代代花中有效成分的分离纯化、鉴定及其活性研究
发布时间：2020-12-30 21:13
代代（Citrus aurantium L.var.amara Engl）是芸香科柑桔亚属植物,为酸橙的变种,在我国福建、广东、四川、浙江等地均有种植。代代花为代代未成熟果实的干燥花蕾,又叫回青橙花、玳玳花、酸橙花,其幼果在民间常被作为枳实成药。民间有将代代花用于治疗胸腹满闷胀痛、气郁不舒、恶心呕吐、痰饮、胃下垂、脱肛、子宫脱垂等病症。经实验证实,代代花主要含有挥发油、黄酮类和生物碱类等化学成分。此外,代代花还含有强心苷和非强心苷等多种苷类化合物,同时含有丰富的维生素类、人体必需氨基酸、纤维类、香豆素类以及矿物质类等。近年来的药理研究发现代代花具有抗炎、抗氧化、抗菌、抗病毒、抗肿瘤、降血脂、免疫作用和促进胃肠动力等药理活性。本文借助传统天然产物分析技术并结合现代活性物质研究手段,从分离纯化、结构鉴定和药理作用及其机制评价三个层面对代代花活性部位进行了系统探究,主要结果如下:（1）采用三种肿瘤细胞（HepG2、MCF-7和H1299）和四种抗氧化检测体系（总还原力、DPPH、ABTS和FRAP）,对代代花醇提物及其五个极性部位进行了抗肿瘤和抗氧化能力的综合评价。实验结果显示,代代花醇提物...
【文章来源】：华南理工大学广东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：110 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
代代花药材及其饮片
华南理工大学硕士学位论文部位。等体积的氯仿混入余下溶液，振荡混匀，室温静置 4h，两相完全分层后，收层的氯仿部位。萃取 3-4 次后合并萃取液，回收氯仿，烘干浓缩液得到代代花氯仿。于氯仿萃取后余下溶液中加入等体积乙酸乙酯，振荡混匀后室温静置直至溶液充层，收集乙酸乙酯萃取液。萃取 3-4 次后汇集萃取液，旋转浓缩回收乙酸乙酯，烘缩液得到代代花乙酸乙酯部位。继续于余下溶液中加入等体积的萃取剂正丁醇，适荡摇匀，于室温静置 4h，待两相完全分层后，收集上层的正丁醇萃取液。萃取 3-萃取剂颜色很淡时，萃取液汇总后旋转浓缩回收试剂，得到代代花正丁醇部位。正萃取后余下溶液减压浓缩后得到代代花水相。
图 2-3 代代花醇提物及五个极性部位处理后的 HepG2 细胞形态Fig. 2-3 Shape of ethanol extract and five polar parts treated HepG2 cells5-FU 为尿嘧啶的氟化物，能显著抑制胸苷酸合成酶，可阻断脱氧尿苷酸甲基脱氧胸苷酸，干扰 DNA 合成[56]，故在实验室中常用作阳性对照物来对比评价肿瘤活性。图 2-3 显示 5-F(800μg/mL)作用肝癌细胞后，细胞数量大幅减少，细胞核固缩圆球状，贴壁性变差，悬浮有大量凋亡细胞。空白对照组细胞呈菱形居多且贴态优异。代代花样品作用于 HepG2 细胞 24h 之后，细胞形态和数量呈现不同化。其中正丁醇相抑制效果最为明显，细胞数量相较空白对照组有一定程度减大小不等，细胞间隔增大，细胞形态呈无规则形态或梭状。醇提物、石油醚相干预后的细胞数量部分减少，细胞多呈圆形和椭圆形，折光性下降，部分细胞现象。乙酸乙酯组细胞数量减少，部分细胞胞质回缩，细胞贴壁性变差，细胞多边形，部分细胞分裂成为细胞碎片并悬浮于培养基上。水相干预后的细胞形
【参考文献】：
期刊论文
[1]柑橘属植物果皮精油抑菌作用研究进展[J]. 崔佳韵,梁建芬. 粮油食品科技. 2018(01)
[2]黑果悬钩子化学成分及其PTP1B抑制活性的研究[J]. 古丽米热·阿力木,沈海涛,郭寒,徐文斌,葛娟,何大俊. 中草药. 2017(03)
[3]代代花的现代研究与思考[J]. 王婷,娄鑫,苗明三. 中医学报. 2017(02)
[4]代代花总黄酮对3T3-L1细胞增殖活性的影响[J]. 郝云芳,杨丽,姜建国. 现代食品科技. 2016(09)
[5]福寿草 代代花[J]. 商国懋,邓玉娟. 首都食品与医药. 2016(11)
[6]代代花中黄酮含量测定及其抗氧化功能研究[J]. 党磊,王小雪,张美姿,庞欣. 时珍国医国药. 2015(11)
[7]论饮食“补养、调养、助养”的营养学意义[J]. 彭欣,戴霞,秦林. 辽宁中医杂志. 2015(07)
[8]小茴香的化学、药理及临床应用[J]. 王婷,苗明三,苗艳艳. 中医学报. 2015(06)
[9]基于特征图谱表征的玳玳黄酮滴丸组分群同步释药特性评价[J]. 连赟芳,陈丹,蔡韦炜,林伊莉,曾华平,廖淑彬,陈强. 中草药. 2015(03)
[10]白茶中茶多酚提取工艺及抗氧化活性的研究[J]. 杨皓彬,杨娜,柏雪,欧阳秋芷,陆诗莹,蔡雪梅,王鸿飞. 中国食品学报. 2014(12)
博士论文
[1]DHA与槲皮素的抗炎作用及其对NFκB、MAPK信号通路影响的研究[D]. 司天雷.华中农业大学 2015
硕士论文
[1]1、菊花饮片的质量评价与标准研究 2、代代花总黄酮的提取及纯化工艺研究[D]. 苏浬.北京中医药大学 2015
[2]代代花中三种单体化合物的活性研究[D]. 赵海燕.华南理工大学 2011
[3]代代花化学成分的研究[D]. 杨丽.华南理工大学 2010
[4]枳实、枳壳色谱指纹图谱研究[D]. 赵宇.中南大学 2005
本文编号：2948309
【文章来源】：华南理工大学广东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：110 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
代代花药材及其饮片
华南理工大学硕士学位论文部位。等体积的氯仿混入余下溶液，振荡混匀，室温静置 4h，两相完全分层后，收层的氯仿部位。萃取 3-4 次后合并萃取液，回收氯仿，烘干浓缩液得到代代花氯仿。于氯仿萃取后余下溶液中加入等体积乙酸乙酯，振荡混匀后室温静置直至溶液充层，收集乙酸乙酯萃取液。萃取 3-4 次后汇集萃取液，旋转浓缩回收乙酸乙酯，烘缩液得到代代花乙酸乙酯部位。继续于余下溶液中加入等体积的萃取剂正丁醇，适荡摇匀，于室温静置 4h，待两相完全分层后，收集上层的正丁醇萃取液。萃取 3-萃取剂颜色很淡时，萃取液汇总后旋转浓缩回收试剂，得到代代花正丁醇部位。正萃取后余下溶液减压浓缩后得到代代花水相。
图 2-3 代代花醇提物及五个极性部位处理后的 HepG2 细胞形态Fig. 2-3 Shape of ethanol extract and five polar parts treated HepG2 cells5-FU 为尿嘧啶的氟化物，能显著抑制胸苷酸合成酶，可阻断脱氧尿苷酸甲基脱氧胸苷酸，干扰 DNA 合成[56]，故在实验室中常用作阳性对照物来对比评价肿瘤活性。图 2-3 显示 5-F(800μg/mL)作用肝癌细胞后，细胞数量大幅减少，细胞核固缩圆球状，贴壁性变差，悬浮有大量凋亡细胞。空白对照组细胞呈菱形居多且贴态优异。代代花样品作用于 HepG2 细胞 24h 之后，细胞形态和数量呈现不同化。其中正丁醇相抑制效果最为明显，细胞数量相较空白对照组有一定程度减大小不等，细胞间隔增大，细胞形态呈无规则形态或梭状。醇提物、石油醚相干预后的细胞数量部分减少，细胞多呈圆形和椭圆形，折光性下降，部分细胞现象。乙酸乙酯组细胞数量减少，部分细胞胞质回缩，细胞贴壁性变差，细胞多边形，部分细胞分裂成为细胞碎片并悬浮于培养基上。水相干预后的细胞形
【参考文献】：
期刊论文
[1]柑橘属植物果皮精油抑菌作用研究进展[J]. 崔佳韵,梁建芬. 粮油食品科技. 2018(01)
[2]黑果悬钩子化学成分及其PTP1B抑制活性的研究[J]. 古丽米热·阿力木,沈海涛,郭寒,徐文斌,葛娟,何大俊. 中草药. 2017(03)
[3]代代花的现代研究与思考[J]. 王婷,娄鑫,苗明三. 中医学报. 2017(02)
[4]代代花总黄酮对3T3-L1细胞增殖活性的影响[J]. 郝云芳,杨丽,姜建国. 现代食品科技. 2016(09)
[5]福寿草 代代花[J]. 商国懋,邓玉娟. 首都食品与医药. 2016(11)
[6]代代花中黄酮含量测定及其抗氧化功能研究[J]. 党磊,王小雪,张美姿,庞欣. 时珍国医国药. 2015(11)
[7]论饮食“补养、调养、助养”的营养学意义[J]. 彭欣,戴霞,秦林. 辽宁中医杂志. 2015(07)
[8]小茴香的化学、药理及临床应用[J]. 王婷,苗明三,苗艳艳. 中医学报. 2015(06)
[9]基于特征图谱表征的玳玳黄酮滴丸组分群同步释药特性评价[J]. 连赟芳,陈丹,蔡韦炜,林伊莉,曾华平,廖淑彬,陈强. 中草药. 2015(03)
[10]白茶中茶多酚提取工艺及抗氧化活性的研究[J]. 杨皓彬,杨娜,柏雪,欧阳秋芷,陆诗莹,蔡雪梅,王鸿飞. 中国食品学报. 2014(12)
博士论文
[1]DHA与槲皮素的抗炎作用及其对NFκB、MAPK信号通路影响的研究[D]. 司天雷.华中农业大学 2015
硕士论文
[1]1、菊花饮片的质量评价与标准研究 2、代代花总黄酮的提取及纯化工艺研究[D]. 苏浬.北京中医药大学 2015
[2]代代花中三种单体化合物的活性研究[D]. 赵海燕.华南理工大学 2011
[3]代代花化学成分的研究[D]. 杨丽.华南理工大学 2010
[4]枳实、枳壳色谱指纹图谱研究[D]. 赵宇.中南大学 2005
本文编号：2948309
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