柚皮苷在共培养体系下对成骨细胞和破骨细胞以及内皮祖细胞的影响及其机制研究
发布时间：2020-12-08 11:35
目的:柚皮苷（naringin,NG）是中药骨碎补中的重要组成成分。体内实验证实柚皮苷可以促进骨质疏松骨折愈合。体内实验证明柚皮苷可以促进成骨细胞（osteoblast,OB）的活性并抑制破骨细胞（osteoclast,OC）的骨吸收。但是OB与OC在体内存在相互偶联作用。柚皮苷对OB以及OC的单独作用不能反映体内的真实情况。Transwell小室对OB与OC的共培养可以较好的模拟体内微环境。近些年血管-骨偶联机制的提出表明骨再生与血管再生有着密切的关系。课题组前期研究表明柚皮苷可以促进骨质疏松骨折愈合早期血管新生。而血管新生主要由内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPCs）归巢至损伤部位形成新生血管。因此,我们推测柚皮苷可能通过促进EPCs向内皮细胞（endothelial cells,ECs）分化,进而促进骨折愈合早期血管化。本研究目的在于:（1）运用Transwell小室建立成骨细胞破骨细胞共培养模型,不同柚皮苷后观察对成骨细胞骨形成以及破骨细胞骨吸收的影响,并应用PCR以及Western-blot等技术探讨柚皮苷对OB以及OC的可能作用机制。...
【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校
【文章页数】：87 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Transwell小室建立共培养模型(OB在Transwell上室，OC在Transwell下室)
学硕士学位论文 柚皮苷对共培养体系中成骨细胞活性及破骨细胞分化 染色发现成骨细胞染色后呈棕红色阳性结构，对 Transwell 下室 染色后发现有酒红色的结构，中间为多个核的破骨细胞，骨吸诱导的破骨细胞具有在骨磨片上形成骨吸收陷窝，说明诱导的破吸收活性，见图 1.6。
.7 各实验组和对照组 TRAP 染色结果，A：对照组，B、C、D 分别为(2ngg/ml、200ng/ml) 柚皮苷，E：各组 TRAP 染色统计分析结果，*P<0.05。3 骨吸收陷窝结果：共培养 7 天后，2ng/ml，20ng/ml 以及 200ng/ml 柚皮苷组的骨吸收陷窝对组减少，差异有统计学意义(F=28.88，P<0.05)；两两比较，结果显示 2000ng/ml 的骨吸收陷窝面积差异无统计学意义(t=5.866, P=0.125)，20ng/的骨吸收陷窝面积小于 2ng/ml 柚皮苷组的骨吸收陷窝面积与差异有统(t=4.965， P<0.05)。共培养 7 天后，2ng/ml，20ng/ml 以及 200ng/ml 柚骨吸收陷窝的数量均较对组减少，差异有统计学意义(F=7.914，P=0.0比较，结果显示 20ng/ml 与 200ng/ml 的骨吸收陷窝数量差异无统计学.064, P=0.385)，20ng/ml 柚皮苷的骨吸收陷窝面积小于 2ng/ml 柚皮苷组陷窝面积与差异有统计学意义(t=4.965， P<0.05)，见图 1.8。
【参考文献】：
期刊论文
[1]2010-2016年中国老年人骨质疏松症患病率Meta分析[J]. 贺丽英,孙蕴,要文娟,潘克梫. 中国骨质疏松杂志. 2016(12)
[2]直接贴壁法体外分离培养大鼠骨髓内皮祖细胞[J]. 方晓,王康康,高维陆,张辉,尹宗生. 安徽医科大学学报. 2016(11)
[3]骨质疏松症的现状、筛查和预防[J]. 游利. 中国全科医学. 2016(14)
[4]血管内皮祖细胞改善骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞的增殖及凋亡[J]. 刘竹影,陈颖,刘倩,梁源,张瑞,文艺,丁寅. 中国组织工程研究. 2016(14)
[5]柚皮苷对去势大鼠骨折骨痂血管发生的影响及其机制[J]. 赵志虎,孟新民,孙晓雷,马剑雄,李风波,李艳军,吕建伟,马信龙. 中华骨科杂志. 2016 (03)
[6]低氧诱导因子-α信号通路与骨形成[J]. 贾鹏,邓廉夫. 中华骨科杂志. 2015 (06)
[7]骨碎补柚皮苷对炎症及骨作用的相关研究进展[J]. 殷方明,肖涟波,张昀. 中国骨伤. 2015(02)
[8]中国中老年人骨质疏松症患病率的Meta分析[J]. 韩亚军,帖小佳,伊力哈木·托合提. 中国组织工程研究. 2014(07)
[9]大鼠血管内皮祖细胞对骨髓间充质干细胞增殖及凋亡的影响[J]. 温丽,温宁,王宇,丁寅. 中华口腔医学杂志. 2014 (02)
[10]微应变环境下柚皮苷对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响[J]. 马信龙,孙晓雷,杜育任,赵斌,李风波,马剑雄,张扬,李爽. 中草药. 2013(22)
本文编号：2905024
【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校
【文章页数】：87 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Transwell小室建立共培养模型(OB在Transwell上室，OC在Transwell下室)
学硕士学位论文 柚皮苷对共培养体系中成骨细胞活性及破骨细胞分化 染色发现成骨细胞染色后呈棕红色阳性结构，对 Transwell 下室 染色后发现有酒红色的结构，中间为多个核的破骨细胞，骨吸诱导的破骨细胞具有在骨磨片上形成骨吸收陷窝，说明诱导的破吸收活性，见图 1.6。
.7 各实验组和对照组 TRAP 染色结果，A：对照组，B、C、D 分别为(2ngg/ml、200ng/ml) 柚皮苷，E：各组 TRAP 染色统计分析结果，*P<0.05。3 骨吸收陷窝结果：共培养 7 天后，2ng/ml，20ng/ml 以及 200ng/ml 柚皮苷组的骨吸收陷窝对组减少，差异有统计学意义(F=28.88，P<0.05)；两两比较，结果显示 2000ng/ml 的骨吸收陷窝面积差异无统计学意义(t=5.866, P=0.125)，20ng/的骨吸收陷窝面积小于 2ng/ml 柚皮苷组的骨吸收陷窝面积与差异有统(t=4.965， P<0.05)。共培养 7 天后，2ng/ml，20ng/ml 以及 200ng/ml 柚骨吸收陷窝的数量均较对组减少，差异有统计学意义(F=7.914，P=0.0比较，结果显示 20ng/ml 与 200ng/ml 的骨吸收陷窝数量差异无统计学.064, P=0.385)，20ng/ml 柚皮苷的骨吸收陷窝面积小于 2ng/ml 柚皮苷组陷窝面积与差异有统计学意义(t=4.965， P<0.05)，见图 1.8。
【参考文献】：
期刊论文
[1]2010-2016年中国老年人骨质疏松症患病率Meta分析[J]. 贺丽英,孙蕴,要文娟,潘克梫. 中国骨质疏松杂志. 2016(12)
[2]直接贴壁法体外分离培养大鼠骨髓内皮祖细胞[J]. 方晓,王康康,高维陆,张辉,尹宗生. 安徽医科大学学报. 2016(11)
[3]骨质疏松症的现状、筛查和预防[J]. 游利. 中国全科医学. 2016(14)
[4]血管内皮祖细胞改善骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞的增殖及凋亡[J]. 刘竹影,陈颖,刘倩,梁源,张瑞,文艺,丁寅. 中国组织工程研究. 2016(14)
[5]柚皮苷对去势大鼠骨折骨痂血管发生的影响及其机制[J]. 赵志虎,孟新民,孙晓雷,马剑雄,李风波,李艳军,吕建伟,马信龙. 中华骨科杂志. 2016 (03)
[6]低氧诱导因子-α信号通路与骨形成[J]. 贾鹏,邓廉夫. 中华骨科杂志. 2015 (06)
[7]骨碎补柚皮苷对炎症及骨作用的相关研究进展[J]. 殷方明,肖涟波,张昀. 中国骨伤. 2015(02)
[8]中国中老年人骨质疏松症患病率的Meta分析[J]. 韩亚军,帖小佳,伊力哈木·托合提. 中国组织工程研究. 2014(07)
[9]大鼠血管内皮祖细胞对骨髓间充质干细胞增殖及凋亡的影响[J]. 温丽,温宁,王宇,丁寅. 中华口腔医学杂志. 2014 (02)
[10]微应变环境下柚皮苷对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响[J]. 马信龙,孙晓雷,杜育任,赵斌,李风波,马剑雄,张扬,李爽. 中草药. 2013(22)
本文编号：2905024
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