中药饮片中微生物种类的快速检测技术研究

发布时间：2020-12-28 04:34

　　中药饮片在生长环境、采收加工、运输存储等过程中都容易携带或引入大量微生物,影响中药材的质量稳定性。中药饮片中的微生物种类的检测,目前是按照2015版《中国药典》四部通则中“1105非无菌产品微生物限度检查:微生物计数法”、“1106非无菌产品微生物限度检查:控制菌检查法”及“1107非无菌药品微生物限度标准”中要求执行。传统培养法存在检测时间长、准确率差、效率低、工作量大等缺点,并且由于微生物本身的特性,大部分微生物无法在实验室条件下培养。同时,药典中微生物限度标准只规定研粉口服用贵细饮片、直接口服及泡服饮片不得检出沙门菌/10 g,耐胆盐革兰阴性菌应小于104cfu/1 g,而没有明确规定其他中药饮片及其限度标准。因此,研究中药饮片中微生物种类的快速检测技术,将其应用于特定中药饮片样本的检测,获得其微生物群体信息,不仅对中药饮片的微生物污染风险评估具有重要意义,还可为中药饮片中微生物的质量控制标准的制定提供参考数据。本文将高通量基因检测技术应用于中药饮片中微生物种类的检测,不依赖微生物的分离培养而直接对微生物DNA进行基因检测,大大缩短了检测时间,同时可获得微生物的群体构成和多样性。... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２．１样本添加示意图??

２．４．２中药饮片中微生物种类检测结果??２．４．２．１每种饮片中检出的微生物种类数量??对１１种中药饮片的微生物检测结果进行统计分析（见图２．４），郁金中的微??生物种类数量最多，有１１８种；其次是山药和白芍，山药中有６８种微生物，白??芍中有５２种微生物；麦冬和醋延胡索中检测到的微生物种类数量最少，均为４??种；玄参中微生物种类数量也较少，为６种。由此可见，饮片中微生物检出的种??类数量与饮片不同的来源部位（根、茎、花、果实）相关性不大，而与具体的饮??片种类相关。??１４０?１??１１８??１２０?■??ｉ?１００??＾?８０?ｊ?Ｉ?６８??＾?６０?ｊ?５２?Ｉ?■??Ｉ?４０?｜?３：?Ｉ?２８?Ｉ?２８??３?＂〇，?Ｉ?１，１，?－，?Ｉ?１，１，?Ｍ?，?■?■，?Ｍ??中药饮片榉本??图２．４中药饮片中微生物数量统计??Ｆｉｇｕｒｅ?２．４?Ｔｈｅ?ｎｕｍｂｅｒ?ｏｆ?ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ?ｉｎ?ＣＨＭ??２１??

２高通量基因微阵列方法检测中药饮片中的微生物??ｂｐ?Ｍ?１?２?３?４?５?６?７?８?９?１０?１?１??图２．３中药饮片ＤＮＡ电泳检测结果??Ｆｉｇｕｒｅ?２．３?Ｔｈｅ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ＤＮＡ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ??Ｍ：?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ；?１：菊花；２：金银花；３：砂仁；４：山药；５：麦冬；６：浙贝母；７：醋??延胡索；８：玄参；９：白芍；１０：白术；１１：郁金??２．４．２中药饮片中微生物种类检测结果??２．４．２．１每种饮片中检出的微生物种类数量??对１１种中药饮片的微生物检测结果进行统计分析（见图２．４），郁金中的微??生物种类数量最多，有１１８种；其次是山药和白芍，山药中有６８种微生物，白??芍中有５２种微生物；麦冬和醋延胡索中检测到的微生物种类数量最少，均为４??种；玄参中微生物种类数量也较少，为６种。由此可见，饮片中微生物检出的种??类数量与饮片不同的来源部位（根、茎、花、果实）相关性不大，而与具体的饮??片种类相关。??１４０?１??１１８??１２０?■??ｉ?１００??＾?８０?ｊ?Ｉ?６８??＾?６０?ｊ?５２?Ｉ?■??Ｉ?４０?｜?３：?Ｉ?２８?Ｉ?２８??３?＂〇，?Ｉ?１，１，?－，?Ｉ


本文编号：2943132