垂盆草介导Sirt1-AMPK-LXR信号通路改善二甲基亚硝胺所致肝纤维化作用机制的研究

发布时间：2020-12-24 01:19

　　目的:肝纤维化是由多种致病因素引起的肝内结缔组织发育不良的病理过程,肝纤维化的过程长期持续就会发展成肝硬化。在肝纤维化过程中,其特征是肝星状细胞和其他细胞外基质细胞的激活。本实验采用二甲基亚硝胺建立慢性肝纤维化体内模型和活化肝星状细胞体外实验,探究垂盆草（Sedum sarmentosum Bunge,SS）改善肝纤维化进程、脂质沉积、细胞凋亡以及炎症因子的作用,并分析其围绕Sirt1-AMPK-LXR信号通路的调控机制。方法:体内实验中,取Wistar雄性大鼠随机分为五组,每组六只,即为正常组、DMN组、垂盆草提取物低剂量组（100mg/kg）、垂盆草提取物高剂量组（300mg/kg）和扶正化瘀阳性对照组（2g/kg）。DMN组与各药物治疗组每周连续三次腹腔注射1%DMN（2ml/kg）诱导肝纤维化;造模的同时各治疗组分别灌胃给予垂盆草提取物（100或300mg/kg）或扶正化瘀（2g/kg）,每天一次,连续5周。在末次给药6h后,将动物安乐死,收集血液和肝组织。利用试剂盒检测血清中丙氨酸氨基转氨酶（ALT）和天冬氨酸氨基转氨酶（AST）的水平。利用H&E,Masson染色和... 

【文章来源】：延边大学吉林省 211工程院校

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 绪论
第二章 实验方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验仪器
        2.1.2 实验试剂
    2.2 实验方法
        2.2.1 垂盆草的提取方法
        2.2.2 细胞培养
        2.2.3 动物饲养管理
        2.2.4 生化指标的测定
        2.2.5 H&E染色
        2.2.6 Masson三色胶原染色
        2.2.7 免疫组化实验
        2.2.8 Western blot实验
        2.2.9 PCR实验
        2.2.10 肝星状细胞荧光实验
    2.3 统计学处理
第三章 实验结果
    3.1 垂盆草提取物对大鼠DMN诱导的肝纤维化的保护作用
    3.2 垂盆草提取物对调节纤维化标志物表达的影响,包括α-平滑肌蛋白,基质金属蛋白酶1和胶原蛋白I
    3.3 垂盆草提取物对DMN诱导的SREBP-1,Fasn,ACCa的蛋白表达的影响
    3.4 垂盆草提取物对DMN诱导的凋亡因子的影响
    3.5 垂盆草提取物对DMN诱导的Caspase-1,TNFα表达的影响
    3.6 垂盆草提取物对DMN介导的SIRT1-AMPK-LXR信号通路的影响
    3.7 垂盆草提取物对活化的HSC-T6细胞和LX2细胞中纤维化标志物的表达的影响
    3.8 垂盆草提取物对TGF-β刺激活化的HSC-T6细胞和LX2细胞中Sirt1,LXR表达和AMPK磷酸化的影响
    3.9 垂盆草提取物对活化的HSC-T6细胞和LX2细胞中Sirt1-AMPK-LXR信号传导组分的影响
第四章 讨论
参考文献
附录A
谢辞



本文编号：2934699