在急性肾损伤治疗中川穹嗪诱导自噬发挥抗炎作用的机制研究

发布时间：2020-12-13 21:30

　　目的本课题通过动物肾缺血再灌注模型和细胞缺血缺氧模型探讨急性肾损伤过程中炎症反应与细胞自噬发生之间的关系,并探索中药川穹嗪对急性肾损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法本课题分为动物实验和细胞实验两部分。动物实验选用8周雄性SD大鼠27只,随机分为三组:对照组（Sham组）、缺血再灌注损伤组（ischemical reperfusion injury,I/R组）、缺血再灌注期间应用川穹嗪治疗组（I/R+TMP组）。检测血清尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）、血清肌酐（serum creatinine,SCr）确定模型制作成功后,通过苏木素-伊红（Hematoxylin-eosin,HE）染色、原位末端标记法（Terminal-deoxynucleoitidyl Transferase Mediated Nick End Labeling,TUNEL）、Caspase3/cleaved Caspase3 免疫组化染色观察各组肾小管形态学变化及细胞凋亡情况;Real time PCR检测NOD2、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）、单核细胞趋化因子（... 

【文章来源】：滨州医学院山东省

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２川穹嗪抑制肾脏缺血再灌注损伤后炎症反应??

ｓｈａｍ－ｏｐｅｒａｔｅｄ?ｒａｔｓ?（ｎ＝９），?＊＊?Ｐ?＜０．０５?ｖｓ．?Ｉ／Ｒ?ｒａｔｓ?（ｎ＝９）．??３在大鼠肾缺血再灌注损伤模型中，川穹嗪治疗组ＮＯＤ２的表达降低??Ｒｅａｌ?ｔｉｍｅ?ＰＣＲ分析结果（图３Ａ）和Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ分析结果（图３Ｂ）显示：在??ｍＲＮＡ水平和蛋白水平上，与对照组相比，肾脏缺血再灌注损伤组ＮＯＤ２表达水??平均明显升高；川穹嗪治疗组较缺血再灌注损伤组ＮＯＤ２水平降低。对肾脏组织??进一步做ＮＯＤ２免疫组织化学染色（图３Ｃ），通过显微镜观察ＮＯＤ２在肾脏的表??达变化，结果显示：与对照组相比，肾脏缺血再灌注损伤组ＮＯＤ２表达明显增加；??川穹嗪治疗组较缺血再灌注损伤组ＮＯＤ２表达减少。炎症和自噬是机体内两个不??可分割、联系密切的重要病理生理过程。在自噬保护近端肾小管不受变性和急性??３０??

水平和ＬＣ３Ａ／Ｂ－ＩＩ／Ｉ比值明显降低，说明严重缺氧抑制了自噬的发生；川穹嗪治疗??组较缺氧组Ｂｅｃｌｉｎｌ的表达水平和ＬＣ３Ａ／Ｂ－ＩＩ／Ｉ的值显著升高，且川穹嗪５０ｐＭ浓??度时较３０＾Ｍ浓度自噬升高更明显（图５Ｃ，?５Ｄ）。??Ａ?Ｂ?—????ＮＯＤ２－?一＂—一＂＾?■＊＿＊＊?晒圆?？？?Ｎ０Ｄ２－｜?，■丨＿■?■一?｜??Ｐ－ａｃｔｉｎ－ｆ＾ｐ＊?ｍｍｍ?ｍｍｍ?ｍｍｍ?？＞＾ｒ｜?Ｐ－ａｃｔｉｎ－｜?丨丨?｜??ＣｏＣＩ２（５０〇ｍＭ）?－？?＋?＋?＋?＋?ＯＧＤ?＋?＋?＋??ＴＭＰ?（３０ｐＭ）?＋?ＴＭＰ?（３〇ｍＭ）?＋??ＴＭＰ?（５〇ｍＭ）?？?ＴＭＰ?（５〇ｍＭ）?－?－?？?＋??ＳＳ?２．５－１?？?３．??Ｉ：?ｉ．?＿ａ＿??ｉｌ。＂?．?Ｕ?－??ＣｏＣＩ，?（６０〇ｍＭ）?－?？?？?＋?〇ＧＤ?－?＋?？?？??ＴＭＰ?（３０ｐＭ）?－?－?＋?－?ＴＭＰ?（３０ｐＭ）?－?－?＋?－??ＴＭＰ?（５０ｐＭ）?－?－?－?＋?ＴＭＰ?（６〇ｗＭ）?－?－?－?？??Ｃ?Ｄ??Ｂｅｃｌｉｎ１４￣?一?一?＿?ＬＣ３Ａ／Ｂ－Ａ－?—?＾?＇ＭＷｍ??ｐ－ａｃｔｉｎ－?ｍｍ?ｍａｍ?ｐ－ａｃｔｉｎ－ｌ?—？？?——－??ＣｏＣＩ２?（５０〇ｍＭ）?－－?＋?？?＋?？?ＣｏＣＩ，（５０〇ｍＭ）?？？？？？?＋??ＴＭＰ?（３０ｐＭ）?－？？？？－?ＴＭＰ?（３〇ｍＭ）?＋??ＴＭＰ?（５０ｐＭ）?？?ＴＭＰ?（５０ｐＭ＞?？??ｔ?２．０－，?＾?１Ｊ－??｜｜

【参考文献】：
期刊论文
[1]表没食子儿茶素没食子酸酯对人急性单核细胞白血病细胞株U937的作用及机制研究[J]. 范丽萍,沈建箴,傅海英,周华蓉,沈松菲,喻爱芳.  中国实验血液学杂志. 2010(02)



本文编号：2915202