥ抑制Ａｐ毒性寡聚体的形成??Ａｐ＋ＦＷＥ?（％）??０?０．０１?０．０４?０．０８??Ｗ２０?：擎〈泰＼?ｆ?Ｖ〉！??ＯＣ?．．Ｊｆｅｌ??Ｗ?＿?馨??图２－２?Ｄｏｔ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ检测不同浓度的ＦＷＥ对Ａ?Ｐ寡聚体形成的影响??１８??
【参考文献】：
期刊论文
[1]老年痴呆患者的康复治疗[J]. 刘莹. 中国卫生标准管理. 2015(17)
[2]老年痴呆症发病机制及中西医治疗研究进展[J]. 郭茜茜,郭尔楚,钟振国. 亚太传统医药. 2015(13)
[3]枸杞芽茶栽培技术[J]. 李建国,马金平,王孝,陈彦珍. 北方园艺. 2015(02)
[4]宁夏无果枸杞芽提取物对慢性温和不可预见性应激小鼠学习、记忆的影响[J]. 陈海军,王慧茹,胡嘉航,贾桦,何仲义,秦毅,李军平,张莲香. 神经解剖学杂志. 2014(02)
[5]老年痴呆病的发病机制及临床药物治疗分析[J]. 梁汉周,梁雁,黄波. 当代医学. 2013(22)
[6]A combination extract of Renshen(Panax Ginseng),Yinyanghuo(Herba Epimedii Brevicornus),Yuanzhi(Radix Palygalae) and Jianghuang(Rhizoma Curcumae Longae) decreases glycogen synthase kinase 3β expression in brain cortex of APPV717I transgenic mice[J]. Jing Shi,Jinzhou Tian,Xuekai Zhang,Chuiyou Zeng,Mingqing Wei,Pengwen Wang,Yongyan Wang. Journal of Traditional Chinese Medicine. 2013(02)
[7]宁夏无果枸杞芽提取物对自然衰老小鼠SOD、MDA及NCAM的影响[J]. 张莲香,陈海军,胡嘉航,马江波,贾桦,秦毅,朱佳新,王瑞,王凡. 宁夏医科大学学报. 2012(12)
[8]无果枸杞芽对糖尿病患者生化指标的影响[J]. 方京徽,许岭翎,彭艳丽. 中国实用医药. 2010(09)
[9]人参皂甙Rg1通过P38信号通路影响帕金森病MPTP模型小鼠黑质COX-2的表达[J]. 王茜,郑桓,张作凤,张宇新. 南方医科大学学报. 2008(09)
[10]对老年痴呆病人家庭照顾者的护理指导[J]. 王轶娜,徐萍,黄晓刚,胡月亮. 中华护理杂志. 2006(01)
博士论文
[1]针对阿尔茨海默病中Aβ42靶点的抗体与天然药物的效应分析[D]. 黄雪媚.吉林大学 2011
硕士论文
[1]宁夏无果枸杞芽提取物对自然衰老小鼠的抗衰老作用研究[D]. 陈海军.宁夏医科大学 2014
本文编号：2901062
【文章来源】：宁夏大学宁夏回族自治区 211工程院校
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－２?Ａ（５的产生??１．２．３氧化应激假假说??
氧化作用【２＇脂肪过氧化是由ＲＯＳ氧化生物膜引起，通过重排脂链和形成新的自由基，因此，??如果反应发生在膜脂质中，通过扩散损伤可能会变得严重，这可能损害质膜的结构和功能［１８］（如??图１－３）。研宄证明，与健康人相比ＡＤ患者的脑内和血清中的脂质过氧化都出现了明显的增加［２７，??。因此，有一系列实验数据来支持氧化应激在ＡＤ患者脑内发生的重要作用，并在一定程度上??来补充ＡＤ机制涉及的其他相关假说。??ｏｘｉｄａｔｉｖｅ?Ｓｔｒｅｓｓ??晰?ｖ—、?Ｐ??Ｒ０Ｓ?＾??ｉｆ?ｙ?＇．?■■讀圓??Ｈ＊Ｏｉ?ｆｏｒｍａｔｉｏｎ?ａｓ?ｂｙｐｒｏｄｕｃｔ??１?１?ＢＥｍＪｋｄＵｌＣＴＩ??ＡＴＰａｓｅｓｒ?ｇｔｕｃｏｓｅＰ?ｇｌｕｔａｍａｔｅ??ｔｒ？ｎｓ｜＞〇ｎ？ｎ?ａｎｄ?ＧＴＰ?ｂｉｎｄｉｎｇ?ｐｒｏｔｒｉｎｉｓ??ｖｘｃｔｔｏＵＭｉｃＩｔｙ?ａｎｄ?？ｐｏｐｔｏ？ｂ?ｏｌ?ｔｈｅ?ｎ？ｕｒ〇ｎ｜｜Ｃ＾ｒ??图１－３氧化应激假说??１．２．４神经炎症假说??患者脑内ＡＰ和神经炎症反应的相互作用加重了祌经毒性的过程被认为是ＡＤ发病的一个重??要病理机制。在许多神经变性疾病如帕金森病和阿尔茨海默病，甚至自闭症和强迫症患者脑内都??观察到星形胶质细胞和小胶质细胞的促炎活化。对ＡＤ转基因小鼠的研宂显示，脑内炎症修复系??统对机体起保护作用【２９］，当Ａ（３高表达时能够对系统持续激活，将原本对机体起保护作用的系统??破环转为慢性炎症损伤，表明ＡＤ中的炎症反丨、Ｖ：是把双刃剑。起初，这是一个旨在消除有害刺激??５??
（Ａ）?ＴｈＴ荧光检测ＦＷＥ对Ａ３聚集的影响；（Ｂ）ＴＥＭ检测ＦＷＥ对Ａ３聚集的影响??ＴｈＴ结果表明，２〇ｎＭ?ＡＰ在大约３０ｈ后完全聚集成纤维状，而ＦＷＥ明显抑制Ａｐ纤维形成，??并呈现剂量依赖性（图２－１Ａ）。运用ＴＥＭ观察Ａ｜３聚集物形态的结果发现，单独的２〇ｈＭＡＰ在８ｈ??形成了大量的长纤；加入０．０１％?ＦＷＥ共孵育后，纤维形成显著减少；加入０．０８％的共孵育后，只??能观察到很少量的纤维（图２－１Ｂ），这一结果与ＴｈＴ结果一致。表明ＦＷＥ能够抑制ＡＰ的聚集，??间接的抑制ＡＰ寡聚体和纤维的形成。??２．３．２?ＦＷＥ抑制Ａｐ毒性寡聚体的形成??Ａｐ＋ＦＷＥ?（％）??０?０．０１?０．０４?０．０８??Ｗ２０?：擎〈泰＼?ｆ?Ｖ〉！??ＯＣ?．．Ｊｆｅｌ??Ｗ?＿?馨??图２－２?Ｄｏｔ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ检测不同浓度的ＦＷＥ对Ａ?Ｐ寡聚体形成的影响??１８??
【参考文献】：
期刊论文
[1]老年痴呆患者的康复治疗[J]. 刘莹. 中国卫生标准管理. 2015(17)
[2]老年痴呆症发病机制及中西医治疗研究进展[J]. 郭茜茜,郭尔楚,钟振国. 亚太传统医药. 2015(13)
[3]枸杞芽茶栽培技术[J]. 李建国,马金平,王孝,陈彦珍. 北方园艺. 2015(02)
[4]宁夏无果枸杞芽提取物对慢性温和不可预见性应激小鼠学习、记忆的影响[J]. 陈海军,王慧茹,胡嘉航,贾桦,何仲义,秦毅,李军平,张莲香. 神经解剖学杂志. 2014(02)
[5]老年痴呆病的发病机制及临床药物治疗分析[J]. 梁汉周,梁雁,黄波. 当代医学. 2013(22)
[6]A combination extract of Renshen(Panax Ginseng),Yinyanghuo(Herba Epimedii Brevicornus),Yuanzhi(Radix Palygalae) and Jianghuang(Rhizoma Curcumae Longae) decreases glycogen synthase kinase 3β expression in brain cortex of APPV717I transgenic mice[J]. Jing Shi,Jinzhou Tian,Xuekai Zhang,Chuiyou Zeng,Mingqing Wei,Pengwen Wang,Yongyan Wang. Journal of Traditional Chinese Medicine. 2013(02)
[7]宁夏无果枸杞芽提取物对自然衰老小鼠SOD、MDA及NCAM的影响[J]. 张莲香,陈海军,胡嘉航,马江波,贾桦,秦毅,朱佳新,王瑞,王凡. 宁夏医科大学学报. 2012(12)
[8]无果枸杞芽对糖尿病患者生化指标的影响[J]. 方京徽,许岭翎,彭艳丽. 中国实用医药. 2010(09)
[9]人参皂甙Rg1通过P38信号通路影响帕金森病MPTP模型小鼠黑质COX-2的表达[J]. 王茜,郑桓,张作凤,张宇新. 南方医科大学学报. 2008(09)
[10]对老年痴呆病人家庭照顾者的护理指导[J]. 王轶娜,徐萍,黄晓刚,胡月亮. 中华护理杂志. 2006(01)
博士论文
[1]针对阿尔茨海默病中Aβ42靶点的抗体与天然药物的效应分析[D]. 黄雪媚.吉林大学 2011
硕士论文
[1]宁夏无果枸杞芽提取物对自然衰老小鼠的抗衰老作用研究[D]. 陈海军.宁夏医科大学 2014
本文编号：2901062
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