基于PERK/eIF2α/CHOP信号通路探讨肝豆灵对WD模型TX小鼠脑血管的保护及对HUVECs铜负荷损伤模型保护机制
发布时间：2020-12-16 06:51
目的本研究以TX小鼠和人脐静脉血内皮细胞（human umbical vein endothelial cells,HUVECs）为研究对象,以体内和体外实验相结合方式,研究中药肝豆灵对肝豆状核变性（Wilson’s disease,WD）患者脑血管的保护机制。阐明WD脑血管损害的机制与内质网应激PERK/e IF2α/CHOP信号通路介导的细胞凋亡有关,中药肝豆灵可过调控内质网PERK/e IF2α/CHOP信号通路抑制细胞凋亡,从而发挥保护WD脑血管损害作用。通过研究肝豆灵保护WD脑血管损害的分子机制,为肝豆灵临床应用提供理论基础和科学依据,为中医药防治WD脑血管损害提供新的思路。通过体内实验观察肝豆灵干预内质网应激PERK/e IF2α/CHOP信号通路对WD模型TX小鼠脑血管的保护作用;并通过体外实验HUVECs模拟脑血管内皮细胞进一步验证肝豆灵通过干预内质网应激PERK/e IF2α/CHOP信号通路对铜负荷后的HUVECs的保护机制;探讨肝豆灵对WD模型TX小鼠脑血管保护的作用机制。方法体内实验——肝豆灵对TX小鼠脑血管保护机制的探讨:48只TX小鼠随机分为模型组、肝豆灵组...
【文章来源】：安徽中医药大学安徽省
【文章页数】：114 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
英文缩略词表
第一部分 肝豆灵片通过PERK/eIF2α/CHOP内质网应激信号通路保护WD模型TX小鼠脑血管损伤
1 前言
2 材料与方法
2.1 实验材料
2.2 实验方法
2.3 检测方法及实验指标
2.4 统计学分析
3 结果
4 讨论
4.1 实验动物模型及对照药物的选择
4.2 主要指标的选择意义
4.3 肝豆灵对TX小鼠脑血管保护的疗效及机制分析
5 结论
参考文献
第二部分 肝豆灵片通过PERK/eIF2α/CHOP内质网应激信号通路对铜负荷HUVECs凋亡的抑制作用
1 前言
2 材料与方法
2.1 主要实验试剂及仪器
2.2 细胞株的生物特性及其培养
2.3 肝豆灵含药血清及硫酸铜培养基的制备
2.4 实验的设计及分组方法
2.5 RT-qPCR观察HUVECs内 PERK、p-eIF2α、CHOP m RNA表达水平
2.6 Western Blot法观察HUVECs内 PERK、p-e IF2α、CHOP蛋白的表达量
2.7 比色法进行HUVECs内 caspase-3 活性
2.8 统计分析
3 结果
3.1 肝豆灵对铜负荷诱导的HUVECs凋亡的影响
3.2 肝豆灵对铜负荷诱导的HUVECs内 PERK、p-eIF2α、CHOP mRNA表达的影响
3.3 肝豆灵对铜负荷诱导的HUVECs内 PERK、p-eIF2α、CHOP蛋白表达的影响
3.4 肝豆灵对铜负荷诱导的HUVECs内 caspase-3 活性的影响
4 讨论
4.1 实验对照药物的选择
4.2 内质网应激PERK信号通路相关指标选择的意义
4.3 肝豆灵抑制铜负荷HUVECs凋亡的疗效分析
4.4 肝豆灵抑制铜负荷HUVECs凋亡的机制分析
5 结论
参考文献
综述一 PERK在内质网应激中的作用研究进展
参考文献
综述二 脑血管内膜损伤及保护机制研究进展
参考文献
个人简介
攻读学位期间发表论文情况
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]大黄素对缺氧条件下人脐静脉内皮细胞焦亡的影响[J]. 王凯,施思,雷少青,夏中元. 中国中医急症. 2018(12)
[2]姜黄素类组分通过下调TLR4/NF-κB通路抑制LPS诱导的血管内皮细胞损伤[J]. 周银霞,张崇,傅海珍,张晓斐,李承军. 中南药学. 2018(11)
[3]黄连素对2型糖尿病大鼠胸主动脉PI3K/Akt/eNOS信号通路的影响[J]. 封芬,谭安雄,邓集湘,周斌. 中国当代医药. 2018(30)
[4]丹参酮ⅡA对硫酸吲哚酚诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的影响[J]. 许玲玲,鲁明军,郭涛,苏楠,王敏,吴琳英,罗福全,耿庆山,黄伟青. 中国老年学杂志. 2018(20)
[5]黄连素对冠心病大鼠血管内皮细胞损伤的保护机制研究[J]. 曹雪明,朱娜. 中医药学报. 2018(05)
[6]丹红注射液对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑血管内皮损伤的保护作用[J]. 罗霞,胡彬,王欣玲,秦桂芳,吴胜英. 中国中医急症. 2018(09)
[7]桂郁金多糖对H2O2致人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用及机制[J]. 俞献文,唐丽清,覃琴,冯柏林,杨秀芬. 中国实验方剂学杂志. 2018(23)
[8]抗磷脂抗体引起血管内皮细胞功能紊乱的机制及其病理生理意义[J]. 邵钫钰,冯娟,王宪. 生理科学进展. 2018(03)
[9]2016年安徽省居民死因分析[J]. 贺琴,邢秀雅,李蕊,戴丹,陈叶纪. 安徽预防医学杂志. 2018(03)
[10]大黄提取物对脂多糖诱导的内皮细胞的保护作用研究[J]. 杨舟鑫,郭冬阳,蔡国龙. 浙江中西医结合杂志. 2018(05)
硕士论文
[1]桂郁金挥发油和吉马酮对损伤血管内皮细胞的保护作用及机制研究[D]. 陈琼芳.广西中医药大学 2017
[2]莪术醇提物对PC12细胞和HUVECs的保护作用及其机制研究[D]. 黄瑀莘.广西医科大学 2016
[3]肝豆灵对Wilson病患者脑血流动力学和血管损伤因子及TX小鼠血管损伤病理研究[D]. 江海林.安徽中医药大学 2016
[4]镉经内质网应激途径诱导鸡肝细胞自噬的机制[D]. 李楠.东北农业大学 2014
本文编号：2919726
【文章来源】：安徽中医药大学安徽省
【文章页数】：114 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
英文缩略词表
第一部分 肝豆灵片通过PERK/eIF2α/CHOP内质网应激信号通路保护WD模型TX小鼠脑血管损伤
1 前言
2 材料与方法
2.1 实验材料
2.2 实验方法
2.3 检测方法及实验指标
2.4 统计学分析
3 结果
4 讨论
4.1 实验动物模型及对照药物的选择
4.2 主要指标的选择意义
4.3 肝豆灵对TX小鼠脑血管保护的疗效及机制分析
5 结论
参考文献
第二部分 肝豆灵片通过PERK/eIF2α/CHOP内质网应激信号通路对铜负荷HUVECs凋亡的抑制作用
1 前言
2 材料与方法
2.1 主要实验试剂及仪器
2.2 细胞株的生物特性及其培养
2.3 肝豆灵含药血清及硫酸铜培养基的制备
2.4 实验的设计及分组方法
2.5 RT-qPCR观察HUVECs内 PERK、p-eIF2α、CHOP m RNA表达水平
2.6 Western Blot法观察HUVECs内 PERK、p-e IF2α、CHOP蛋白的表达量
2.7 比色法进行HUVECs内 caspase-3 活性
2.8 统计分析
3 结果
3.1 肝豆灵对铜负荷诱导的HUVECs凋亡的影响
3.2 肝豆灵对铜负荷诱导的HUVECs内 PERK、p-eIF2α、CHOP mRNA表达的影响
3.3 肝豆灵对铜负荷诱导的HUVECs内 PERK、p-eIF2α、CHOP蛋白表达的影响
3.4 肝豆灵对铜负荷诱导的HUVECs内 caspase-3 活性的影响
4 讨论
4.1 实验对照药物的选择
4.2 内质网应激PERK信号通路相关指标选择的意义
4.3 肝豆灵抑制铜负荷HUVECs凋亡的疗效分析
4.4 肝豆灵抑制铜负荷HUVECs凋亡的机制分析
5 结论
参考文献
综述一 PERK在内质网应激中的作用研究进展
参考文献
综述二 脑血管内膜损伤及保护机制研究进展
参考文献
个人简介
攻读学位期间发表论文情况
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]大黄素对缺氧条件下人脐静脉内皮细胞焦亡的影响[J]. 王凯,施思,雷少青,夏中元. 中国中医急症. 2018(12)
[2]姜黄素类组分通过下调TLR4/NF-κB通路抑制LPS诱导的血管内皮细胞损伤[J]. 周银霞,张崇,傅海珍,张晓斐,李承军. 中南药学. 2018(11)
[3]黄连素对2型糖尿病大鼠胸主动脉PI3K/Akt/eNOS信号通路的影响[J]. 封芬,谭安雄,邓集湘,周斌. 中国当代医药. 2018(30)
[4]丹参酮ⅡA对硫酸吲哚酚诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的影响[J]. 许玲玲,鲁明军,郭涛,苏楠,王敏,吴琳英,罗福全,耿庆山,黄伟青. 中国老年学杂志. 2018(20)
[5]黄连素对冠心病大鼠血管内皮细胞损伤的保护机制研究[J]. 曹雪明,朱娜. 中医药学报. 2018(05)
[6]丹红注射液对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑血管内皮损伤的保护作用[J]. 罗霞,胡彬,王欣玲,秦桂芳,吴胜英. 中国中医急症. 2018(09)
[7]桂郁金多糖对H2O2致人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用及机制[J]. 俞献文,唐丽清,覃琴,冯柏林,杨秀芬. 中国实验方剂学杂志. 2018(23)
[8]抗磷脂抗体引起血管内皮细胞功能紊乱的机制及其病理生理意义[J]. 邵钫钰,冯娟,王宪. 生理科学进展. 2018(03)
[9]2016年安徽省居民死因分析[J]. 贺琴,邢秀雅,李蕊,戴丹,陈叶纪. 安徽预防医学杂志. 2018(03)
[10]大黄提取物对脂多糖诱导的内皮细胞的保护作用研究[J]. 杨舟鑫,郭冬阳,蔡国龙. 浙江中西医结合杂志. 2018(05)
硕士论文
[1]桂郁金挥发油和吉马酮对损伤血管内皮细胞的保护作用及机制研究[D]. 陈琼芳.广西中医药大学 2017
[2]莪术醇提物对PC12细胞和HUVECs的保护作用及其机制研究[D]. 黄瑀莘.广西医科大学 2016
[3]肝豆灵对Wilson病患者脑血流动力学和血管损伤因子及TX小鼠血管损伤病理研究[D]. 江海林.安徽中医药大学 2016
[4]镉经内质网应激途径诱导鸡肝细胞自噬的机制[D]. 李楠.东北农业大学 2014
本文编号：2919726
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