肠道微生物对肝纤维化进程的影响及樟芝的干预作用研究
发布时间：2020-12-15 04:06
肝纤维化是由各种致病因子导致肝脏内细胞外基质（ECM）过度沉积的病理过程,是包括肝硬化在内的多种慢性肝病发展过程中的重要环节,积极防治肝纤维化具有重要的现实意义。研究结果表明,肠道菌群或是诸多肝脏疾病发生发展的推动力,但肠道菌群与肝纤维化的关系有待进一步研究。樟芝（Antrodia camphorata）是我国珍贵的药食用菌,具有保肝效果。本论文通过建立小鼠肝纤维化模型,运用组织病理学和分子生态学等技术手段对肝纤维化后肠道菌群的变化进行了确认,并通过肝纤维化小鼠和正常小鼠同笼饲养实验以及粪菌移植（FMT）实验,证实肠道菌群是肝纤维化发展的驱动力。而樟芝发酵菌丝体粉（AC）整体入药可有效防治CCl4诱导的小鼠肝纤维化,16S rDNA高通量测序表明其可改变肠道菌群结构,并利用肝脏转录组测序（RNA-seq）技术对AC防治肝纤维化的机制进行解析,随后利用FMT实验证明AC能通过调节肠道菌群直接防治肝纤维化,并以此为基础,建立肠道微生物体外培养模型发酵制备微生态制剂用以防治肝纤维化。本研究为寻找肝纤维化的治疗靶点及有效干预措施提供新的视角。主要结论如下:1、以肝组织胶原...
【文章来源】：江南大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：126 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
肝纤维化是慢性肝病发展为肝硬化的中心环节Fig.1-1Liverfibrosisisanecessarystageforthedevelopmentofchronicliverdiseaseaslivercirrhosis.
糖（lipopolysaccharide，LPS）激活枯否细胞中的 Toll 样受体（toll-like receptor，TLR4 途径，使核转录因子（nuclear transcription factor，NF）-κB/干扰素调节因子（interferregulatory factor，IRF）3 信号通路转导，激活诸如肿瘤坏死因子（tumor necrosis factorTNF）-α 和干扰素（interferon，IFN）-γ 等促炎细胞因子的转录[9]。该途径能导致内皮胞功能障碍，邻近细胞间溶质交换功能受损，肝细胞功能改变，进而导致非实质细胞伤。在另一项研究中发现，与单独培养 HSCs 相比，HSCs 和枯否细胞或正常肝细胞培养时表现出更多的活化表型，增值速率大幅提高且胶原合成水平也有一定的增长[10此外，枯否细胞和肝细胞能释放 ROS，增加肝细胞的氧化应激反应，并进一步刺HSCs 的活化[11]。ROS 主要通过线粒体电子传递链，线粒体损伤或通过激活细胞色素P450（cytochrome P450，CYP），烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（nicotinamide adenidinucleotide phosphate，NADPH）氧化酶，黄嘌呤氧化酶催化产生。ROS 的产生主要细胞中 NADPH 氧化酶（HSCs、巨噬细胞、肝细胞）和一氧化氮（nitricoxide，NO）量（枯否细胞）有关[12]。临床上，酒精性肝病的发病机制主要涉及乙醇类饮品摄入CYP2E1 表达增多，肝脏中 ROS 水平急剧升高，引起肝小叶 III 区（中心区）损伤NADPH 氧化酶则通过产生氧化应激来介导肝损伤和肝纤维化发生[13]。
图 1-3 影响肝纤维化的外部因素[36]Fig. 1-3 Extrahepatic factors that affect liver fibrosis..1.1.3 细胞内反应（1）自噬自噬是一种存在于真核细胞中的细胞降解过程。其主要通过激活 HSCs 参与肝纤，也可以通过影响其他纤维细胞来参与纤维化进程。静息状态的 HSCs 中充满了含黄酯的细胞质脂滴（lipiddroplets，LDs），当静息状态的 HSCs 转化为成 MFB 后，L少，自噬增加。自噬可以通过脂类自噬途径（lipophagy）将 LDs 中的甘油三酯等运溶酶体中降解来为 HSCs 提供能量[37-39]。（2）激活 TGF-β 或 PDGF 信号通路肝脏中 TGF-β 有重要的功能，它可以促进肝细胞增殖，诱导肝实质细胞凋亡，发疫调节和诱导肝纤维化的发生等。MFB 分泌的 TGF-β 还可以诱导肝细胞凋亡[40]。纤维化形成过程中，肝组织和血液中的 TGF-β1 水平升高，TGF-β1 的过度表达可以步促进肝纤维化进程。TGF-β1 通过泛素蛋白酶体途径激活 Smad2 和 Smad3，同时 Smad7。Smad2 和 Smad3 都是促纤维化因子，Smad3 基因敲除小鼠可以抵御二甲
【参考文献】：
期刊论文
[1]乙醇分级沉淀的樟芝多糖对于小鼠急性肝损伤的保护作用[J]. 杨毅,官俏兵,张晓玲,郭丽,韩晨阳. 中国现代应用药学. 2017(11)
[2]肝纤维化动物模型研究进展与中药药效评价应用概况[J]. 窦立雯,孙蓉. 中国药物警戒. 2017(03)
[3]肝纤维化动物模型的研究进展[J]. 康玉华,杨宇,王宝家,周文亮,徐由立,张凤. 辽宁中医杂志. 2016(10)
[4]牛樟芝发酵液提取物抗菌活性研究[J]. 赵能,原晓龙,陈剑,陈中华,王娟,杨宇明,王毅. 广西植物. 2017(08)
[5]胶原中羟脯氨酸的碱水解-光度法的水解条件优化[J]. 刘旭昭,罗思施,雷静,乐尧金. 中国卫生检验杂志. 2015(06)
[6]肝纤维化的发病机制和药物治疗现况[J]. 夏海珊,陈少茹,钟月春,吕思敏,陈丽思,黄志荣,吴铁,邹丽宜. 中国医药导报. 2014(18)
[7]谷氨酰胺联合益生菌对肝硬化肠黏膜屏障和肝功能的影响[J]. 顾林,燕善军,王启之,李大鹏,汪建超,汪强武. 胃肠病学. 2014(04)
[8]益生菌制剂治疗肝硬化的meta分析[J]. 张明明,方田,张静,于成功. 胃肠病学. 2014(01)
[9]16S rRNA基因测序法鉴定猪多杀性巴氏杆菌的研究[J]. 丁晓. 湖北畜牧兽医. 2013(05)
[10]人体肠道微生物与健康[J]. 武娜,朱宝利. 科学. 2013(02)
博士论文
[1]樟芝无性孢子介导的高效循环发酵策略及其产孢分子机制解析[D]. 李华祥.江南大学 2017
本文编号：2917625
【文章来源】：江南大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：126 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
肝纤维化是慢性肝病发展为肝硬化的中心环节Fig.1-1Liverfibrosisisanecessarystageforthedevelopmentofchronicliverdiseaseaslivercirrhosis.
糖（lipopolysaccharide，LPS）激活枯否细胞中的 Toll 样受体（toll-like receptor，TLR4 途径，使核转录因子（nuclear transcription factor，NF）-κB/干扰素调节因子（interferregulatory factor，IRF）3 信号通路转导，激活诸如肿瘤坏死因子（tumor necrosis factorTNF）-α 和干扰素（interferon，IFN）-γ 等促炎细胞因子的转录[9]。该途径能导致内皮胞功能障碍，邻近细胞间溶质交换功能受损，肝细胞功能改变，进而导致非实质细胞伤。在另一项研究中发现，与单独培养 HSCs 相比，HSCs 和枯否细胞或正常肝细胞培养时表现出更多的活化表型，增值速率大幅提高且胶原合成水平也有一定的增长[10此外，枯否细胞和肝细胞能释放 ROS，增加肝细胞的氧化应激反应，并进一步刺HSCs 的活化[11]。ROS 主要通过线粒体电子传递链，线粒体损伤或通过激活细胞色素P450（cytochrome P450，CYP），烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（nicotinamide adenidinucleotide phosphate，NADPH）氧化酶，黄嘌呤氧化酶催化产生。ROS 的产生主要细胞中 NADPH 氧化酶（HSCs、巨噬细胞、肝细胞）和一氧化氮（nitricoxide，NO）量（枯否细胞）有关[12]。临床上，酒精性肝病的发病机制主要涉及乙醇类饮品摄入CYP2E1 表达增多，肝脏中 ROS 水平急剧升高，引起肝小叶 III 区（中心区）损伤NADPH 氧化酶则通过产生氧化应激来介导肝损伤和肝纤维化发生[13]。
图 1-3 影响肝纤维化的外部因素[36]Fig. 1-3 Extrahepatic factors that affect liver fibrosis..1.1.3 细胞内反应（1）自噬自噬是一种存在于真核细胞中的细胞降解过程。其主要通过激活 HSCs 参与肝纤，也可以通过影响其他纤维细胞来参与纤维化进程。静息状态的 HSCs 中充满了含黄酯的细胞质脂滴（lipiddroplets，LDs），当静息状态的 HSCs 转化为成 MFB 后，L少，自噬增加。自噬可以通过脂类自噬途径（lipophagy）将 LDs 中的甘油三酯等运溶酶体中降解来为 HSCs 提供能量[37-39]。（2）激活 TGF-β 或 PDGF 信号通路肝脏中 TGF-β 有重要的功能，它可以促进肝细胞增殖，诱导肝实质细胞凋亡，发疫调节和诱导肝纤维化的发生等。MFB 分泌的 TGF-β 还可以诱导肝细胞凋亡[40]。纤维化形成过程中，肝组织和血液中的 TGF-β1 水平升高，TGF-β1 的过度表达可以步促进肝纤维化进程。TGF-β1 通过泛素蛋白酶体途径激活 Smad2 和 Smad3，同时 Smad7。Smad2 和 Smad3 都是促纤维化因子，Smad3 基因敲除小鼠可以抵御二甲
【参考文献】：
期刊论文
[1]乙醇分级沉淀的樟芝多糖对于小鼠急性肝损伤的保护作用[J]. 杨毅,官俏兵,张晓玲,郭丽,韩晨阳. 中国现代应用药学. 2017(11)
[2]肝纤维化动物模型研究进展与中药药效评价应用概况[J]. 窦立雯,孙蓉. 中国药物警戒. 2017(03)
[3]肝纤维化动物模型的研究进展[J]. 康玉华,杨宇,王宝家,周文亮,徐由立,张凤. 辽宁中医杂志. 2016(10)
[4]牛樟芝发酵液提取物抗菌活性研究[J]. 赵能,原晓龙,陈剑,陈中华,王娟,杨宇明,王毅. 广西植物. 2017(08)
[5]胶原中羟脯氨酸的碱水解-光度法的水解条件优化[J]. 刘旭昭,罗思施,雷静,乐尧金. 中国卫生检验杂志. 2015(06)
[6]肝纤维化的发病机制和药物治疗现况[J]. 夏海珊,陈少茹,钟月春,吕思敏,陈丽思,黄志荣,吴铁,邹丽宜. 中国医药导报. 2014(18)
[7]谷氨酰胺联合益生菌对肝硬化肠黏膜屏障和肝功能的影响[J]. 顾林,燕善军,王启之,李大鹏,汪建超,汪强武. 胃肠病学. 2014(04)
[8]益生菌制剂治疗肝硬化的meta分析[J]. 张明明,方田,张静,于成功. 胃肠病学. 2014(01)
[9]16S rRNA基因测序法鉴定猪多杀性巴氏杆菌的研究[J]. 丁晓. 湖北畜牧兽医. 2013(05)
[10]人体肠道微生物与健康[J]. 武娜,朱宝利. 科学. 2013(02)
博士论文
[1]樟芝无性孢子介导的高效循环发酵策略及其产孢分子机制解析[D]. 李华祥.江南大学 2017
本文编号：2917625
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