川续断皂苷Ⅵ通过抑制破骨细胞生成来保护胶原诱导型关节炎引起的骨破坏

发布时间：2020-12-29 23:46

　　背景及目的:类风湿性关节炎（Rheumatoid Arthritis,RA）是一种常见的自身免疫性疾病,在病程早期,关节周围首先会出现炎性细胞浸润,进而发展为骨侵蚀,导致不可逆的关节破坏。破骨细胞在RA关节骨侵蚀的病理过程中发挥重要的作用。因此,靶向破骨细胞来保护骨质的药物,有可能成为RA治疗中的可行性方案。川续断皂苷Ⅵ（AVI）属于三萜皂苷类成分,为川续断的主要活性成分,有研究表明其能促进成骨细胞的增殖与分化,但是对于破骨细胞的影响以及能否通过抑制破骨细胞形成与功能来改善相关骨破坏疾病未见报道。本研究通过建立体外RANKL诱导破骨细胞的培养体系和体内胶原诱导型关节炎的动物模型,共同探讨AVI对破骨细胞分化与活化的影响及其潜在的分子机制。方法:1.在体内,建立胶原诱导型关节炎小鼠模型,以甲氨喋呤作为阳性对照药,通过足肿胀评分考察AVI对小鼠关节肿胀的影响;Micro-CT和HE染色考察AVI对关节炎小鼠关节破坏的影响;ELISA检测AVI对小鼠血清中TNF-α和IL-1β表达的影响;TRAP染色、q-PCR和western-blot考察AVI对关节炎小鼠关节组织中破骨细胞生成以及相关基... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：86 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１川续断皂苷ＶＩ对胶原诱导性关节炎小鼠关节炎免疫炎症的影响第１大采川今＿－?ＩＩ??１．

为了排除药物抑制破骨细胞生成的效应是药物本身非特异性细胞毒性作用??所致，我们考察了?ＡＶＩ在０－４０ｐＭ浓度对破骨前体细胞ＢＭＭｓ?７２ｈ的细胞毒性??作用。实验结果如下图２－１所示，０－４０（ａＭ浓度的ＡＶＩ在７２ｈ内对ＢＭＭｓ无明??显的细胞毒性作用。??３４??

Ｉ?ｉｉｉｉｉｉ??〇?１?５?１０?２０?４０??ＡＶＩ?（｜ｉＭ）??图２－ｌ川续断皂苷ＶＩ对ＢＭＭｓ细胞活力的影响。ＢＭＭｓ细胞与５０ｎｇ／ｍｌ的Ｍ－ＣＳＦ和０、??Ｉ、５、１０、２０和４０ｐＭ川续断ｔｉｔＴＶｌ共同培养７２ｈ，通过ＣＣＫ８法测定ＢＭＭｓ细胞的生??＃中．。实验数据以均数±标准差（ｍｅａｎ?±?ＳＤ）表示，独立重复实验３次。＞?＜０．０５，?＜０．０１，??＜０．００１加药组ｖｓ正常对照组。??Ｆｉｇｕｒｅ２－１?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?Ａｓｐｅｒｏｓａｐｏｎｉｎ?ＶＩ?ｏｎ?ｃｅｌｌ?ｖｉａｂｉｌｉｔｙ?ｏｆ?ＢＭＭｓ?ｃｅｌｌｓ．?ＢＭＭｓ?ｃｅｌｌｓ?ｗｅｒｅ??ｉｎｃｕｂａｔｅｄ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｐｒｅｓｅｎｃｅ?ｏｆ?Ｍ－ＣＳＦ?（５０ｎｇ／ｍｌ）?ｗｉｔｈ?ｖａｒｙｉｎｇ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?Ａｓｐｅｒｏｓａｐｏｎｉｎ?ＶＩ?（０、１、５、??１０、２０?ａｎｄ?４０｜＿ｉＭ）?ｆｏｒ?７２ｈ，?ｔｈｅｎ?ｔｈｅ?ｓｕｒｖｉｖａｌ?ｒａｔｅ?ｏｆ?ＢＭＭｓ?ｃｅｌｌｓ?ｗｅｒｅ?ｄｅｔｅｃｔｅｄ?ｂｙ?ＣＣＫ８?ａｓｓａｙ．?Ｔｈｅ??ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｗｅｒｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ?ｉｎ?ｔｈｒｅｅ?ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ?ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．?Ｔｈｅ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ａｒｅ?ｔｈｅ?ｍｅａｎ?±??ＳＤ?＊／？＜０．０５


本文编号：2946563