黄芪生脉饮中多糖水解单糖指纹图谱的研究
发布时间：2020-12-16 16:19
为了建立黄芪生脉饮（Huangqi Shengmai decoction,HSD）中多糖水解单糖的高效液相色谱指纹图谱,对其质量标准的建立提供理论支持,用三氟乙酸（Trifluoroacetic acid, TFA）对HSD多糖提取物进行水解和PMP（1-phenyl-3-methy-5-pyrazolone）衍生化处理,建立高效液相色谱-紫外法（HPLC-UV）测定多糖水解衍生物,并对其进行方法学考察。采用"中药指纹图谱相似度评价系统"软件,评价分析10个不同批次的HSD中多糖水解单糖的相似度。得到最佳TFA水解浓度为2 mol/L,总多糖样品5.0 mg时,PMP衍生化条件为PMP用量400μL,反应时间80 min。建立的色谱指纹图谱精密度、重复性和稳定性的RSD值均小于5%,各批次的相似度均在0.990以上,符合指纹图谱测定要求,可以用于HSD中多糖水解单糖质量的评价。
【文章来源】：浙江工业大学学报. 2020年03期 北大核心
【文章页数】：7 页
【部分图文】：
不同TFA浓度水解对黄芪生脉饮多糖指纹图谱共有峰面积之和的影响(n=3)
在衍生化反应的过程中,反应时间会对衍生化反应的程度产生较大影响。从图2可知:随着衍生化反应时间的延长,主要共有特征峰的峰面积之和呈先升高后降低的趋势。随着衍生化反应时间从30 min延长至100 min,共有峰面积和逐渐升高,当衍生化反应时间达到80 min时,各主要色谱峰的共有峰面积之和达到最大值,即可反应完全。当衍生化反应时间超过80 min后,随着反应时间的继续增加,各主要色谱峰的峰面积之和反而下降,说明在这种情况下,反应时间的延长并不能有利于衍生化反应的充分进行,可能是由于过长的衍生化反应时间导致了一些不明副产物的生成,从而导致各特征峰的共有峰面积之和下降。因此可确定衍生化最佳反应时间为80 min。相比于已经报道过的文献[4]中衍生化时间为100 min,本实验(80 min)减少了操作时间,提升了工作效率。2) PMP衍生化试剂使用量的筛选
在衍生化反应的过程中,衍生化试剂PMP的使用量同样会对衍生化反应的程度产生一定影响。由图3可知:随着衍生化试剂使用量的增加,主要共有特征峰的峰面积之和呈现先升高后降低的趋势。当衍生化试剂的使用量高于400 μL时,随着PMP使用量的继续增加,各主要色谱峰的峰面积之和反而下降,说明在这种情况下,PMP用量的增大影响了衍生化反应的充分进行,可能是由于过量的衍生化试剂导致反应过程中副产物的生成,各特征峰的共有峰面积之和下降。因此可确定当总多糖样品为5.0 mg时,衍生化试剂PMP使用量为400 μL时衍生化反应效果较好。传统的衍生化反应过程中[14],通常使用过量的PMP,而强酸性溶液中含有碱性基团的PMP,由于PMP的质子化,很难在高效液相色谱分析之前被氯仿完全萃取。因此当总多糖样品为5.0 mg时,衍生化试剂PMP的使用量为400 μL不仅满足所有衍生物峰面积之和最大,且检测灵敏度最高,一定程度上减少了溶剂的使用量,符合现代绿色化学的理念。2.2 色谱条件的优化
【参考文献】：
期刊论文
[1]黄芪心血管药理作用研究进展[J]. 姚红旗,侯雅竹,王贤良,赵志强,毛静远. 河南中医. 2019(02)
[2]抗菌肽Sublancin与黄芪多糖对免疫抑制小鼠免疫功能调节作用的比较分析[J]. 尚丽君,杨天任,于海涛,黄烁,曾祥芳,谯仕彦. 畜牧兽医学报. 2019(02)
[3]黄芪多糖对心肌缺血再灌注损伤大鼠的保护作用[J]. 贺帅,刘欣媛,齐琦,马曌子,姜佳慧,贾傲,刘艳. 现代预防医学. 2018(21)
[4]中药黄芪治疗心血管疾病的临床药理作用研究分析[J]. 陈桃灵. 北方药学. 2018(11)
[5]中药及其活性成分治疗冠心病的研究进展[J]. 刘怡,李露,王萍,如扎·哈布都拉,孟瑶,依孜提·帕力哈提,张丽娟,聂继红. 新疆中医药. 2018(05)
[6]多糖色谱指纹图谱的研究方法进展[J]. 李贝贝,卢燕. 药学研究. 2018(01)
[7]黄芪生脉速溶片的制备和评价[J]. 杨燕,沈悦敏,徐友江,单伟光. 浙江工业大学学报. 2017(01)
[8]生脉饮（党参方）中5-羟甲基糠醛的分离及其来源探究[J]. 颜继忠,陈岑,楚楚,李行诺,吴琼琼. 浙江工业大学学报. 2015(04)
[9]酶解-微波法提取黄芪多糖的工艺研究[J]. 董玲玲,黄鑫,齐阳光,冯海. 浙江工业大学学报. 2011(05)
[10]黄芪多糖对大鼠心肌缺血保护作用及其机制研究[J]. 闵清,白育庭,劳超,蔡飞,余薇,任平. 时珍国医国药. 2011(04)
本文编号：2920437
【文章来源】：浙江工业大学学报. 2020年03期 北大核心
【文章页数】：7 页
【部分图文】：
不同TFA浓度水解对黄芪生脉饮多糖指纹图谱共有峰面积之和的影响(n=3)
在衍生化反应的过程中,反应时间会对衍生化反应的程度产生较大影响。从图2可知:随着衍生化反应时间的延长,主要共有特征峰的峰面积之和呈先升高后降低的趋势。随着衍生化反应时间从30 min延长至100 min,共有峰面积和逐渐升高,当衍生化反应时间达到80 min时,各主要色谱峰的共有峰面积之和达到最大值,即可反应完全。当衍生化反应时间超过80 min后,随着反应时间的继续增加,各主要色谱峰的峰面积之和反而下降,说明在这种情况下,反应时间的延长并不能有利于衍生化反应的充分进行,可能是由于过长的衍生化反应时间导致了一些不明副产物的生成,从而导致各特征峰的共有峰面积之和下降。因此可确定衍生化最佳反应时间为80 min。相比于已经报道过的文献[4]中衍生化时间为100 min,本实验(80 min)减少了操作时间,提升了工作效率。2) PMP衍生化试剂使用量的筛选
在衍生化反应的过程中,衍生化试剂PMP的使用量同样会对衍生化反应的程度产生一定影响。由图3可知:随着衍生化试剂使用量的增加,主要共有特征峰的峰面积之和呈现先升高后降低的趋势。当衍生化试剂的使用量高于400 μL时,随着PMP使用量的继续增加,各主要色谱峰的峰面积之和反而下降,说明在这种情况下,PMP用量的增大影响了衍生化反应的充分进行,可能是由于过量的衍生化试剂导致反应过程中副产物的生成,各特征峰的共有峰面积之和下降。因此可确定当总多糖样品为5.0 mg时,衍生化试剂PMP使用量为400 μL时衍生化反应效果较好。传统的衍生化反应过程中[14],通常使用过量的PMP,而强酸性溶液中含有碱性基团的PMP,由于PMP的质子化,很难在高效液相色谱分析之前被氯仿完全萃取。因此当总多糖样品为5.0 mg时,衍生化试剂PMP的使用量为400 μL不仅满足所有衍生物峰面积之和最大,且检测灵敏度最高,一定程度上减少了溶剂的使用量,符合现代绿色化学的理念。2.2 色谱条件的优化
【参考文献】：
期刊论文
[1]黄芪心血管药理作用研究进展[J]. 姚红旗,侯雅竹,王贤良,赵志强,毛静远. 河南中医. 2019(02)
[2]抗菌肽Sublancin与黄芪多糖对免疫抑制小鼠免疫功能调节作用的比较分析[J]. 尚丽君,杨天任,于海涛,黄烁,曾祥芳,谯仕彦. 畜牧兽医学报. 2019(02)
[3]黄芪多糖对心肌缺血再灌注损伤大鼠的保护作用[J]. 贺帅,刘欣媛,齐琦,马曌子,姜佳慧,贾傲,刘艳. 现代预防医学. 2018(21)
[4]中药黄芪治疗心血管疾病的临床药理作用研究分析[J]. 陈桃灵. 北方药学. 2018(11)
[5]中药及其活性成分治疗冠心病的研究进展[J]. 刘怡,李露,王萍,如扎·哈布都拉,孟瑶,依孜提·帕力哈提,张丽娟,聂继红. 新疆中医药. 2018(05)
[6]多糖色谱指纹图谱的研究方法进展[J]. 李贝贝,卢燕. 药学研究. 2018(01)
[7]黄芪生脉速溶片的制备和评价[J]. 杨燕,沈悦敏,徐友江,单伟光. 浙江工业大学学报. 2017(01)
[8]生脉饮（党参方）中5-羟甲基糠醛的分离及其来源探究[J]. 颜继忠,陈岑,楚楚,李行诺,吴琼琼. 浙江工业大学学报. 2015(04)
[9]酶解-微波法提取黄芪多糖的工艺研究[J]. 董玲玲,黄鑫,齐阳光,冯海. 浙江工业大学学报. 2011(05)
[10]黄芪多糖对大鼠心肌缺血保护作用及其机制研究[J]. 闵清,白育庭,劳超,蔡飞,余薇,任平. 时珍国医国药. 2011(04)
本文编号：2920437
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