黄地安消胶囊调控IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信号通路改善2型糖尿病胰岛素抵抗作用及机制研究
发布时间：2021-01-09 20:06
目的黄地安消胶囊为安徽中医药大学第一附属医院治疗2型糖尿病（T2DM）的特色医院制剂。处方由枇杷叶、葛根、麦冬、生地等六味中药组成,临床应用多年,疗效确切,但其对胰岛素抵抗及其信号通路的作用尚不清楚。本课题旨在研究黄地安消胶囊对胰岛素IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信号通路的调控作用,探讨其改善胰岛素抵抗可能的分子机制。方法1黄地安消胶囊对自发性T2DM模型GK大鼠IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信号通路的调控作用GK大鼠尾静脉消毒后测血糖,以随机血糖大于11.1mmol/L作为T2DM模型成功的标准。取符合标准的大鼠随机分为模型组、参芪降糖颗粒（1.08 g/kg）组、黄地安消胶囊（12.0、6.0、3.0 g/kg）组,每组10只,另取10只Wistar大鼠为正常对照组。各组给药6周后,测定大鼠的空腹血糖（FBG）、随机血糖（RBG）、血清胰岛素含量（FINS）、空腹血清血糖（FPG）、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、并进行糖耐量试验（OGTT）;对血脂（TC、TG、LDL-C）、糖化血红蛋白（HbA1c）、胰高血糖素样肽-1（GLP-1）、胰岛素样生长因子（...
【文章来源】：安徽中医药大学安徽省
【文章页数】：86 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
英文缩略词（Abbreviation）
前言
实验一 黄地安消胶囊对自发性T2DM模型GK大鼠胰岛素IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信号通路的调控作用
1 实验材料
1.1 实验动物
1.2 试验药物
1.3 试剂
1.4 仪器
2 实验方法
2.1 黄地安消胶囊样品的制备
2.2 动物模型的制备及给药方案
2.3 大鼠一般形态学观察
2.4 大鼠体质量检测
2.5 大鼠空腹血糖（FBG）和随机血糖（RBG）
2.6 大鼠血脂（TG、TC、LDL-C）检测
2.7 空腹血清血糖（FPG）,血清胰岛素（FINS）及胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）的计算
2.8 糖化血红蛋白（HbA1C）、胰高血糖素样肽-1（GLP-1）、胰岛素样生长因子（IGF-1）的测定
2.9 糖耐量实验（OGTT）的影响
2.10 大鼠胰腺组织和肝脏组织病理学观察
2.11 PAS染色观察大鼠肝脏组织糖原合成情况
2.12 免疫荧光组织化学染色法检测肝组织p-IRS-1、PI3K、p-Akt、p-GSK-3β蛋白的表达
2.13 RT-qPCR检测大鼠肝组织INSR、IRS-1、PI3K、Akt、GSK-3β和GSmRNA的表达
2.14 蛋白免疫印迹法检测肝组织INSR、p-IRS-1、PI3K、p-Akt、p-GSK-3β、GS蛋白的表达
3 统计学分析
4 结果
4.1 黄地安消胶囊对GK大鼠形态学的影响
4.2 黄地安消胶囊对GK大鼠体质量的影响
4.3 黄地安消胶囊对GK大鼠随机血糖（RBG）和空腹血糖（FBG）的影响
4.4 黄地安消胶囊对GK大鼠血脂TG、TC、LDL-C的影响
4.5 黄地安消胶囊对GK大鼠FPG、FINS、HOMA-IR的影响
4.6 黄地安消胶囊对GK大鼠HbA1c、GLP-1、IGF-1的影响.
4.7 黄地安消胶囊对GK大鼠OGTT实验的影响
4.8 黄地安消胶囊对GK大鼠病理形态学的影响
4.9 PAS染色观察黄地安消胶囊对GK大鼠肝糖原合成的影响
4.10 黄地安消胶囊对GK大鼠肝组织INSRmRNA和蛋白表达的影响
4.11 黄地安消胶囊对GK大鼠肝组织IRS-1mRNA和p-IRS-1蛋白表达的影响
4.12 黄地安消胶囊对GK大鼠肝组织PI3KmRNA和蛋白表达的影响
4.13 黄地安消胶囊对GK大鼠肝组织AktmRNA和p-Akt蛋白表达的影响
4.14 黄地安消胶囊对GK大鼠肝组织GSK-3βmRNA和p-GSK-3β蛋白表达的影响
4.15 黄地安消胶囊对GK大鼠肝组织GSmRNA和蛋白表达的影响
5 讨论
5.1 动物模型的选择
5.2 给药剂量选择依据
5.3 肝脏IR指标选择依据
5.4 肝脏IR与IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信号通路
实验二 黄地安消胶囊含药血清对高糖高胰岛素诱导的HepG2细胞IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信号通路的调控作用
1 实验材料
1.1 实验动物
1.2 实验药物
1.3 细胞株
1.4 试剂
1.5 仪器
1.6 溶液配制
2 实验方法
2.1 黄地安消胶囊含药血清的制备
2.2 HepG2细胞的培养
2.3 MTT法筛选黄地安消胶囊含药血清最佳浓度和作用时间
2.4 HepG2细胞分组与干预
2.5 RT-qPCR检测INSR、IRS-1、PI3K、Akt、GSK-3β和GSmRNA的表达
2.6 WB检测INSR、p-IRS-1、PI3K、p-Akt、p-GSK-3β和GS蛋白的表达
2.7 免疫荧光技术检测INSR、p-IRS-1、PI3K、p-Akt、p-GSK-3β和GS蛋白的表达
3 统计学分析
4 结果
4.1 黄地安消胶囊含药血清最佳浓度和作用时间的筛选
4.2 黄地安消胶囊含药血清对HepG2细胞中INSRmRNA和蛋白表达的影响
4.3 黄地安消胶囊含药血清对HepG2细胞中IRS-1mRNA和p-IRS-1蛋白表达的影响
4.4 黄地安消胶囊含药血清对HepG2细胞中PI3KmRNA和蛋白表达的影响
4.5 黄地安消胶囊含药血清对HepG2细胞中AktmRNA和p-Akt蛋白表达的影响
4.6 黄地安消胶囊含药血清对HepG2细胞中GSK-3βmRNA和p-GSK-3β蛋白表达的影响
4.7 黄地安消胶囊含药血清对HepG2细胞中GSmRNA和蛋白表达的影响
5 讨论
5.1 中药血清药物化学
5.2 黄地安消胶囊对HepG2细胞糖代谢的影响
5.3 黄地安消胶囊对IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信号通路的影响
结论
参考文献
综述
参考文献
个人简介
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]地黄功效考证[J]. 秦燕,朱建光. 中医学报. 2018(01)
[2]针灸对肥胖型多囊卵巢综合征患者脂联素、瘦素及胰岛素抵抗的影响[J]. 张亚琴. 中医学报. 2017(11)
[3]白子菜对HepG2细胞胰岛素抵抗作用的分子机制[J]. 韦乃球,郝二伟,冼寒梅,覃文慧,覃骊兰,李琦,柳俊辉. 中国实验方剂学杂志. 2018(02)
[4]知柏地黄丸对糖尿病前期阴虚燥热证人群干预的临床研究[J]. 龚敏,刘蔚,邹丽妍,白春英,周淑君. 中国中西医结合杂志. 2017(11)
[5]针灸配合化痰祛瘀方治疗2型糖尿病胰岛素抵抗临床研究[J]. 杨卫杰,曹晶晶,曹轶. 中医学报. 2017(10)
[6]正交试验法优选黄地安消胶囊的醇提和水提工艺研究[J]. 单莉,魏良兵,高家荣,姜楠楠,宋俊梅. 中医药临床杂志. 2017(08)
[7]黄地安消胶囊对改善2型糖尿病GK大鼠胰岛素抵抗的影响[J]. 郭明飞,高家荣,方朝晖,姜辉,赵进东,魏良兵,单莉,韩利平,姜楠楠. 中成药. 2017(08)
[8]黄地安消胶囊对GK大鼠肝脏胰岛素抵抗及信号通路的影响[J]. 高家荣,郭明飞,方朝晖,姜辉,魏良兵,单莉,韩利平,姜楠楠. 中药药理与临床. 2017(04)
[9]渴乐宁胶囊治疗气阴两虚型糖尿病的临床效果观察[J]. 利顺欣,李书文,庞景三. 中药药理与临床. 2017(03)
[10]黄芪注射液对糖尿病患者血清胰岛素样生长因子-1水平与颈动脉内膜中层厚度的影响[J]. 刘丽楠,王素莉,王颖,李敬华,姥勇,程晨. 现代中西医结合杂志. 2017(16)
本文编号：2967313
【文章来源】：安徽中医药大学安徽省
【文章页数】：86 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
英文缩略词（Abbreviation）
前言
实验一 黄地安消胶囊对自发性T2DM模型GK大鼠胰岛素IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信号通路的调控作用
1 实验材料
1.1 实验动物
1.2 试验药物
1.3 试剂
1.4 仪器
2 实验方法
2.1 黄地安消胶囊样品的制备
2.2 动物模型的制备及给药方案
2.3 大鼠一般形态学观察
2.4 大鼠体质量检测
2.5 大鼠空腹血糖（FBG）和随机血糖（RBG）
2.6 大鼠血脂（TG、TC、LDL-C）检测
2.7 空腹血清血糖（FPG）,血清胰岛素（FINS）及胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）的计算
2.8 糖化血红蛋白（HbA1C）、胰高血糖素样肽-1（GLP-1）、胰岛素样生长因子（IGF-1）的测定
2.9 糖耐量实验（OGTT）的影响
2.10 大鼠胰腺组织和肝脏组织病理学观察
2.11 PAS染色观察大鼠肝脏组织糖原合成情况
2.12 免疫荧光组织化学染色法检测肝组织p-IRS-1、PI3K、p-Akt、p-GSK-3β蛋白的表达
2.13 RT-qPCR检测大鼠肝组织INSR、IRS-1、PI3K、Akt、GSK-3β和GSmRNA的表达
2.14 蛋白免疫印迹法检测肝组织INSR、p-IRS-1、PI3K、p-Akt、p-GSK-3β、GS蛋白的表达
3 统计学分析
4 结果
4.1 黄地安消胶囊对GK大鼠形态学的影响
4.2 黄地安消胶囊对GK大鼠体质量的影响
4.3 黄地安消胶囊对GK大鼠随机血糖（RBG）和空腹血糖（FBG）的影响
4.4 黄地安消胶囊对GK大鼠血脂TG、TC、LDL-C的影响
4.5 黄地安消胶囊对GK大鼠FPG、FINS、HOMA-IR的影响
4.6 黄地安消胶囊对GK大鼠HbA1c、GLP-1、IGF-1的影响.
4.7 黄地安消胶囊对GK大鼠OGTT实验的影响
4.8 黄地安消胶囊对GK大鼠病理形态学的影响
4.9 PAS染色观察黄地安消胶囊对GK大鼠肝糖原合成的影响
4.10 黄地安消胶囊对GK大鼠肝组织INSRmRNA和蛋白表达的影响
4.11 黄地安消胶囊对GK大鼠肝组织IRS-1mRNA和p-IRS-1蛋白表达的影响
4.12 黄地安消胶囊对GK大鼠肝组织PI3KmRNA和蛋白表达的影响
4.13 黄地安消胶囊对GK大鼠肝组织AktmRNA和p-Akt蛋白表达的影响
4.14 黄地安消胶囊对GK大鼠肝组织GSK-3βmRNA和p-GSK-3β蛋白表达的影响
4.15 黄地安消胶囊对GK大鼠肝组织GSmRNA和蛋白表达的影响
5 讨论
5.1 动物模型的选择
5.2 给药剂量选择依据
5.3 肝脏IR指标选择依据
5.4 肝脏IR与IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信号通路
实验二 黄地安消胶囊含药血清对高糖高胰岛素诱导的HepG2细胞IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信号通路的调控作用
1 实验材料
1.1 实验动物
1.2 实验药物
1.3 细胞株
1.4 试剂
1.5 仪器
1.6 溶液配制
2 实验方法
2.1 黄地安消胶囊含药血清的制备
2.2 HepG2细胞的培养
2.3 MTT法筛选黄地安消胶囊含药血清最佳浓度和作用时间
2.4 HepG2细胞分组与干预
2.5 RT-qPCR检测INSR、IRS-1、PI3K、Akt、GSK-3β和GSmRNA的表达
2.6 WB检测INSR、p-IRS-1、PI3K、p-Akt、p-GSK-3β和GS蛋白的表达
2.7 免疫荧光技术检测INSR、p-IRS-1、PI3K、p-Akt、p-GSK-3β和GS蛋白的表达
3 统计学分析
4 结果
4.1 黄地安消胶囊含药血清最佳浓度和作用时间的筛选
4.2 黄地安消胶囊含药血清对HepG2细胞中INSRmRNA和蛋白表达的影响
4.3 黄地安消胶囊含药血清对HepG2细胞中IRS-1mRNA和p-IRS-1蛋白表达的影响
4.4 黄地安消胶囊含药血清对HepG2细胞中PI3KmRNA和蛋白表达的影响
4.5 黄地安消胶囊含药血清对HepG2细胞中AktmRNA和p-Akt蛋白表达的影响
4.6 黄地安消胶囊含药血清对HepG2细胞中GSK-3βmRNA和p-GSK-3β蛋白表达的影响
4.7 黄地安消胶囊含药血清对HepG2细胞中GSmRNA和蛋白表达的影响
5 讨论
5.1 中药血清药物化学
5.2 黄地安消胶囊对HepG2细胞糖代谢的影响
5.3 黄地安消胶囊对IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信号通路的影响
结论
参考文献
综述
参考文献
个人简介
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]地黄功效考证[J]. 秦燕,朱建光. 中医学报. 2018(01)
[2]针灸对肥胖型多囊卵巢综合征患者脂联素、瘦素及胰岛素抵抗的影响[J]. 张亚琴. 中医学报. 2017(11)
[3]白子菜对HepG2细胞胰岛素抵抗作用的分子机制[J]. 韦乃球,郝二伟,冼寒梅,覃文慧,覃骊兰,李琦,柳俊辉. 中国实验方剂学杂志. 2018(02)
[4]知柏地黄丸对糖尿病前期阴虚燥热证人群干预的临床研究[J]. 龚敏,刘蔚,邹丽妍,白春英,周淑君. 中国中西医结合杂志. 2017(11)
[5]针灸配合化痰祛瘀方治疗2型糖尿病胰岛素抵抗临床研究[J]. 杨卫杰,曹晶晶,曹轶. 中医学报. 2017(10)
[6]正交试验法优选黄地安消胶囊的醇提和水提工艺研究[J]. 单莉,魏良兵,高家荣,姜楠楠,宋俊梅. 中医药临床杂志. 2017(08)
[7]黄地安消胶囊对改善2型糖尿病GK大鼠胰岛素抵抗的影响[J]. 郭明飞,高家荣,方朝晖,姜辉,赵进东,魏良兵,单莉,韩利平,姜楠楠. 中成药. 2017(08)
[8]黄地安消胶囊对GK大鼠肝脏胰岛素抵抗及信号通路的影响[J]. 高家荣,郭明飞,方朝晖,姜辉,魏良兵,单莉,韩利平,姜楠楠. 中药药理与临床. 2017(04)
[9]渴乐宁胶囊治疗气阴两虚型糖尿病的临床效果观察[J]. 利顺欣,李书文,庞景三. 中药药理与临床. 2017(03)
[10]黄芪注射液对糖尿病患者血清胰岛素样生长因子-1水平与颈动脉内膜中层厚度的影响[J]. 刘丽楠,王素莉,王颖,李敬华,姥勇,程晨. 现代中西医结合杂志. 2017(16)
本文编号：2967313
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