白藜芦醇、红景天苷与氮氧自由基结构衍生物的抗辐射活性研究

发布时间：2020-12-07 07:54

　　目的:探索白藜芦醇、红景天苷与氮氧自由基结构衍生物的抗辐射活性。方法:采用CCK-8法检测部分白藜芦醇、红景天苷和氮氧自由基结构衍生物对BALB/c小鼠脾脏细胞存活率的影响;DCFH-DA荧光探针标记法检测结构衍生物对辐射诱导的BALB/c小鼠脾脏细胞内ROS水平的影响;采用CCK-8法,DCFH-DA荧光探针标记法检测Jurkat T细胞,进行实验条件摸索,建立筛选体系并对化合物进行筛选;Annexin-V/PI双染法法检测结构衍生物对辐射诱导的Jurkat T细胞凋亡的影响,以筛选出具有一定辐射保护效应的苗头化合物;PI染色法评价苗头化合物对辐射诱导的Jurkat T细胞周期阻滞的影响;为进一步探究苗头化合物的抗辐射保护作用机制,以Western blot法检测苗头化合物对凋亡相关蛋白及其信号通路中关键蛋白的表达水平的影响;用JC-1荧光探针掺入法检测苗头化合物对辐射诱导的Jurkat T细胞线粒体膜电位变化的影响;细胞色素c检测法评价苗头化合物对辐射诱导的Jurakt T细胞线粒体产生和释放细胞色素c的影响。结果:（1）BALB/c小鼠脾脏细胞的辐射敏感性较高,具有中等辐射敏感性... 

【文章来源】：宜春学院江西省

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

JurkatT细胞辐射剂量梯度摸索参考之前的研究结果，我们可以看出辐射剂量的选择极其重要，如果辐射剂量过大会导致大部分活细胞死亡，出现辐射后反而胞内ROS降低的非正常情况，

第一部分 抗辐射药物筛选体系的建立如果辐射剂量过小会导致无法诱导出明显的氧化应激，影响判断结构衍生物的活性。由这次实验结果可以看出，在 0，2，4，6，10，15Gy 的辐射剂量范围，随着辐射剂量的增大，在 0~6 Gy 剂量范围内，细胞存活率没有较大改变，且胞内ROS 升高明显。而 6~15 Gy 剂量范围内，细胞存活率明显下降，由于细胞的死亡，导致胞内 ROS 降低，故后续实验采用 6 Gy 的辐射剂量进行开展。6.3 部分白藜芦醇、红景天苷与氮氧自由基结构衍生物对辐射诱导的 Jurkat T 细胞胞内 ROS 升高水平的影响

23图 1 结构衍生物对辐射诱导的 Jurkat T 细胞胞内 ROS 升高水平的影响注：*P＜0.05，***P＜0.01，与 6 Gy 组相比较，差异具有统计学意义。，流式细胞仪检测结果（见图 1）显示，经过 6Gy 的 X 射线辐射后，JurkatT细胞内的 ROS 水平相比于未经任何处理的对照组有明显上升，经过两个系列化合物（1,10,100 μM）预处理的细胞，呈现出截然不同的结果。红景天苷原型几乎不具有降低 ROS 的活性，其与氮氧自由基的结构衍生物 CSP-NPS 在高浓度（100μM）可以降低胞内 ROS，参考其细胞毒性实验结果，考虑降低 ROS 的原因可能是由于毒性造成活细胞死亡导致的。而白藜芦醇系列化合物在中高剂量均能显著降低 Jurkat T 细胞胞内 ROS 水平，参考细胞毒性实验结果，结构衍生物（CSP-NPR-1，CSP-NPR-2，CSP-NPR-3）即改善了白藜芦醇的细胞毒性，也具


本文编号：2902917