白杨素经ROS介导的信号通路抑制LPS诱导的细胞炎症反应

发布时间：2020-12-27 00:21

　　目的:探讨白杨素抑制LPS诱导的细胞炎症反应的分子机制。方法:使用不同浓度的白杨素处理RAW264.7细胞24 h后,再用LPS刺激细胞后运用CCK-8法检测RAW264.7细胞活力,并筛选白杨素对RAW264.7细胞活性的安全剂量范围;运用Western blotting和RT-PCR检测白杨素对LPS诱导RAW264.7细胞内iNOS和COX-2蛋白和mRNA表达的影响,确定白杨素发挥抗炎作用的有效剂量范围;利用抗体芯片筛选白杨素对LPS诱导RAW264.7细胞炎症相关信号的变化,从而初步确定白杨素发挥抗炎作用的主要通路;ELISA法检测白杨素对LPS诱导RAW264.7细胞炎症因子及炎症介质TNF-α、IL-6、MCP-1和NO释放的影响;Western blotting检测白杨素对LPS诱导的RAW264.7细胞PI3K-AKT-mTOR、JAK-STAT及MAPK信号通路活化的影响。激光共聚焦显微镜观察白杨素对LPS诱导RAW264.7细胞STAT-1和STAT-3转录因子入核的影响。利用活性氧荧光探针观察白杨素对LPS诱导RAW264.7细胞内ROS的生成的影响;利用ROS... 

【文章来源】：皖南医学院安徽省

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

1白杨素的化学结构式

别作为RAW264.7细胞实验的低、中、高剂量浓度。图 1.1.1 白杨素的化学结构式图1.1.2 白杨素对RAW264.7细胞活力影响（“**”为P<0.01 vs. Control, n=5）

21图1.2.1 不同浓度白杨素对RAW264.7细胞炎症蛋白iNOS 和 COX-2表达的影响（“*”为P<0.05,“**”为P<0.01 vs. Control, n=5）图1.2.2 白杨素对LPS诱导RAW264.7细胞炎症蛋白iNOS和COX-2表达的影响（“**”为P<0.01 vs. LPS Group, n=3）

【参考文献】：
期刊论文
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[2]炎症与肿瘤的关系研究进展[J]. 范丽梅,柳昀熠,潘钰,邓颖,徐金华.  江汉大学学报(自然科学版). 2016(05)
[3]活性氧的生成与健康和疾病关系研究进展[J]. 李兴太,张春英,仲伟利,高明波.  食品科学. 2016(13)
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[5]甘草总黄酮及其成分体外抗炎活性及机制研究[J]. 杨晓露,刘朵,卞卡,章丹丹.  中国中药杂志. 2013(01)
[6]ROS介导的自噬及其在相关疾病中的作用[J]. 尤寿江,石际俊,张艳林,刘春风.  中国病理生理杂志. 2011(01)
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硕士论文
[1]NOX2介导杨梅苷抑制LPS诱导的炎症反应[D]. 冯遵永.皖南医学院 2016
[2]小檗碱通过SIRT1途径抑制巨噬细胞炎症反应的机制研究[D]. 徐传翀.南京中医药大学 2016



本文编号：2940728