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密蒙花滴眼液对去势兔干眼模型泪腺细胞凋亡相关因子PI3K、Akt、Caspase-9的干预作用

发布时间:2021-01-02 17:12
  目的通过建立去势兔干眼模型,观察密蒙花滴眼液对其泪腺细胞凋亡相关因子PI3K、Akt、Caspase-9的干预作用。方法将36只新西兰白兔随机分为A、B、C、D、E、F六组,每组6只,分别为:A组:空白对照组、B组:模型组、C组:1mg/ml密蒙花滴眼液、D组:1.5mg/ml密蒙花滴眼液、E组:3mg/ml密蒙花滴眼液、F组:阳性对照组。A、B组不予处理,C、D、E组分别予以密蒙花滴眼液1mg/ml、1.5mg/ml、3mg/ml局部滴眼,3 次/日;F 组予以 2mg/kg 丙酸睾酮注射液在兔大腿肌肉处注射,3 日/次。造模2月后,检测SIT证实去势兔干眼模型成模,然后开始给药,连续用药4周。实验过程中,D、F组各死亡1只实验动物。实验结束取泪腺组织送检,光镜下观察各组泪腺形态学改变,免疫组化检测各组泪腺组织中PI3K、Akt、Caspase-9的表达情况,qPCR法及Western Blot法检测各组泪腺组织中PI3K、Akt、Caspase-9 mRNA及其蛋白的相对表达情况。结果1.HE染色:模型组泪腺组织结构欠清晰,腺泡及泪腺上皮大小不一、排列紊乱,可见大量腺泡萎缩融合,有... 

【文章来源】:湖南中医药大学湖南省

【文章页数】:79 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
中文摘要
abstract
引言
第一部分 材料与方法
    1 实验材料
        1.1 实验动物
        1.2 实验药品
        1.3 实验试剂
        1.4 实验器材
    2 实验方法
        2.1 分组及给药
        2.2 去势兔干眼模型建立
        2.3 取材
        2.4 指标检测
    3 统计学处理
第一部分 结果
    1 泪液分泌试验(SIT)结果
    2 光镜下观察各组新西兰白兔泪腺结构
    3 免疫组化法检测泪腺Caspase-9、Akt、PI3K表达情况
        3.1 密蒙花滴眼液对泪腺Caspase-9表达的影响
        3.2 密蒙花滴眼液对泪腺PI3K表达的影响
        3.3 密蒙花滴眼液对泪腺Akt表达的影响
    4 qPCR检测泪腺Caspase-9、Akt、PI3KmRNA表达
        4.1 新西兰白兔泪腺Caspase-9、Akt、PI3K扩增曲线
        4.2 用药后第4周各组泪腺Caspase-9mRNA相对表达量
        4.3 用药后第4周各组泪腺PI3KmRNA相对表达量
        4.4 用药后第4周各组泪腺AktmRNA相对表达量
    5 Westernblot(WB)法检测泪腺Caspase-9、Akt、PI3K蛋白表达情况
        5.1 WB检测各组泪腺Caspase-9蛋白相对表达情况
        5.2 WB检测各组泪腺PI3K蛋白相对表达情况
        5.3 WB检测各组泪腺Akt蛋白相对表达情况
第三部分 分析与讨论
    1 中医对干眼的认识
    2 雄激素与干眼
        2.1 雄激素与干眼的关系
        2.2 密蒙花总黄酮具有拟雄激素效应
        2.3 雄激素受体途径与PI3K/Akt信号通路的关系
    3 密蒙花滴眼液防治干眼的可能作用机制
结论
致谢
参考文献
综述
    参考文献
攻读硕士学位期间科研奖励、发表论文及著作情况


【参考文献】:
期刊论文
[1]国际干眼新共识(TFOSDEWS Ⅱ)解读[J]. 邵毅.  眼科新进展. 2018(01)
[2]密蒙花颗粒剂对去势雄兔泪腺细胞凋亡因子Bax、Bcl-2、Fas和FasL的影响[J]. 欧阳云,彭俊,彭清华,谭涵宇,李文娟,吴权龙.  中国中西医结合杂志. 2017(07)
[3]雄激素受体基因多态性与男性不育相关性研究进展[J]. 周青,吴秋月,夏欣一,许豪勤.  中华男科学杂志. 2016(10)
[4]microRNA let-7a对人晶状体上皮细胞凋亡的调控及其在白内障中的作用[J]. 秦宇,赵江月,闵晓洁,罗文婷,李晶,吴欣蔚,刘佳,阎启昌,张劲松.  中国医科大学学报. 2015(04)
[5]线粒体靶向性肽SS-31对H2O2诱导人晶状体上皮细胞凋亡的保护作用[J]. 郭长艳,秦雪娇,吴晓莉,高雪,蔡可丽.  山东大学学报(医学版). 2015(08)
[6]JNK细胞通路在高压氧和过氧化氢诱导人晶状体上皮细胞凋亡中的作用[J]. 畅立斌,鲍永珍,黎晓新,肖林.  眼科新进展. 2014(10)
[7]菊花总黄酮对去势导致干眼症雄兔泪腺细胞Fas、FasL表达的影响[J]. 姚小磊,彭清华,陈启雷,唐勇华,钟茜.  国际眼科杂志. 2014(10)
[8]菊花总黄酮对去势导致雄兔干眼症泪腺细胞Bax、Bcl-2表达的影响[J]. 姚小磊,彭清华,陈启雷,唐勇华,钟茜.  湖南中医药大学学报. 2014(07)
[9]色素上皮衍生因子对氧诱导视网膜神经节细胞凋亡及Bcl-2表达的影响[J]. 王亚娜,高莎,沈玺.  眼科新进展. 2014(06)
[10]氧化应激与眼表疾病关系的研究进展[J]. 王雯婕,陈剑,王园园,刘小勇,张晓玲,曲艺欣,秦晓艳.  眼科新进展. 2014(06)

硕士论文
[1]一 帕比司他协同过表达hepaCAM抑制前列腺癌生长机制 二 HepaCAM调控PI3K-Akt/AR/DDR通路促进前列腺癌细胞凋亡[D]. 陈娥.重庆医科大学 2016



本文编号:2953317

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