吴茱萸质量标志物的研究
发布时间：2020-12-31 20:27
【目的】建立吴茱萸质量标志物（Q-Markers）的研究方法,确定其功效/毒性Q-Markers;建立相关Q-Markers的HPLC含测方法,为吴茱萸的质量控制提供依据。【方法】1.采用超高效液相-四级杆-飞行质谱（UPLC-Q-TOF/MS）对吴茱萸进行全成分分析。根据化合物的色谱保留、准确分子量、特征碎片离子等信息进行质谱解析,明确化学归属。2.应用中药血清药物化学研究方法,确定吴茱萸的入血成分。结合实验室前期的全成分分析、谱效关系研究结果,初步筛选出吴茱萸的功效与毒性成分,明确其药效物质基础,初步框定吴茱萸功效/毒性Q-Markers。3.引入网络药理学研究方法,以初步确定的吴茱萸Q-Markers作为网络药理学的研究对象,采用靶点预测及GO富集等技术发掘其镇痛、止呕与毒性作用的关键靶点,解析其主要作用通路与生物学过程,进而探讨吴茱萸成分-靶点-通路的网络关系,明晰其镇痛、止呕及毒性的作用机制,获得作用机制明确的Q-Markers。4.采用HPLC色谱指纹定性与多指标含量测定相结合的方法,对初步确定的吴茱萸Q-Markers进行可测性评价,建立主要Q-Markers的HPLC含...
【文章来源】：江西中医药大学江西省
【文章页数】：125 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
吴茱萸的负模式(A)和正模式(B)的总离子流图
3.2.1 生物碱类化合物的质谱解析通过对课题组已建立的吴茱萸化学成分数据库进行系统判别[27]，并根据质谱中化合物的结构特征和典型的碎片离子特征信息，从吴茱萸醇提取物中共测得生物碱类成分 45 个，包括吲哚类、喹诺酮类和糖苷类生物碱。吲哚类生物碱通常具有 6-5-6-6-6 五环结构，含有 3 个氮原子，在 ESI（+）模式下易发生 Retro Diels-Alder（PDA）裂解，以去氢吴茱萸碱为例，峰 37 的保留时间为 18.969 化学式为 C19H15N3O，准分子离子峰为 m/z 302.2[M+H]+，其二级质谱主要为一个碎片 m/z 286.0936，且为基峰。由图 1.2 推断的结果显示 m/z286.0936 的碎片为去氢吴茱萸碱脱掉-CH3，且去氢离子后形成一个完整结构为一共轭体系的离子，故此碎片较牢固，不易断裂形成子碎片，而导致去氢吴茱萸碱的二级质谱简单只有一个碎片离子 m/z 286.0936。
图 1.3 吴茱萸卡品碱的二级图谱和断裂途径Figure 1.3 MS/MS spectrum and proposed fragmenation pathways of Evocarpine3.2.2 柠檬苦素类化合物的质谱解析在正离子模式和负离子模式下，吴茱萸药材样品中检测到 8 个柠檬苦素类化合物。以化合物 47 和化合物 50 为例，其特征裂解途径如图 1.4 所示。在保留时间 29.32 min，正离子模式下给出明显的 m/z 471.2038 [M+H]+准分子离子峰。对m/z 471.2038 的[M+H]+准分子离子峰进行 MS 裂解分析，二级质谱给出了425.1978 和 161.0603 的碎片离子。425.1898 是母离子 471.1952 丢失一个羧基产生的特征离子碎片，与文献[27]报道的柠檬苦素（Limonin）的质谱数据相同，故推测化合物 50 为柠檬苦素。化合物47，在tR=23.520 min处检测到化学式为C26H30O8，m/z 485.1835 [M-H]-为其准分子离子峰。该成分在 MS2图中有 259.1359，423.1829，383.1521，365.1409和 166.0286，说明在质谱碰撞电压轰击下发生了 Diels-Alder 断裂，形成了特征
【参考文献】：
期刊论文
[1]中药质量标志物的概念、核心理论与研究方法[J]. 张铁军,白钢,刘昌孝. 药学学报. 2019(02)
[2]基于网络药理学的两面针干预炎症靶点预测及作用机制研究[J]. 邬国松,郑丽婷,马庆,韩正洲,詹若挺,陈蔚文,牛明. 中草药. 2019(03)
[3]基于OPLS分析的吴茱萸镇痛作用谱-效关系研究[J]. 陈洋,韦国兵,梁健,董伟,董嘉皓,李斐,杨武亮,陈海芳,袁金斌. 中华中医药杂志. 2019(02)
[4]橘核UPLC指纹图谱研究[J]. 郁林娜,付洋,程盛勇,鲁文琴,罗喜荣,杨军. 中药材. 2019(01)
[5]基于网络药理学的黄连干预2型糖尿病潜在靶点研究[J]. 罗婷婷,鲁媛,严诗楷,肖雪,郭姣. 中药材. 2019(01)
[6]基于网络药理学及ADME预测分析血脂灵片治疗血脂异常的Q-marker[J]. 郭锐,苏瑾,李志雄,张懂懂,国大亮,肖学凤. 中成药. 2019(01)
[7]中药网络药理学药效成分筛选与靶标预测的研究进展[J]. 刘志强,王博龙. 中成药. 2019(01)
[8]基于网络药理学方法分析金津玉液汤治疗2型糖尿病的机制及其治疗阿尔茨海默病的潜在性[J]. 孟贺,宫世强,刘明妍,魏敏杰. 中国新药杂志. 2019(01)
[9]HPLC双波长法同时测定白鲜皮中5种成分的含量[J]. 曹梦,唐中华,张衷华. 中药材. 2018(12)
[10]基于色谱技术的中药药效物质研究进展[J]. 刘洁,肖红斌. 药学学报. 2019(01)
博士论文
[1]P38丝裂原活化蛋白激酶途径介导钠激活钾离子通道（KNa）参与坐骨神经痛炎症机制的研究[D]. 王琨.东南大学 2017
[2]小半夏汤多靶点防治化疗性恶心呕吐作用机制研究[D]. 于功昌.山东中医药大学 2015
硕士论文
[1]基于“性—效—物三元论”及“谱—效关联分析”的疏风解毒胶囊药效物质基础研究[D]. 董亚楠.天津医科大学 2018
[2]咖啡酸和绿原酸抑制AGEs诱导的炎症反应[D]. 苏国莹.华南理工大学 2018
[3]脊髓PTP1B在糖尿病性神经病理性疼痛中的作用[D]. 赵吉元.兰州大学 2018
[4]止痒润肤霜治疗EGFR-TKI相关性皮疹的疗效观察[D]. 王家伟.北京中医药大学 2016
本文编号：2950261
【文章来源】：江西中医药大学江西省
【文章页数】：125 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
吴茱萸的负模式(A)和正模式(B)的总离子流图
3.2.1 生物碱类化合物的质谱解析通过对课题组已建立的吴茱萸化学成分数据库进行系统判别[27]，并根据质谱中化合物的结构特征和典型的碎片离子特征信息，从吴茱萸醇提取物中共测得生物碱类成分 45 个，包括吲哚类、喹诺酮类和糖苷类生物碱。吲哚类生物碱通常具有 6-5-6-6-6 五环结构，含有 3 个氮原子，在 ESI（+）模式下易发生 Retro Diels-Alder（PDA）裂解，以去氢吴茱萸碱为例，峰 37 的保留时间为 18.969 化学式为 C19H15N3O，准分子离子峰为 m/z 302.2[M+H]+，其二级质谱主要为一个碎片 m/z 286.0936，且为基峰。由图 1.2 推断的结果显示 m/z286.0936 的碎片为去氢吴茱萸碱脱掉-CH3，且去氢离子后形成一个完整结构为一共轭体系的离子，故此碎片较牢固，不易断裂形成子碎片，而导致去氢吴茱萸碱的二级质谱简单只有一个碎片离子 m/z 286.0936。
图 1.3 吴茱萸卡品碱的二级图谱和断裂途径Figure 1.3 MS/MS spectrum and proposed fragmenation pathways of Evocarpine3.2.2 柠檬苦素类化合物的质谱解析在正离子模式和负离子模式下，吴茱萸药材样品中检测到 8 个柠檬苦素类化合物。以化合物 47 和化合物 50 为例，其特征裂解途径如图 1.4 所示。在保留时间 29.32 min，正离子模式下给出明显的 m/z 471.2038 [M+H]+准分子离子峰。对m/z 471.2038 的[M+H]+准分子离子峰进行 MS 裂解分析，二级质谱给出了425.1978 和 161.0603 的碎片离子。425.1898 是母离子 471.1952 丢失一个羧基产生的特征离子碎片，与文献[27]报道的柠檬苦素（Limonin）的质谱数据相同，故推测化合物 50 为柠檬苦素。化合物47，在tR=23.520 min处检测到化学式为C26H30O8，m/z 485.1835 [M-H]-为其准分子离子峰。该成分在 MS2图中有 259.1359，423.1829，383.1521，365.1409和 166.0286，说明在质谱碰撞电压轰击下发生了 Diels-Alder 断裂，形成了特征
【参考文献】：
期刊论文
[1]中药质量标志物的概念、核心理论与研究方法[J]. 张铁军,白钢,刘昌孝. 药学学报. 2019(02)
[2]基于网络药理学的两面针干预炎症靶点预测及作用机制研究[J]. 邬国松,郑丽婷,马庆,韩正洲,詹若挺,陈蔚文,牛明. 中草药. 2019(03)
[3]基于OPLS分析的吴茱萸镇痛作用谱-效关系研究[J]. 陈洋,韦国兵,梁健,董伟,董嘉皓,李斐,杨武亮,陈海芳,袁金斌. 中华中医药杂志. 2019(02)
[4]橘核UPLC指纹图谱研究[J]. 郁林娜,付洋,程盛勇,鲁文琴,罗喜荣,杨军. 中药材. 2019(01)
[5]基于网络药理学的黄连干预2型糖尿病潜在靶点研究[J]. 罗婷婷,鲁媛,严诗楷,肖雪,郭姣. 中药材. 2019(01)
[6]基于网络药理学及ADME预测分析血脂灵片治疗血脂异常的Q-marker[J]. 郭锐,苏瑾,李志雄,张懂懂,国大亮,肖学凤. 中成药. 2019(01)
[7]中药网络药理学药效成分筛选与靶标预测的研究进展[J]. 刘志强,王博龙. 中成药. 2019(01)
[8]基于网络药理学方法分析金津玉液汤治疗2型糖尿病的机制及其治疗阿尔茨海默病的潜在性[J]. 孟贺,宫世强,刘明妍,魏敏杰. 中国新药杂志. 2019(01)
[9]HPLC双波长法同时测定白鲜皮中5种成分的含量[J]. 曹梦,唐中华,张衷华. 中药材. 2018(12)
[10]基于色谱技术的中药药效物质研究进展[J]. 刘洁,肖红斌. 药学学报. 2019(01)
博士论文
[1]P38丝裂原活化蛋白激酶途径介导钠激活钾离子通道（KNa）参与坐骨神经痛炎症机制的研究[D]. 王琨.东南大学 2017
[2]小半夏汤多靶点防治化疗性恶心呕吐作用机制研究[D]. 于功昌.山东中医药大学 2015
硕士论文
[1]基于“性—效—物三元论”及“谱—效关联分析”的疏风解毒胶囊药效物质基础研究[D]. 董亚楠.天津医科大学 2018
[2]咖啡酸和绿原酸抑制AGEs诱导的炎症反应[D]. 苏国莹.华南理工大学 2018
[3]脊髓PTP1B在糖尿病性神经病理性疼痛中的作用[D]. 赵吉元.兰州大学 2018
[4]止痒润肤霜治疗EGFR-TKI相关性皮疹的疗效观察[D]. 王家伟.北京中医药大学 2016
本文编号：2950261
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