鸡豆黄素A对MPP + 诱导PC12细胞凋亡的保护作用
发布时间：2020-12-26 03:24
目的观察鸡豆黄素A（Bioch A）对1-甲基-4-苯基吡啶离子（MPP+）诱导的PC12细胞的凋亡是否有保护作用。方法用MTT法检测MPP+对PC12细胞的毒性作用和Bioch A的最适药物浓度,为后续实验筛出诱导细胞凋亡的MPP+剂量和恰当的Bioch A剂量。常规培养的PC12细胞被分为:Control组、MPP+（1μmol/L）组、Bioch A（1.25μmol/L）+MPP+组、Bioch A（2.5μmol/L）+MPP+组、Bioch A（5μmol/L）+MPP+组、雌二醇（E2）（0.1μmol/L）+MPP+组。DCFH-DA探针被用于活性氧（ROS）的检测;Annexin V-FITC/PI双染法被用作细胞凋亡百分比的测定;cleaved Caspase-3和cleaved Caspase-9的表达水平采用Western blot法检测。结果 MPP+模型组较Con...
【文章来源】：安徽医科大学学报. 2020年08期 北大核心
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
Bioch A对MPP+诱导的PC12细胞ROS表达的影响 ( x ˉ ±s,n=3)
中枢退行性疾病与神经元功能的丧失有一定关联,PD患者的黑质致密部80%的DA能神经元丧失了正常的功能。近年来,外源性的神经毒素诱导形成的PD细胞模型已成为PD发病机制重要的研究手段[8]。来源于大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤的PC12细胞株,具有神经细胞的特性, 且可稳定传代。MPP+是一种神经毒素, 能够引起神经细胞的氧化应激,因此可作为诱导剂为PD的发病机制研究制备细胞模型[9]。MPP+可以直接被DA转运蛋白有选择性的转运至DA能神经元,使神经元线粒体功能出现障碍,进而导致细胞凋亡的出现[10]。本实验采用MPP+刺激PC12细胞凋亡建立体外PD模型,观察 Bioch A 对MPP+刺激的PC12细胞凋亡的作用。不同浓度MPP+处理细胞,结果显示1 μmol/L MPP+处理细胞能引起大约50%细胞凋亡,因此本实验选用1 μmol/L MPP+用于后续造模。图3 Western Blot检测cleaved Caspase-3和cleaved Caspase-9蛋白的表达 ( x ˉ ±s,n=3)
图2 细胞流式检测Bioch A对MPP+诱导的PC12细胞凋亡的影响 ( x ˉ ±s,n=3)氧化应激与许多人类变性疾病有关, 如癌症、动脉粥样硬化以及神经退行性病变等,近年的研究[11]表明氧化应激与PD的发生发展密不可分。ROS增加是氧化应激的主要标志,在正常的机体或细胞内,ROS 总是与内在的抗氧化系统处于动态平衡中。当受到外界刺激时,平衡被破坏,从而产生氧化应激[12]。在本实验中,Bioch A预处理能够有效抑制MPP+组中的ROS的升高。此结果提示Bioch A可以减轻PC12细胞中MPP+诱导的氧化应激。此外,由于ROS作为凋亡启动的一个重要条件,所以Bioch A也可能调节了细胞的凋亡过程。
【参考文献】：
期刊论文
[1]氧化应激与帕金森病[J]. 朱羽婷,朱向阳,周永,张冬梅. 中国实用神经疾病杂志. 2019(11)
[2]神经元凋亡与Caspase家族及细胞周期研究进展[J]. 刘春华,刘捷. 人民军医. 2018(07)
[3]虫草素抑制帕金森病细胞凋亡的caspase激活途径研究[J]. 姜新,张鑫,顾欣霞,唐亮,樊逸云,余伯成,葛晓群. 沈阳药科大学学报. 2017(10)
[4]帕金森病细胞模型及实验研究[J]. 陈璐,张丽慧,张家凤,陈耀华. 健康研究. 2013(03)
本文编号：2938940
【文章来源】：安徽医科大学学报. 2020年08期 北大核心
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
Bioch A对MPP+诱导的PC12细胞ROS表达的影响 ( x ˉ ±s,n=3)
中枢退行性疾病与神经元功能的丧失有一定关联,PD患者的黑质致密部80%的DA能神经元丧失了正常的功能。近年来,外源性的神经毒素诱导形成的PD细胞模型已成为PD发病机制重要的研究手段[8]。来源于大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤的PC12细胞株,具有神经细胞的特性, 且可稳定传代。MPP+是一种神经毒素, 能够引起神经细胞的氧化应激,因此可作为诱导剂为PD的发病机制研究制备细胞模型[9]。MPP+可以直接被DA转运蛋白有选择性的转运至DA能神经元,使神经元线粒体功能出现障碍,进而导致细胞凋亡的出现[10]。本实验采用MPP+刺激PC12细胞凋亡建立体外PD模型,观察 Bioch A 对MPP+刺激的PC12细胞凋亡的作用。不同浓度MPP+处理细胞,结果显示1 μmol/L MPP+处理细胞能引起大约50%细胞凋亡,因此本实验选用1 μmol/L MPP+用于后续造模。图3 Western Blot检测cleaved Caspase-3和cleaved Caspase-9蛋白的表达 ( x ˉ ±s,n=3)
图2 细胞流式检测Bioch A对MPP+诱导的PC12细胞凋亡的影响 ( x ˉ ±s,n=3)氧化应激与许多人类变性疾病有关, 如癌症、动脉粥样硬化以及神经退行性病变等,近年的研究[11]表明氧化应激与PD的发生发展密不可分。ROS增加是氧化应激的主要标志,在正常的机体或细胞内,ROS 总是与内在的抗氧化系统处于动态平衡中。当受到外界刺激时,平衡被破坏,从而产生氧化应激[12]。在本实验中,Bioch A预处理能够有效抑制MPP+组中的ROS的升高。此结果提示Bioch A可以减轻PC12细胞中MPP+诱导的氧化应激。此外,由于ROS作为凋亡启动的一个重要条件,所以Bioch A也可能调节了细胞的凋亡过程。
【参考文献】：
期刊论文
[1]氧化应激与帕金森病[J]. 朱羽婷,朱向阳,周永,张冬梅. 中国实用神经疾病杂志. 2019(11)
[2]神经元凋亡与Caspase家族及细胞周期研究进展[J]. 刘春华,刘捷. 人民军医. 2018(07)
[3]虫草素抑制帕金森病细胞凋亡的caspase激活途径研究[J]. 姜新,张鑫,顾欣霞,唐亮,樊逸云,余伯成,葛晓群. 沈阳药科大学学报. 2017(10)
[4]帕金森病细胞模型及实验研究[J]. 陈璐,张丽慧,张家凤,陈耀华. 健康研究. 2013(03)
本文编号：2938940
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